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双侧卵巢切除大鼠下丘脑⁃垂体的转录组学特征及二仙汤的调节效应
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作者 潘志强 谢海纳 +5 位作者 曹琳娜 刘小美 卢文丽 贾冬威 彭佩克 方肇勤 《上海中医药杂志》 CSCD 2024年第7期65-76,共12页
目的利用RNA测序技术研究围绝经期综合征模型大鼠下丘脑-垂体的转录组学特征及二仙汤的作用。方法以大鼠双侧卵巢切除术模拟围绝经期综合征雌激素骤然下降状态。48只雌性SD大鼠,随机取假手术组12只,其余36只大鼠双侧卵巢切除术后再随机... 目的利用RNA测序技术研究围绝经期综合征模型大鼠下丘脑-垂体的转录组学特征及二仙汤的作用。方法以大鼠双侧卵巢切除术模拟围绝经期综合征雌激素骤然下降状态。48只雌性SD大鼠,随机取假手术组12只,其余36只大鼠双侧卵巢切除术后再随机分为双侧卵巢切除组、17β-雌二醇组、二仙汤组,每组12只。大鼠双侧卵巢切除术后第7天,17β-雌二醇组灌胃17β-雌二醇(0.1 mg·kg^(-1)·d^(-1)),二仙汤组灌胃二仙汤提取液(8 g·kg^(-1)·d^(-1)),每日灌胃1次,持续6周;假手术组与双侧卵巢切除组均灌胃等量的灭菌水。采用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测血清雌二醇(E2)、促性腺激素释放激素(GnRH)与β-内啡肽(β-EP)含量。采用mRNA转录组测序技术检测下丘脑与垂体,根据FPKM值与edgeR算法筛选组间差异表达基因,进行基因本体(GO)与京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集分析,并以实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应(RT-qPCR)法验证下丘脑雌激素受体α(Esr1)与线粒体编码的NADH脱氢酶亚基4(Mt-nd4)、垂体钙/钙调素依赖性蛋白激酶Ⅱα(Camk2a)与甲状腺激素受体α(Thra)共4个差异表达基因。结果①与假手术组比较,双侧卵巢切除组大鼠血清E2与β-EP显著下降(P<0.05);与双侧卵巢切除组比较,二仙汤组E2与β-EP水平显著升高(P<0.05)。②大鼠下丘脑与垂体可检测基因数量均为30957个。③与假手术组比较,双侧卵巢切除大鼠下丘脑上调基因135个、下调基因348个,垂体上调基因409个、下调基因82个。与双侧卵巢切除组比较,17β-雌二醇治疗后大鼠下丘脑上调基因126个、下调基因225个,垂体上调基因93个、下调基因273个;二仙汤治疗后大鼠下丘脑上调基因91个、下调基因92个,垂体上调基因390个、下调基因376个。④GO分析表明,下丘脑与垂体差异表达基因富集于细胞过程、生物学调控、代谢过程等。⑤KEGG呈现了下丘脑与垂体的差异表达基因富集前30个信号通路,其中二仙汤调节尼古丁成瘾、氮代谢、突触囊泡循环等信号通路。⑥RT-qPCR所验证的二仙汤显著调节的Esr1、Mt-nd4、Camk2a基因表达变化与转录测序结果一致。结论双侧卵巢切除大鼠下丘脑与垂体的神经内分泌系统处于紊乱状态,17β-雌二醇侧重于调节下丘脑基因,二仙汤对垂体调节更广、更深。 展开更多
关键词 围绝经期综合征 二仙汤 下丘脑 垂体 RNA测序 作用机制 中药研究
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糖尿病模型大鼠证候的特征及演变 被引量:13
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作者 刘小美 方肇勤 +2 位作者 卢文丽 潘志强 舒适 《辽宁中医杂志》 CAS 北大核心 2008年第1期130-134,共5页
目的:观察糖尿病(diabetes mellitus,DM)模型大鼠证候的发生与演变。方法:采用链脲佐菌素(STZ)腹腔注射,或结合高脂饲料喂养形成糖尿病模型,根据血糖诊断为隐性DM大鼠、2型DM大鼠、1型DM大鼠;同步检测体重、饮水、摄食、腋温、心率、爪... 目的:观察糖尿病(diabetes mellitus,DM)模型大鼠证候的发生与演变。方法:采用链脲佐菌素(STZ)腹腔注射,或结合高脂饲料喂养形成糖尿病模型,根据血糖诊断为隐性DM大鼠、2型DM大鼠、1型DM大鼠;同步检测体重、饮水、摄食、腋温、心率、爪、尾显微放大拍照及图像处理得到γ值、旷场水平跨格数和垂直站立数、抓力,求出正常对照组各指标均数,及各组的各动物实测值与正常对照组均数的比值,制定阴虚程度、阳气程度及胃热程度等计量辨证方法,对各组四诊进行比较。结果:1型DM大鼠成模后证候迅速发展为胃热、阴虚证候,并持续加剧、严重,早期见有阳气旺盛,以后逐渐发展至阳虚、气虚证,出现阴虚胃热兼气虚、阳虚证。2型DM成模后逐渐发展为胃热、阴虚证候,并持续加剧,程度轻于1型DM;成模早期有阳气旺盛倾向,以后逐渐向阳虚、气虚证过渡,但程度轻,不典型。隐性DM有轻度的胃热证候,且主要表现为饮水增加,其余证候不明显。结论:糖尿病大鼠存在特殊的证候、兼证,及其演变规律,其证候的严重程度是可以定量的,因而本研究对于糖尿病模型大鼠辨证论治治法的确定和评价奠定了基础。 展开更多
