液基薄层细胞学与免疫细胞化学联合在肺癌分型及鉴别诊断中的应用

目的探讨液基薄层细胞检测（ThinPrep cytologic test, TCT）与免疫细胞化学（immunocytochemistry, ICC）相结合在经支气管镜超声引导针吸活检术（endobronchial ultrasoundguided transbronchial needle aspiration, EBUSTBNA）和纤维支气管镜（纤支镜）刷片细胞学肺癌分型诊断及鉴别诊断中的应用价值。方法收集上海交通大学附属胸科医院2012年1～7月经EBUSTBNA和纤支镜常规细胞学诊断为低分化肺癌标本132例，所有病例均具有明确的组织病理诊断；应用TCT技术和ICC法检测p63、CK5/6、CK7、TTF-1、Syn、CD56在肺癌中的表达。结果细胞形态学与ICC联合诊断肺低分化癌132例，其中鳞癌、腺癌和小细胞癌的分型诊断符合率分别为93.2%、90.0%和95.2%；细胞学未分类癌12例，其中鳞癌4例、腺癌5例、小细胞癌1例、类癌1例、淋巴瘤1例。p63诊断鳞癌的敏感性和特异性分别为96.6%和93.0%；CK5/6诊断鳞癌的敏感性和特异性分别为94.9%和74.6%；CK7诊断腺癌的敏感性和特异性分别为98.0%和66.3%；TTF-1诊断腺癌的敏感性和特异性分别为96.0%和76.3%；Syn诊断小细胞癌的敏感性和特异性分别为81.0%和94.5%；CD56诊断小细胞癌的敏感性和特异性分别为85.7%和84.4%。结论（1）TCT技术和ICC法相结合检测相关蛋白表达，可提高肺癌分型诊断的准确性，可成为EBUS-TBNA和纤支镜细胞学肺癌分型诊断及鉴别诊断的一种重要手段；对于不适合手术而需放、化疗的患者，通过EBUS-TBNA、纤支镜刷片细胞学检查明确肺癌的具体分型尤为重要。（2）常规细胞学诊断低分化肺癌，需进一步行ICC检查，以排除少见的肺部肿瘤或其它病变。

S100A4基因差异表达与结直肠癌分化、转移及预后的关系

目的:研究S100A4基因差异表达与结直肠癌分化、转移及预后的关系。方法:应用免疫组织化学SP法检测87例结直肠癌组织及癌旁结直肠组织中S100A4蛋白,并分析S100A4蛋白表达与结直肠癌临床病理因素及术后5年生存率的关系;免疫细胞化学SP法检测3种不同分化程度的结直肠癌细胞Caco-2、HT29、HCT116的S100A4蛋白表达,RT-PCR检测该3种细胞的S100A4 mRNA表达水平。结果:在癌旁结直肠组织腺上皮中S100A4蛋白不表达;在结直肠癌组织中S100A4蛋白的表达率为64.4%(56/87);与癌旁结直肠组织比较,差异有统计学意义(P<0.01)。S100A4蛋白在结直肠癌中的表达与临床分期、淋巴结转移和5年生存率有关(P<0.05),与其他临床病理因素无关(P>0.05);3种结直肠癌细胞均表达S100A4蛋白;S100A4 mRNA表达水平的顺序依次为:HCT116最高,HT29次之,Caco-2最低;三者S100A4 mRNA表达水平差异有统计学意义(P<0.01)。结论:S100A4基因表达和结直肠癌的发生发展、分化、侵袭转移及预后密切相关;S100A4蛋白可作为判定结直肠癌临床病理特征及判断预后的重要指标之一,也可能作为新的生物标志物及治疗结直肠癌浸润转移的潜在靶目标。

