脑出血对大鼠第三脑室伸展细胞的影响及人参皂苷的作用

目的:观察脑出血对大鼠第三脑室伸展细胞的影响及人参皂苷的作用。方法:以Wistar大鼠脑基底的尾状核注入Ⅶ型胶原酶制作脑出血模型,应用免疫组化方法,评价指标为胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)、一氧化氮合酶(NOS)、巢蛋白(nestin)、碱性成纤维细胞生长因子(b FGF)。结果:脑出血后大鼠第三脑室侧壁及底部的GFAP、NOS、nestin和b FGF阳性细胞数明显增多,可见伸展细胞的长突起伸入脑实质,并到达出血灶。给予人参皂苷后上述指标表达增强,阳性细胞数增多,并与模型组比较具有显著性差异(P<0.05,P<0.01)。结论:第三脑室伸展细胞是胚胎发育后的遗留细胞。脑出血能激活第三脑室伸展细胞,并表现神经干细胞(NSCs)的生物学特性,人参皂苷增强了第三脑室伸展细胞表达,促进其参与脑损伤修复。

麦冬皂苷D对氧糖剥夺/复氧后新生鼠大脑皮层离体星形胶质细胞HIF-1 α-VEGF通路的作用

目的:探讨麦冬皂苷D对氧糖剥夺/复氧(OGD/R)后星形胶质细胞HIF-1α-VEGF通路的作用。方法:分离培养和鉴定新生大鼠星形胶质细胞,建立星形胶质细胞OGD/R模型;设正常组、模型组、麦冬皂苷D给药组;在OGD4h/R2h、4h、6h后用ELISA检测星形胶质细胞细胞培养液中VEGF蛋白表达量,Western Blot检测星形胶质细胞胞核内HIF-1α蛋白的含量,免疫荧光检测星形胶质细胞及其在OGD/R后细胞的光密度、面密度和阳性细胞数量。结果:模型组VEGF、HIF-1α蛋白含量高于正常组(P<0.05,P<0.01),麦冬皂苷D给药组高于模型组(P<0.05,P<0.01),且随再灌注时间延长,VEGF、HIF-1α蛋白含量呈增加趋势。模型组星形胶质细胞的面密度、光密度、阳性细胞个数较正常组均明显降低(P<0.01),麦冬皂苷D给药组星形胶质细胞的面密度、光密度、阳性细胞个数较模型组均显著升高(P<0.05,P<0.01)。结论:麦冬皂苷D能够促进OGD/R后新生鼠离体星形胶质细胞的增殖;麦冬皂苷D能够明显上调OGD/R后新生鼠离体星形胶质细胞VEGF、HIF-1α的蛋白含量;麦冬皂苷对OGD/R后神经损伤的保护及修复作用可能是通过星形胶质细胞HIF-1α-VEGF通路实现的。

人参皂苷Rg1对体外胚鼠皮层神经干细胞的增殖和神经胶质定向分化的影响

目的:探讨人参皂苷Rg1对体外胚鼠皮层神经干细胞的增殖和神经胶质定向分化的影响。方法:本研究采用MTT法测定人参皂苷Rg1对胚鼠皮层神经干细胞的最佳剂量和最佳作用时间点,氧糖剥夺(OGD)后的细胞损伤模型,免疫荧光染色鉴定神经干细胞增殖和神经胶质样定向分化。结果:分离后体外培养的胚鼠皮层细胞表达Nestin并自我复制,为神经干细胞,人参皂苷Rg1对神经干细胞增殖的最佳剂量是0.016μg/m L,0.016μg/m L人参皂苷Rg1对神经干细胞的增殖最佳作用时间点是6h。在人参皂苷Rg1的作用下,神经干细胞及OGD后的神经干细胞中Nestin、Brd U、光密度、阳性细胞Vimentin的面密度数目及Nestin/Brd U、Nestin/Vimentin双标染色细胞数目有显著提高(P<0.05,P<0.01)。结论:人参皂苷Rg1具有促进皮层神经干细胞增殖和神经胶质样定向分化的作用,这一机制可能是人参皂苷Rg1中具有类似于生长因子或刺激某些细胞分泌生长因子,促进神经干细胞的胶质样分化和增殖。

脑出血对大鼠前脑侧脑室室管膜下区细胞的影响及三七总皂苷的作用

目的:观察脑出血对大鼠前脑侧脑室室管膜下区(SVZ)细胞的影响及三七总皂苷的作用。方法:采用Wistar成年雄性大鼠,用胶原酶注入尾壳核建立脑出血模型,应用免疫组化方法观察脑出血后侧脑室SVZ细胞增殖细胞核抗原(PCNA)、β-Ⅲ型微管蛋白(Tuj-1)、胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)的表达,以及碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的表达与活化,研究侧脑室SVZ细胞的增殖、分化及三七总皂苷的作用。结果:通过连续切片的免疫组化结果显示脑出血后损伤侧侧脑室SVZ的PCNA、GFAP、Tuj-1和bFGF阳性细胞表达增强,给予三七总皂苷干预后,给药组上述阳性细胞个数显著增多,与模型组比较具有显著性差异(P<0.05,P<0.01)。结论:脑出血能激活并促进侧脑室SVZ细胞增殖和分化,三七总皂苷可能通过增强前脑bFGF的表达而促进SVZ细胞增殖和分化。