关键词 糖尿病 链脲佐菌素 大鼠 证候 辨证
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基于网络药理学和体外实验探索黄连-大黄-肉桂复方治疗肝癌的作用机制
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作者 何佳慧 陈佳悦 +1 位作者 陈心怡 刘小美 《中西医结合肝病杂志》 CAS 2023年第12期1082-1086,1091,共6页
目的:基于网络药理学和体外实验探索黄连-大黄-肉桂复方(RRC)治疗肝癌的作用机制。方法:通过TCMSP数据库检索RRC的主要活性成分及其对应靶点蛋白,通过Genecards数据库检索肝癌相关基因,采用Venny交集RRC靶点和肝癌相关基因;运用Cytoscap... 目的:基于网络药理学和体外实验探索黄连-大黄-肉桂复方(RRC)治疗肝癌的作用机制。方法:通过TCMSP数据库检索RRC的主要活性成分及其对应靶点蛋白,通过Genecards数据库检索肝癌相关基因,采用Venny交集RRC靶点和肝癌相关基因;运用Cytoscape构建复方中药-成分-肝癌靶点网络图;运用DAVID和微生信等在线软件对RRC与肝癌的交集靶点进行GO和KEGG通路富集分析。采用CCK-8法、流式细胞术和RT-qPCR法分析RRC干预后人肝癌细胞增殖、凋亡及相关凋亡基因mRNA表达的变化,验证上述网络药理学分析结果。结果:筛选到RRC活性成分34个,其中25个含作用靶点,其靶点-肝癌交集基因共190个;复方中药-成分-肝癌靶点网络图显示每个成分均对应多个靶点,每个靶点均受多个成分调控;GO和KEGG分析均显示细胞凋亡等通路显著富集。体外实验证实,各浓度梯度RRC均能不同程度地抑制肝癌细胞增殖,且具有一定的量效和时效关系,1.5 mg/ml RRC能显著抑制肝癌细胞凋亡,上调外源性凋亡途径中相关基因的mRNA表达。结论:RRC治疗肝癌具有多靶点和多通路的作用特点,通过激活外源性凋亡途径,诱导肝癌细胞凋亡,可能是其抗肝癌作用的主要作用机制之一。 展开更多
关键词 肝癌 网络药理学 黄连-大黄-肉桂复方 凋亡
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不同高脂饲料致高脂血症大鼠模型的比较及评价 被引量:14
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作者 刘小美 方肇勤 +3 位作者 潘志强 卢文丽 舒适 宋丽娜 《陕西中医》 北大核心 2008年第12期1680-1682,共3页
目的:比较两种不同配方高脂饲料致高脂血症大鼠模型的异同点,并对其优劣进行初步评价。方法:根据喂饲高脂饲料配方不同,将大鼠分为高脂血症1组(B1),喂饲纯高脂饲料,以及高脂血症2组(C1),喂饲高脂加高蛋白饲料,造成高脂血症模型;6周后,... 目的:比较两种不同配方高脂饲料致高脂血症大鼠模型的异同点,并对其优劣进行初步评价。方法:根据喂饲高脂饲料配方不同,将大鼠分为高脂血症1组(B1),喂饲纯高脂饲料,以及高脂血症2组(C1),喂饲高脂加高蛋白饲料,造成高脂血症模型;6周后,检测体重、体长、Lee’s指数、空腹血糖(FBG)、2h血糖、胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、肝体比等指标。结果:1两种不同饲料喂养6周后大鼠的胆固醇均升高,即模型成功。2B1组大鼠胆固醇、Lee’s指数、空腹血糖、肝体比均高于C1组大鼠。结论:纯高脂饲料较之高脂加高蛋白饲料能在更短的时间内形成高脂血症,高脂同时摄入高蛋白初期有助脂肪代谢,但不能防止高脂血症的发生。 展开更多
关键词 高脂血症/病因病机 大鼠 实验研究
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复方黄连降糖片对2型糖尿病大鼠血糖影响的量-效及时-效关系研究 被引量:5
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作者 刘小美 宋菊敏 +3 位作者 刘丽琼 舒适 吴中华 施建铃 《时珍国医国药》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期601-603,共3页