S100A4蛋白在结直肠癌中的表达

目的研究S100A4蛋白在结直肠癌组织中的表达及其临床意义。方法应用免疫组织化学S-P法检测87例结直肠癌组织及癌旁结直肠组织中S100A4蛋白,并分析S100A4表达与结直肠癌临床病理因素及术后5年生存率的关系。结果在癌旁结直肠组织腺上皮中S100A4蛋白不表达;在结直肠癌组织中S100A4蛋白的表达率为64.4%(56/87);与癌旁结直肠组织比较,差异有显著性(P<0.01);S100A4蛋白在结直肠癌中的表达与临床分期、淋巴结转移及5年生存率有关(P<0.05),与其它临床病理因素无关(P>0.05)。结论S100A4蛋白和结直肠癌的侵袭和转移及预后密切相关;S100A4蛋白可作为判定结直肠癌临床病理特征及判断预后的重要指标。

S100A4在大肠腺瘤和大肠癌中表达的临床病理研究

目的探讨S100A4蛋白在大肠腺瘤和大肠癌组织中的表达及其临床病理意义。方法应用免疫组化S-P法检测51例大肠腺瘤,87例大肠癌组织及癌旁大肠组织中S100A4蛋白的表达情况。结果在癌旁大肠组织腺上皮中S100A4蛋白不表达;在大肠腺瘤组织中S100A4蛋白的表达率为11.8(6/51);在大肠癌组织中S100A4蛋白的表达率为64.4(56/87);与癌旁大肠组织、大肠腺瘤组织比较,差异有显著性(P<0.01);S100A4蛋白在大肠癌中的表达与临床分期、淋巴结转移及5年生存率有关(P<0.05),与其它临床病理因素无关(P>0.05)。结论S100A4蛋白可能在大肠癌发生、发展中发挥作用,尤其在大肠癌恶性演进中以及预后预测中具有重要意义,可能作为新的生物标志物。

弹力纤维染色在评估肺癌胸膜侵犯中的意义

目的探讨胸膜弹力纤维(elastic fibers,EFs)染色在肺癌TNM分期应用中的价值。方法随机选取手术切除的肺癌标本200例,肉眼观察癌组织均紧贴胸膜。石蜡切片,行HE及EFs染色。按照WHO(2004)肺癌分类标准,对200例标本进行组织学类型分类、观察并分析HE及EFs染色结果。结果光镜下对200例标本进行组织学分类,其中162例为腺癌、29例为鳞癌、4例为腺鳞癌、5例为大细胞癌;其中肿瘤细胞未突破胸膜弹力层92例,突破胸膜弹力层108例(含破脏层胸膜20例);HE染色28例无法判断或判断不清,最终经EFs染色得出结论。结论应用胸膜EFs染色,能直观地观察肿瘤细胞是否到达或突破胸膜层,有助于准确评估肺癌的胸膜侵犯和TNM分期。

冷冻切片常见问题与解决方法

术中冷冻切片是目前临床病理检查中最常用的快速制片办法之一。其是住低温下将新鲜组织冷冻至一定硬度，然后再进行切片的制片方法。

DARS2在非小细胞肺癌中的表达及其对细胞增殖和迁移的影响

目的探究线粒体天冬氨酰-tRNA合成酶2(aspartyl-tRNA synthetase 2,mitochondrial,DARS2)在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)中的表达及生物学意义。方法采用多种数据库分析DARS2在NSCLC的两种亚型肺腺癌(lung adenocarcinoma,LUAD)和肺鳞癌(lung squamous cellcarcinoma,LUSC)中的表达水平、预后价值、临床病理分期相关性、突变及甲基化水平和富集通路。通过划痕实验和CCK-8实验进一步分析DARS2对NSCLC细胞增殖和迁移能力的影响。结果通过GEPIA、GEO及HPA数据库分析发现,DARS2 mRNA和蛋白质表达水平在LUAD与LUSC中均显著上调,并与LUAD病理分期呈正相关。生存分析结果表明,DARS2过表达可显著缩短LUAD患者生存期。cBioPortal分析结果显示,DARS2在LUAD与LUSC中变异率分别为16%和18%。UALCAN数据库甲基化分析结果显示,DARS2启动子区域甲基化水平在LUAD中显著降低,而在LUSC中显著升高。Metascape数据库富集分析结果显示,与DARS2相关的基因在LUAD和LUSC中均主要在细胞周期通路高度富集。划痕实验和CCK-8实验结果显示,敲低DARS2能显著抑制H1299细胞增殖和迁移能力。结论DARS2在LUAD与LUSC中均过表达,其可能以参与调控细胞周期通路方式促进NSCLC细胞增殖和迁移。

颗粒物对气道上皮TLR2及其下游信号分子表达的影响

目的研究颗粒物(particulate matter,PM)暴露所致急性肺损伤的肺组织Toll样受体2(Toll-like receptors 2,TLR2)及其下游分子的改变。方法采用气管滴注PM小鼠模型,将24只SPF级C57BL.6J雄性小鼠随机分成4组(每组6只):对照组、低浓度PM组、中浓度PM组和高浓度PM组。肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)细胞分类计数和肺组织苏木精-伊红染色评估肺损伤情况。免疫组化染色法(immunohistochemistry,IHC)观察TLR2在肺脏的表达情况。采用人支气管上皮细胞株BEAS-2B进行体外PM暴露研究,qRT-PCR、Western blot、流式细胞仪检测细胞TLR2及其下游信号分子的表达。结果各PM暴露组小鼠BALF细胞总数增加,中性粒细胞数量及构成比增加,肺组织炎性损伤加重,IHC染色显示TLR2在气道上皮强表达。各PM暴露组支气管上皮细胞TLR2、MyD88、IRAK1、RelA mRNA水平呈浓度梯度依赖上调表达,TLR2和p-NF-κB蛋白质水平增加。结论 PM所致急性肺损伤中,肺组织尤其是气道上皮细胞TLR2表达明显上调。TLR2/MyD88/IRAK1/NF-κB信号通路在人支气管上皮细胞的激活可能介导PM所致肺组织的炎性损伤。

肺腺癌 ROS1融合基因的检测及临床病理特征

目的：探讨肺腺癌中ROS1融合基因的存在情况及肺腺癌的临床病理特征。方法采用即时荧光PCR法对369例已知表皮生长因子受体（ EGFR ）突变状态的肺腺癌手术切除标本进行ROS1融合基因检测，分析ROS1融合基因与患者临床病理特征的关系，并应用直接测序法对其中16例阳性病例和20例阴性病例进行验证。结果369例肺腺癌组织中，16例（4.3％，16／369）存在ROS1融合基因；ROS1融合基因与患者性别、年龄、吸烟史、肿块位置、大小、组织学亚型、分化程度、T分期、淋巴结转移、TNM分期及EGFR突变状态均无关（ P均＞0.05）。其中女性患者ROS1融合基因阳性率（4.4％，8／183）与男性（4.3％，8／186）相近，差异无统计学意义（P＝0.973）；年龄≤60岁患者的ROS1融合基因阳性率（5.1％，10／195）高于＞60岁患者（3.4％，6／174），非吸烟者的ROS1融合基因阳性率（4.4％，14／318）略高于吸烟者（3.9％，2／51），差异均无统计学意义（P＞0.05）。阳性、阴性病例的直接测序表明ROS1融合基因阳性检出率与实时荧光PCR法结果一致，总体符合率为100％。结论 ROS1融合基因在青年、非吸烟患者中较为多见，可以与EGFR突变共存，代表了一类新的肺腺癌分子亚型。