目的探讨复方黄连降糖片对2型糖尿病大鼠血糖影响的量-效及时-效关系。方法对小剂量链脲佐菌素注射加高脂饮食诱导的2型糖尿病大鼠,给予复方黄连降糖片小、中、大3个剂量治疗,治疗2,4周和8周时,测定空腹血糖和糖负荷2 h血糖。8周处死时... 目的探讨复方黄连降糖片对2型糖尿病大鼠血糖影响的量-效及时-效关系。方法对小剂量链脲佐菌素注射加高脂饮食诱导的2型糖尿病大鼠,给予复方黄连降糖片小、中、大3个剂量治疗,治疗2,4周和8周时,测定空腹血糖和糖负荷2 h血糖。8周处死时取血清测定血脂四项。结果①治疗2周时,3个剂量组的药物对空腹血糖和2 h血糖均未见明显影响,治疗4周时只有中剂量组两者都有明显降低(均为P<0.05)。到治疗8周时,3个剂量组的空腹血糖均显著降低(均为P<0.001),但2 h血糖只有中剂量组的明显降低(P<0.05)。②8周时,中剂量组对胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL)和甘油三酯(TG)都有明显的降低作用(分别为P<0.05,P<0.001,P<0.01),小剂量组只对TG有明显下降作用(P<0.05),大剂量组只对LDL和TG有显著下降作用(均为P<0.01)。结论中剂量治疗8周较其他给药方法作用强。 展开更多
关键词 糖尿病 复方黄连降糖片 量-效关系 时-效关系 大鼠
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不同证候H22荷瘤小鼠垂体一致上调或下调的基因 被引量:9
6
作者 刘小美 方肇勤 +8 位作者 潘志强 卢文丽 梁超 吴中华 侯俐 张辉 卓少元 廖明娟 高必峰 《上海中医药大学学报》 CAS 2008年第4期75-79,共5页
目的:观察常见不同证候荷瘤小鼠垂体基因表达的特征。方法:采用H22荷瘤小鼠及其标准化四诊及辨证方法,以及GeneChip Mouse Exon 1.0 ST Array等技术,检测荷瘤小鼠早期邪毒壅盛证和气虚证、中期阳气虚证、中晚期气阴阳虚证等4个证候及正... 目的:观察常见不同证候荷瘤小鼠垂体基因表达的特征。方法:采用H22荷瘤小鼠及其标准化四诊及辨证方法,以及GeneChip Mouse Exon 1.0 ST Array等技术,检测荷瘤小鼠早期邪毒壅盛证和气虚证、中期阳气虚证、中晚期气阴阳虚证等4个证候及正常小鼠垂体基因的表达,筛选出不同证候一致上调或下调的基因。结果:荷瘤小鼠一致上调的基因有Alas2、Ube2l6、Sgk、BC055107、Cdh26、Bhlhb2、Nr1d2、Slc39a14、Serpina3n、Ms4a6c、Lcp1、Dhx8、Il1r1、S100a8、S100a9、Cxcl1、Hp、Csf1r、RIKEN cDNA2610307008gene、Phactr3、Mknk1、Aloxe3、Aqp11等23个;一致下调的基因有2310047A01Rik、Hoxa10、Cryaa、Hspa1a、Dub2a、Mpz、Klk1、Naaladl1、Prph1等9个;其中部分基因在一些证候中的表达有显著的改变。结论:肿瘤发生后,H22荷瘤小鼠垂体存在大量基因表达的差异,其中部分与证候有关。 展开更多
关键词 小鼠 肿瘤 垂体 证候 基因 基因芯片
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不同证候H22荷瘤小鼠垂体高表达基因分析 被引量:6
7
作者 刘小美 方肇勤 +4 位作者 潘志强 卢文丽 梁超 吴中华 高必峰 《中西医结合肝病杂志》 CAS 2009年第5期290-294,共5页
目的:筛选不同证候荷瘤小鼠垂体高表达基因。方法:采用荷瘤小鼠及其标准化四诊及辨证方法,以及GeneChip Mouse Exon 1.0 STArray等技术,检测正常小鼠及不同证候H22荷瘤小鼠垂体的基因表达,筛选各证候小鼠垂体芯片读数均≥6000的基因。结... 目的:筛选不同证候荷瘤小鼠垂体高表达基因。方法:采用荷瘤小鼠及其标准化四诊及辨证方法,以及GeneChip Mouse Exon 1.0 STArray等技术,检测正常小鼠及不同证候H22荷瘤小鼠垂体的基因表达,筛选各证候小鼠垂体芯片读数均≥6000的基因。结果:各证候荷瘤小鼠芯片读数均≥6000的基因共28个,其中实证下调、虚证均上调的基因5个:Dapk3、Spint2、Gnas、LOC677374、Pdia6;早期下调,中期、中晚期上调的基因12个:Pomc1、Scg5、Cga、Prl、Gh、Scg2、LOC672819、Rps5、Pdia3、Gnb2l1、Mdh1、Itm2b;各证候一致上调的基因9个:Ctsb、Bsg、Hsp90b1、Hspa5、Sec11l1、Serinc1、Psap、LOC671023、LOC546840;不符合以上3种规律的两个:Slc25a4、Laptm4a。结论:肿瘤发生后,不同证候H22荷瘤小鼠垂体存在大量的高表达基因,与垂体的功能密切相关,其共同的特点为早期特别是邪毒证小鼠垂体的功能稍有抑制,至中期和中晚期垂体的功能非常活跃。 展开更多