S100钙结合蛋白A4、表皮生长因子受体和磷脂酰肌醇3激酶蛋白在肺腺癌中的表达及其相关性

目的 探讨S100钙结合蛋白A4（S100A4）、表皮生长因子受体（EGFR）及磷脂酰肌醇3激酶（PI3K）在肺腺癌组织中的表达、临床病理意义及其相互关系.方法 应用免疫组织化学EnVision二步法检测84例肺腺癌组织、30例正常肺组织中S100A4、EGFR及PI3K蛋白的表达,并分析三者与肺腺癌临床病理因素、术后5年生存率的关系及三者间表达的相关性.结果 84例肺腺癌组织中S100A4、EGFR及PI3K的阳性表达率分别为69.0％（58/84）、64.3％（54/84）、52.4％（44/84）,高于正常肺组织的6.7％（2/30）、16.7 ％（5/30）、13.3 ％（4/30）（均P＜0.01）.84例肺腺癌组织中S100A4、EGFR及PI3K蛋白的表达与肿瘤分化程度、淋巴结转移、临床分期及5年生存有关（P＜0.05）,与患者性别、年龄及肿块大小无关（P＞0.05）.肺腺癌组织中S100A4与EGFR、PI3K的表达呈正相关（均P＜ 0.01）,EGFR与PI3K的表达呈正相关（P＜0.01）.结论 S100A4、EGFR、PI3K与肺腺癌的发生、发展、转移及预后相关.S100A4蛋白可作为判断肺腺癌生物学行为及预测转移趋势的重要指标之一.S100A4与EGFR、PI3K的表达相关.

S100A4蛋白和上皮钙黏蛋白在大肠癌中的表达及意义

目的 研究S100A4蛋白和上皮钙黏蛋白(E-cad)在大肠癌组织中的表达及其临床意义.方法 应用免疫组织化学SP法检测87例大肠癌组织及癌旁大肠组织中S100A4蛋白和E-cad的表达水平,分析S100A4和E-cad表达与大肠癌临床病理因素及术后5年生存率的关系.结果 在癌旁大肠组织腺上皮中S100A4蛋白不表达;在大肠癌组织中S100A4蛋白的表达率为64.4%(56/87),与癌旁大肠组织比较.差异有统计学意义(P＜0.01);S100A4蛋白在大肠癌组织中的表达与临床分期、淋巴结转移及5年生存率有关(P＜0.05),与其他临床病理因素无关(P＞0.05).在癌旁大肠组织中E-cad100%表达;在大肠癌组织中E-cad的表达率为62.1%(54/87);与癌旁大肠组织比较,差异有统计学意义(P＜0.01);E-cad在大肠癌组织中的表达与临床分期、淋巴结转移、肿块位置及5年生存率有关(P＜0.05).与其他临床病理因素无关(P＞0.05).S100A4蛋白和E-cad在大肠癌组织中的表达呈负相关,但差异无统计学意义(r=-0.087,P＞0.05).结论 S100A4蛋白和E-cad与大肠癌的侵袭、转移及预后密切相关;S100A4蛋白可作为判定大肠癌临床病理特征及判断预后的重要指标.

后纵隔巨大Castleman病1例

患者男,69岁。因胸痛半年余,胸闷、咳嗽1~2个月入院。无发热、腹痛,无乏力、盗汗,无消瘦,饮食大小便正常,无皮疹,浅表淋巴结不大,肝脾不大。实验室检查血常规、尿常规及肝功能均正常;CT检查提示：后纵隔肿块,初诊为后纵隔肿瘤。遂手术切除肿物。

软组织血管纤维瘤24例临床病理学观察

目的探讨软组织血管纤维瘤（AFST）的临床病理特点、分子遗传学特征、病理诊断和鉴别诊断。方法回顾性复习复旦大学附属肿瘤医院2011至2017年24例AFST的临床病理学资料，行形态学观察、免疫组织化学染色和荧光原位杂交并复习相关文献。结果24例患者，男性15例，女性9例（男∶女＝1.7∶1.0）。发病年龄8～68岁，平均年龄45岁。发生部位：四肢14例（上肢3例，下肢11例），躯干7例，颞部、腹膜后和肝脏各1例。临床上多表现为缓慢生长的无痛性肿块，直径0.8～14.0 cm，平均4.6 cm。镜下观察：多数肿瘤境界清楚，有纤维性包膜，少数病例局部浸润邻近的纤维脂肪组织。肿瘤主要由稀疏分布的短梭形细胞和丰富的薄壁分支状血管组成，分布于黏液样、纤维黏液样或胶原性间质中。周边均可见圆形或不规则形扩张的中等大血管。免疫组织化学标记：短梭形细胞主要表达波形蛋白（5/5），不同程度表达上皮细胞膜抗原（2/4）、雌激素受体（1/2）、孕激素受体（2/3）、α-平滑肌肌动蛋白（1/18）和结蛋白（1/10），Ki-67阳性指数均小于5%。CD34、CD31和ERG清晰显示肿瘤内血管的轮廓和分布。4例行荧光原位杂交检测，其中3例存在NCOA2基因相关易位。17例获得随访资料，随访时间3～69个月（平均30个月），均无瘤生存。结论AFST是一种良性纤维性肿瘤的新类型，以含有大量薄壁分支状小血管为特征，并显示特征性的NCOA2基因相关易位，需注意与血管性肿瘤及其他富含黏液样基质的软组织肿瘤相鉴别。

多形性平滑肌肉瘤和去分化平滑肌肉瘤的临床病理学分析

目的探讨多形性平滑肌肉瘤（PLMS）和去分化平滑肌肉瘤（DLMS）的临床病理学特征、鉴别诊断及生物学行为。方法回顾性分析2007年11月至2016年12月复旦大学附属肿瘤医院手术（8例）及会诊病例（41例）共49例PLMS和DLMS患者的临床资料、组织学形态和免疫学表型，其中33例有存档切片可供分析免疫表型，38例有随访资料。结果男性22例，女性27例；发病年龄24～83岁，平均52.5岁。肿瘤位于四肢15例，深部体腔14例，躯干11例，头颈部4例，膀胱2例，腹股沟、会阴部和股静脉各1例。肿瘤直径3～30 cm，平均9.1 cm。镜下观察：PLMS和DLMS具有大致相似的组织学形态，由经典平滑肌肉瘤（LMS）和多形性/未分化肉瘤成分组成，2种成分比例不等（至少局灶可见LMS成分），常相互混杂，亦可突然移行或逐渐过渡。其中，经典LMS成分呈典型平滑肌肿瘤特征，大多分化良好至中等，多形性/未分化肉瘤成分形态类似于未分化多形性肉瘤/恶性纤维组织细胞瘤。免疫组织化学表型方面，经典LMS成分至少表达1种肌源性标志物，多为强阳性，α－平滑肌肌动蛋白（α－SMA）、结蛋白、H－caldesmon、肌特异性肌动蛋白（MSA）和calponin的阳性比例分别为97.0%（32/33）、72.7%（24/33）、90.9%（20/22）、14/16和15/15。在29例（87.9%，29/33）中，多形性肉瘤成分至少表达1种肌源性标志物，多为局灶阳性或阳性强度较经典LMS成分弱：α－SMA、结蛋白、H－caldesmon、MSA和calponin的阳性比例分别为81.8%（27/33）、48.5%（16/33）、72.7%（16/22）、12/16和11/15。根据多形性肉瘤成分是否表达肌源性标志物，29例可归类为PLMS，4例为DLMS。Ki－67阳性指数为15%～70%，平均为40%。38例获得随访资料，11例（28.9%）死于该病，12例带瘤生存，14例无瘤生存，1例死于他因。中位无瘤生存和总生存时间分别为6个月和10个月。12例复发，11例转移，中位肿瘤进展时间为8个月。结论PLMS和DLMS由经典LMS和多形性/未分化肉瘤成分组成，仔细寻找典型LMS成分是其诊断关键。两者较经典LMS具有更强的侵袭性，预后不佳。