关键词 小鼠 肿瘤 垂体 证候 基因 基因芯片
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以PTEN为靶点的中药防治原发性肝癌研究进展 被引量:7
8
作者 刘小美 方肇勤 潘志强 《中国中医药信息杂志》 CAS CSCD 2018年第6期129-132,共4页
抑癌基因张力蛋白同源10号染色体缺失的磷酸酶基因(PTEN)是原发性肝癌及其他肿瘤发生和发展过程中的重要负性调控分子。中医药在原发性肝癌防治方面具有独特优势,本文综述近10年以PTEN为靶点的中药防治原发性肝癌研究进展,为深入研究及... 抑癌基因张力蛋白同源10号染色体缺失的磷酸酶基因(PTEN)是原发性肝癌及其他肿瘤发生和发展过程中的重要负性调控分子。中医药在原发性肝癌防治方面具有独特优势,本文综述近10年以PTEN为靶点的中药防治原发性肝癌研究进展,为深入研究及临床应用提供参考。 展开更多
关键词 张力蛋白同源10号染色体缺失的磷酸酶基因 中药 原发性肝癌 综述
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两种配方高脂饲料致高脂血症大鼠的证候比较 被引量:12
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作者 刘小美 方肇勤 +3 位作者 潘志强 卢文丽 舒适 宋丽娜 《安徽中医学院学报》 CAS 2008年第2期33-37,共5页
目的:比较两种配方高脂饲料致高脂血症大鼠模型的证候特点。方法:根据喂饲高脂饲料配方的不同,将大鼠分为高脂血症1组(B1),喂饲单纯高脂饲料;高脂血症2组(C1),喂饲高蛋白加高脂饲料。同步检测饮水,摄食,体质量,抓力,腋温,爪、尾显微放... 目的:比较两种配方高脂饲料致高脂血症大鼠模型的证候特点。方法:根据喂饲高脂饲料配方的不同,将大鼠分为高脂血症1组(B1),喂饲单纯高脂饲料;高脂血症2组(C1),喂饲高蛋白加高脂饲料。同步检测饮水,摄食,体质量,抓力,腋温,爪、尾显微放大拍照及图像处理得到r值,旷场水平跨格数和垂直站立数,计量辨证其气盛衰度、阴盛衰度、阳热程度及痰湿程度,对两组证候及其演变进行比较。结果:模型复制第42天,模型大鼠血胆固醇升高,但升高幅度不大;三酰甘油不升反降。在证候方面,两组没有出现痰湿证。C1组在饮食量、气和阴精盛衰程度,以及痰湿证候表现、血脂水平等方面均优于B1组。结论:喂饲高脂饲料可形成稳定的高脂血症大鼠模型,其方法还需要探索。高脂饲料中蛋白质含量的高低,对大鼠证候存在一定的影响。 展开更多
关键词 高脂血症 高脂饲料 证候模型
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均匀设计优选小檗碱、大黄素、桂皮醛抗肝癌最佳配伍的体内研究 被引量:4
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作者 刘小美 潘志强 +5 位作者 方肇勤 吴中华 王晓敏 梁龙龙 彭磊 李素云 《上海中医药杂志》 2018年第1期77-80,共4页
目的均匀设计优选小檗碱、大黄素、桂皮醛抗肝癌的最佳组分配伍。方法右腋下皮下注射人肝癌细胞建立裸鼠肝癌移植瘤模型,采用均匀设计表U_6(6~4)就小檗碱、大黄素、桂皮醛进行"3因子6水平"的分组设计给药,给药2周,其间观察小... 目的均匀设计优选小檗碱、大黄素、桂皮醛抗肝癌的最佳组分配伍。方法右腋下皮下注射人肝癌细胞建立裸鼠肝癌移植瘤模型,采用均匀设计表U_6(6~4)就小檗碱、大黄素、桂皮醛进行"3因子6水平"的分组设计给药,给药2周,其间观察小鼠的状态和死亡情况、体质量、瘤体积变化,处死小鼠后取瘤体称重,计算抑瘤率,并常规制作肿瘤组织病理切片。以抑瘤率作为主要筛选指标,并经均匀设计回归分析获得三者的最佳配伍方式。结果 (1)各组小鼠状态无异常,无死亡情况。(2)各用药组小鼠体质量有降低趋势。(3)与模型组比较,各用药组的瘤体积及瘤重均有降低趋势,即均具有不同程度的抑瘤作用,其中以配伍4组作用为甚,其抑瘤率约为23%。(4)病理切片显示肿瘤的特征性组织形态,含细胞大小、形态、核浆比、核型及细胞间质变化,其中以配伍4组的形态变化优于其他各组。(5)筛选获得回归方程Y=1.95+1.302A-0.253B+0.290C,即当小檗碱(A)和桂皮醛(C)分别取最大值10μg/g和50μg/g,大黄素(B)取最小值25μg/g时,三者配伍能达到最佳的抑瘤效果。结论小檗碱、大黄素、桂皮醛三者配伍能有效抑制肝癌组织的生长,其最佳配伍比例为2∶5∶10。 展开更多
关键词 小檗碱 大黄素 桂皮醛 肝癌 组分配伍
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H_(22)荷瘤小鼠早期垂体差异表达的基因及其特征 被引量:2
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作者 刘小美 方肇勤 +8 位作者 潘志强 卢文丽 梁超 吴中华 侯俐 张辉 卓少元 廖明娟 高必峰 《中华中医药学刊》 CAS 2009年第3期603-607,共5页
目的:筛选荷瘤小鼠早期垂体差异表达的基因,并简要分析其功能特征。方法:采用荷瘤小鼠标准化四诊及辨证方法,及GeneChip Mouse Exon1.0STArray等技术,检测H22荷瘤小鼠早期邪毒壅盛证和气虚证、中期阳气虚证、中晚期气阴阳虚证共3阶段4... 目的:筛选荷瘤小鼠早期垂体差异表达的基因,并简要分析其功能特征。方法:采用荷瘤小鼠标准化四诊及辨证方法,及GeneChip Mouse Exon1.0STArray等技术,检测H22荷瘤小鼠早期邪毒壅盛证和气虚证、中期阳气虚证、中晚期气阴阳虚证共3阶段4个证候垂体基因表达的差异,重点关注早期垂体差异表达的基因。结果:筛选到早期上调的基因12个:Alb1、Timp3、Ifi44、Kdr、Cbln3、Hectd2、Hecw2、Vtn、LOC631028、LOC630776、4933427I04Rik、A630075K04Rik。下调的基因17个:Klk1b27、Klk1b26、Klk1b4、Klk1b22、Klk1b3、Klk1、Klk1b16、Muc10、Cryaa、Bag3、Gsg2、Six2、Saa3、1700108L22Rik、LOC628820、2310057J18Rik、2410002I01Rik。结论:H22荷瘤小鼠早期垂体基因表达改变集中表现为保护蛋白的功能减弱、细胞周期改变,以及血管、神经、表皮生成存在障碍的倾向,这可能与荷瘤小鼠早期垂体应激代偿,甚至是失代偿有关。其中Cbln3可能是邪毒壅盛证的标志基因之一。 展开更多
关键词 小鼠 肿瘤 垂体 证候 基因 基因芯片
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阳气虚证H22荷瘤小鼠垂体差异表达的基因 被引量:3
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作者 刘小美 方肇勤 +8 位作者 潘志强 卢文丽 梁超 吴中华 侯俐 张辉 卓少元 廖明娟 高必峰 《吉林中医药》 2008年第12期925-929,共5页
目的:筛选荷瘤小鼠阳气虚证垂体差异表达的基因,并简要分析其功能特征。方法:采用荷瘤小鼠及其标准化四诊及辨证方法,及GeneChip Mouse Exon1.0 ST Array等技术,检测H22荷瘤小鼠早期邪毒壅盛证和气虚证、中期阳气虚证、中晚期气阴阳虚证... 目的:筛选荷瘤小鼠阳气虚证垂体差异表达的基因,并简要分析其功能特征。方法:采用荷瘤小鼠及其标准化四诊及辨证方法,及GeneChip Mouse Exon1.0 ST Array等技术,检测H22荷瘤小鼠早期邪毒壅盛证和气虚证、中期阳气虚证、中晚期气阴阳虚证共3阶段4个证候垂体基因表达的差异,重点关注那些表达量大、差异显著的基因,筛选阳气虚证差异表达的基因。结果:筛选到阳气虚证独特上调的基因14个:LOC669166、Cd8b1、Cd3d、Ly6d、Lat、Orm2、Dntt、1700021K02Rik、A130072A22Rik、LOC669782、Ptprc、Igk-V21-9、Cxcl13、LOC668417,其中多数基因在正常小鼠及其他证候小鼠的垂体表达很低或几乎关闭;独特下调的基因3个:Wfdc1、Spock3、Mfap4。结论:H22荷瘤小鼠阳气虚证垂体基因表达与其他证候存在较大差异,其中部分可能是阳气虚证的标志基因。 展开更多
关键词 肿瘤 小鼠 垂体 阳气虚证 基因 基因芯片
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邪毒壅盛证和气虚证荷瘤小鼠垂体上调与下调的基因 被引量:7
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作者 刘小美 方肇勤 +8 位作者 潘志强 卢文丽 梁超 吴中华 侯俐 张辉 卓少元 廖明娟 高必峰 《浙江中西医结合杂志》 2008年第11期664-666,共3页
目的:揭示荷瘤小鼠早期邪毒壅盛证与气虚证垂体基因表达的差异。方法:采用小鼠标准化四诊及辨证方法,及GeneChip Mouse Exon 1.0 ST Array等技术,检测H22荷瘤小鼠早期邪毒壅盛证和气虚证、中期阳气虚证、中晚期气阴阳虚证3阶段4个证候... 目的:揭示荷瘤小鼠早期邪毒壅盛证与气虚证垂体基因表达的差异。方法:采用小鼠标准化四诊及辨证方法,及GeneChip Mouse Exon 1.0 ST Array等技术,检测H22荷瘤小鼠早期邪毒壅盛证和气虚证、中期阳气虚证、中晚期气阴阳虚证3阶段4个证候垂体的基因表达,筛选邪毒壅盛和气虚两证候垂体基因表达与正常比较一致上调或下调的基因。结果:①邪毒壅盛证和气虚证垂体表达上调的基因有5个,其中邪毒壅盛证Alas2、Sgk、Cbln3表达高,十分突出,可能与该证候形成有关;②邪毒壅盛证和气虚证的垂体有13个基因表达几乎关闭,其中Abpg、Pip,以及Car6、Klk1b22、Klk1b3、Klk1b9、Muc10、Ren1、Hspa1a、Wfdc12等基因在正常组表达量大。结论:荷瘤小鼠垂体早期出现显著的衰退表现,而个别基因表达的增加,可能与邪毒壅盛有关。 展开更多
关键词 小鼠 肿瘤 垂体 邪毒壅盛证 气虚证 基因 基因芯片
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复方黄连降糖片对2型糖尿病模型大鼠肝脏低密度脂蛋白受体基因表达的影响 被引量:8
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作者 刘小美 宋菊敏 +3 位作者 刘丽琼 舒适 吴中华 施建玲 《山东中医杂志》 2006年第12期838-841,共4页
目的:探讨复方黄连降糖片治疗2型糖尿病高脂血症的作用机制。方法:对链脲佐菌素注射加高脂饮食诱导的2型糖尿病模型大鼠,给予复方黄连降糖片治疗,共8周。酶法测定血脂四项的浓度,RT-PCR法测定大鼠肝脏LDLRmRNA的表达及Western blot法检... 目的:探讨复方黄连降糖片治疗2型糖尿病高脂血症的作用机制。方法:对链脲佐菌素注射加高脂饮食诱导的2型糖尿病模型大鼠,给予复方黄连降糖片治疗,共8周。酶法测定血脂四项的浓度,RT-PCR法测定大鼠肝脏LDLRmRNA的表达及Western blot法检测肝脏LDLR蛋白的表达。结果:治疗8周时,复方黄连降糖片治疗组糖尿病大鼠的血清TC、TG和LDL-C浓度明显下降,肝脏LDLRmRNA水平比未治疗组有所升高,其蛋白表达明显高于未治疗组(中剂量组P<0.01,大剂量组P<0.05)。结论:复方黄连降糖片可增强2型糖尿病大鼠肝脏LDLR的基因表达,其防治糖尿病高脂血症的作用可能与增加LDLR的基因表达有关。 展开更多
关键词 2型糖尿病 复方黄连降糖片 低密度脂蛋白受体 大鼠 实验研究
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气虚证大鼠垂体一致下调的基因 被引量:1
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作者 刘小美 方肇勤 +3 位作者 卢文丽 潘志强 管冬元 粱超 《中华中医药学刊》 CAS 2010年第6期1240-1243,共4页
目的:探索气虚证在大鼠垂体基因表达层面的物质基础。方法:采用16周龄Wistar大鼠、自发性高血压大鼠(SHR大鼠)、自发性糖尿病大鼠(GK大鼠),综合应用标准化大鼠诊法,及GeneChip Rat Gene1.0ST Array等技术,检测正常Wistar大鼠、正常气虚W... 目的:探索气虚证在大鼠垂体基因表达层面的物质基础。方法:采用16周龄Wistar大鼠、自发性高血压大鼠(SHR大鼠)、自发性糖尿病大鼠(GK大鼠),综合应用标准化大鼠诊法,及GeneChip Rat Gene1.0ST Array等技术,检测正常Wistar大鼠、正常气虚Wistar大鼠、SHR气盛大鼠、SHR气虚大鼠、GK气盛大鼠、GK气虚大鼠等垂体基因的表达,重点关注3个气虚证垂体基因表达较正常对照一致下调的基因。结果:共筛选得到24个基因,(1)与基因转录、翻译和修饰有关的基因8个:Leo1、Aatf、Myst2、Ttc12、Mtfmt、Sdccag10、Nmt2、LOC364236;(2)与信号转导、细胞活动、细胞生命有关的基因10个:Plce1、Sgk1、Sema3a、Nrp1、Tagln、Rnf185、Arl5b、Pcdhb20、Stk17b、Sept1;(3)不属于以上两类的6个:Fdft1、Abca5、Aox1、Ccdc93、RGD131055、AB086234(mRNA号)。结论:气虚大鼠垂体有其特征性的下调基因群,其具体的调控机制及生理/病理意义,以及与那些上调基因群的关系,有待深入的研究。 展开更多
关键词 大鼠 高血压 糖尿病 垂体 气虚 基因芯片
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气虚证大鼠垂体高表达且上调的基因 被引量:2
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作者 刘小美 方肇勤 +4 位作者 卢文丽 潘志强 管冬元 粱超 高必峰 《世界科学技术-中医药现代化》 2010年第5期718-722,共5页
目的:通过筛选正常气虚、高血压气虚、糖尿病气虚等气虚大鼠垂体高表达且上调的基因,探索气虚证在垂体基因表达层面的物质基础。方法:采用16周龄Wistar大鼠、自发性高血压大鼠(SHR大鼠)、自发性糖尿病大鼠(GK大鼠),综合应用标准化大鼠诊... 目的:通过筛选正常气虚、高血压气虚、糖尿病气虚等气虚大鼠垂体高表达且上调的基因,探索气虚证在垂体基因表达层面的物质基础。方法:采用16周龄Wistar大鼠、自发性高血压大鼠(SHR大鼠)、自发性糖尿病大鼠(GK大鼠),综合应用标准化大鼠诊法,及GeneChip Rat Gene 1.0 ST Array等技术,检测正常Wistar大鼠、正常气虚Wistar大鼠、SHR气盛大鼠、SHR气虚大鼠、GK气盛大鼠、GK气虚大鼠等垂体基因的表达,重点关注3个气虚证中垂体基因表达大于1000且较正常一致上调的基因。结果:共筛选得到34个基因:Arhgdia、Arfgap1、Rab 21、Arf5、Arf3、Cdipt、Cds2、Pld3、Ppp3ca、Ppp3cb、Trim35、Itm2b、Itm2c、Tob1、Oaz1、Maged1、Gpc4、Glg1、wdr6、Scarb2、Grn、Hnrpd、Hnrnpab、Snrpb、Gtf2i、Ascl1、Pnrc1、Eef2、Eno2、Gls、Ucp2、Atp6v0c、Pomc、Syp。结论:鉴于以上基因中参与基因转录和翻译有关的基因,以及参与能量代谢相关基因表达活跃,一些调控有关靶器官的功能性基因,如POMC亦表达活跃,且大多与细胞活动有关的基因表达增加,提示气虚证大鼠垂体处于一种积极的代偿状态,这可能是气虚证在垂体层面的物质基础。 展开更多
关键词 高血压 糖尿病 垂体 气虚 证候基因 基因芯片
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荷瘤小鼠虚证、实证垂体基因表达的差异 被引量:3
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作者 刘小美 方肇勤 +8 位作者 潘志强 卢文丽 梁超 吴中华 侯俐 张辉 卓少元 廖明娟 高必峰 《河南中医》 2009年第1期34-38,共5页
目的:揭示荷瘤小鼠实证与虚证垂体基因表达的差异。方法:采用四诊计量检测方法及计量辨证方法,运用GeneChip Mouse Exon 1.0 STArray等技术,检测H22荷瘤小鼠早期邪毒壅盛证和气虚证、中期阳气虚证、中晚期气阴阳虚证共3阶段4个证候垂体... 目的:揭示荷瘤小鼠实证与虚证垂体基因表达的差异。方法:采用四诊计量检测方法及计量辨证方法,运用GeneChip Mouse Exon 1.0 STArray等技术,检测H22荷瘤小鼠早期邪毒壅盛证和气虚证、中期阳气虚证、中晚期气阴阳虚证共3阶段4个证候垂体基因表达的差异,重点关注那些表达量大、差异显著的基因。筛选出邪毒壅盛证较其他三个证候一致上调或下调的基因。结果:筛选出邪毒壅盛较其他三证一致上调的基因121个,介绍了邪毒壅盛证芯片读数大于1500的9个基因:Gabra6、D0H4S114、Alas2、Pvalb、Plp1I、tpr1、Ndrg2、LOC627016、Gpm6b;一致下调的基因340个,介绍了正常小鼠芯片读数大于1500的21个基因:Abpg、Pip、Dlk1、Car6、Eif3s5、Gnb2、Pcsk1n、Aplp1、Slc22a17、Dnpep、Rnf187、LOC639100、Rab1b、Aldh2、Pten、Tapbp、2310044H10Rik、Cxxc5、Gatad1、Ren1、Lrp11。结论:H22荷瘤小鼠的实证与虚证,其垂体基因存在大量的表达差异,其中部分可能是实证与虚证的标志基因。 展开更多
关键词 小鼠 肿瘤 垂体 实证 虚证 基因 证候
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糖尿病GK大鼠证候特征及其个体化辨证论治疗效评价 被引量:2
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作者 刘小美 方肇勤 +3 位作者 卢文丽 潘志强 管冬元 梁超 《实验动物与比较医学》 CAS 2010年第4期265-268,272,共5页
目的观察糖尿病GK大鼠的特征性证候,探讨个体化辨证论治糖尿病的疗效。方法将GK大鼠分为模型组、西药组以及中西药结合辨证论治组(辨证组),以Wistar大鼠作为正常对照,给予饮用水或相应药物干预,观察证候及随机血糖的变化。结果个... 目的观察糖尿病GK大鼠的特征性证候,探讨个体化辨证论治糖尿病的疗效。方法将GK大鼠分为模型组、西药组以及中西药结合辨证论治组(辨证组),以Wistar大鼠作为正常对照,给予饮用水或相应药物干预,观察证候及随机血糖的变化。结果个体辨证治疗对糖尿病大鼠的胃热程度及随机血糖均有较好的改善作用,对阴盛衰度有改善趋势,对气盛衰度影响具有阶段性。结论GK大鼠存在特殊的证候、兼证,及其演变规律,个体辨证论治具有一定优势,但其疗效评价还有广阔的探索空间。 展开更多
关键词 GK大鼠 证候 辨证论治 疗效评价
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2型糖尿病大鼠胰岛素受体底物-2基因表达变化及中药的干预作用 被引量:1
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作者 刘小美 舒适 +2 位作者 宋丽娜 周金芳 宋菊敏 《辽宁中医杂志》 CAS 北大核心 2009年第9期1600-1602,共3页
目的:观察2型糖尿病大鼠血糖、血清胰岛素浓度和胰岛素受体底物-2(insulin receptor substrate 2,IRS-2)基因表达的变化及复方黄连降糖片对其变化的影响。方法:以小剂量链脲佐菌素(28mg/kg)腹腔注射合并高脂饮食诱导2型糖尿病大鼠模型,... 目的:观察2型糖尿病大鼠血糖、血清胰岛素浓度和胰岛素受体底物-2(insulin receptor substrate 2,IRS-2)基因表达的变化及复方黄连降糖片对其变化的影响。方法:以小剂量链脲佐菌素(28mg/kg)腹腔注射合并高脂饮食诱导2型糖尿病大鼠模型,给予不同剂量复方黄连降糖片治疗8周。处死后分别测定其血糖、血清胰岛素浓度,肝脏、骨骼肌和脂肪组织的IRS-2的mRNA及蛋白表达。结果:2型糖尿病大鼠的血糖、血清胰岛素升高,各组织IRS-2的mRNA及蛋白表达下降;复方黄连降糖片能降低模型大鼠的血糖和血清胰岛素,并能显著升高各组织IRS-2的mRNA及蛋白表达。结论:复方黄连降糖片治疗2型糖尿病可能与其提高外周组织IRS-2的基因表达从而改善胰岛素的信号传导有关。 展开更多
关键词 2型糖尿病 复方黄连降糖片 胰岛素受体底物-2(IRS-2)
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邪毒证肝癌小鼠垂体促肾上腺皮质激素表达异常的机制研究 被引量:1
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作者 刘小美 方肇勤 +1 位作者 吴中华 梁超 《中西医结合肝病杂志》 CAS 2013年第4期222-224,250,共4页
目的:在以往动物实验发现邪毒证肝癌小鼠下丘脑促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)和垂体促肾上腺皮质激素(ACTH)前体阿黑皮素原(Pomc)表达均降低,而血液ACTH表达异常升高且伴随昼夜节律通路和蛋白激酶A(PKA)通路均较活跃;这种情况推测与邪... 目的:在以往动物实验发现邪毒证肝癌小鼠下丘脑促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)和垂体促肾上腺皮质激素(ACTH)前体阿黑皮素原(Pomc)表达均降低,而血液ACTH表达异常升高且伴随昼夜节律通路和蛋白激酶A(PKA)通路均较活跃;这种情况推测与邪毒证肝癌小鼠垂体Pomc与ACTH并不同步发生变化,而其ACTH的异常升高可能与CRH释放频率增加有关,PKA通路参与介导此过程。鉴此,本项目在体外观察CRH释放频率改变对垂体细胞ACTH分泌和Pomc表达的影响,以及PKA通路在此过程中的作用,以探索CRH致邪毒证肝癌小鼠垂体ACTH调控异常的部分机制。方法:体外培养特异性分泌ACTH的小鼠垂体瘤细胞株AtT20,①分别观察0nM、25nM、50nM、100nM、200nM、400nM的CRH刺激细胞15分钟、30分钟、60分钟和90分钟后ACTH含量和Pomc表达的变化,发现25nM的CRH刺激60分钟时ACTH含量最高,而Pomc是在400nM的CRH刺激15分钟时表达最高;②在60分钟内,以CRH刺激细胞1~5次,每次均为25nM,发现使ACTH含量和Pomc表达最高的刺激次数分别为2次和3次;③往细胞中预先加入30μM的PKA抑制剂H89,30分钟和60分钟时各加入25nM的CRH刺激细胞,90分钟时检测细胞ACTH含量和Pomc的表达。结果:PKA被抑制后,细胞ACTH含量明显低于未被抑制者,但仍高于空白对照组;而给予CRH刺激后细胞的Pomc表达均降低,以给予H89者更甚。结论:邪毒证肝癌小鼠ACTH异常升高可能与CRH的释放频率增加有关,而PKA通路介导了这一过程,但其并不是介导此功能的唯一通路。 展开更多
关键词 邪毒证 肝癌 垂体 促肾上腺皮质激素释放激素 促肾上腺皮质激素 小鼠
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