HPLC法同时测定人血浆中舒必利、氯氮平、氯丙嗪浓度

目的:建立同时测定人血浆中舒必利、氯氮平、氯丙嗪药物浓度的高效液相色谱方法。方法:血浆样品用乙酸乙酯萃取,氮气吹干;残留物用甲醇溶解后进样。色谱柱为C_(18)柱(250 mm×4.6mm),流动相为甲醇-水(80:20,含0.5％三乙胺和0.05％冰醋酸,pH=7.6～7.8),流速:1.0mL·min^(-1),柱温:35T,紫外检测波长:250nm。结果:本法可同时测定血浆中3种药物浓度。舒必利在0.2～1.0μg·mL^(-1)、氯氮平在0.05～1.0μg·mL^(-1)、氯丙嗪在0.01～0.16μg·mL^(-1)范围内,峰面积与其浓度呈良好的线性关系;日内RSD分别为2.9％～3.9％,3.1％～4.1％,3.0％～4.3％;日间RSD分别为3.9％～4.8％,3.8％～5.1％,4.3％～5.3％(n=4)。结论:方法简便、快速、准确,适用于舒必利、氯氮平、氯丙嗪3种药物临床血药浓度的同时检测。

气相色谱法测定线粒体脑肌病患者血清和脑脊液中的乳酸

血清和脑脊液样品经甲酯化处理,氯仿提取,氮气吹干,残留物用庚烷溶解后进样,用气相色谱法测定线粒体脑肌病患者血清和脑脊液中乳酸含量。结果显示,线粒体脑肌病患者的血清、脑脊液中乳酸含量分别为(294±101)mg/L和(312±103)mg/L,比正常人((192±37)mg/L和(153±81)mg/L)以及神经系统其他疾病患者((150±34)mg/L和(173±29)mg/L)显著增高(P<0.05)。该方法可作为筛选线粒体脑肌病的临床诊断方法。

大鼠脑组织单胺类递质及其代谢产物的检测方法研究

目的 :研究大鼠脑组织中单胺类递质及其代谢产物的高效液相反相离子对色谱测定法。方法 :采用LiChrosorbC18,10 μm色谱柱 ,流动相为甲醇 :水 (4 0 :60 ) ,含 0 .0 2 8g LEDTANa2 ,0 .15g LSDS ,0 .2ml LH2 SO4(pH 2 .5～ 3 ) ,荧光检测波长 :λEX=2 85 ,λEM=3 3 3。结果 :对 87只大鼠脑组织中 4种单胺类递质及其代谢产物的含量进行了同时测定 ,高香草酸 (HVA) 2 .5 0～ 40 .0 μg ml、去甲肾上腺素 (NE) 0 .0 1～ 0 .5 0 μg ml、多巴胺 (DA)0 .0 5～ 1.0 0 μg ml、5 羟色胺 (5 HT) 0 .0 2 5～ 0 .5 0 μg ml,峰面积与其含量呈良好的线性关系。 结论 :该法操作简便、快速、准确 ,为组织中单胺类递质及其代谢产物检测的一种理想方法 ,并适用于临床相关研究。

神经蛋白质组学双向电泳技术体系的建立

目的:建立神经蛋白质组学双向电泳技术体系。方法:利用双向电泳技术分别以人脑脊液、人和鼠脑组织为研究对象,通过离心等手段提取蛋白,行双向电泳,硝酸银染色,进行图谱分析。结果:从双向电泳图谱上获得蛋白质斑点:正常人脑脊液359个,多发性硬化人脑脊液397个,正常人脑组织480个,正常鼠脑组织524个。经与SWISS-2DPAGEDATA比对,发现差异蛋白点。结论:从蛋白质水平探讨多发性硬化症、脑出血等疾病的发病机制,对寻找有效的药物靶点具有重要意义,同时为神经系统其它疾病的研究提供了切实可行的神经蛋白质组学研究技术体系。

核磁共振波谱技术在恶性肿瘤检测中的临床研究

利用低分辨质子核磁共振波谱仪，采用双重抑制法抑制血中水的质子峰，并和由作者曾报道过的冷冻干燥法及国外报道的预饱和法进行比较，对236价临床血标本的甲基和次甲基的平均线宽进行测量和分析比较。结果表明，恶性肿瘤患者血的甲基和次甲基峰的平均线宽值明显低于正常人和良性肿瘤患者，其差异非常显著（P＜0．001）。这一结果为临床检测提供了有价值的数据，同时可用来监测癌症病人的治疗过程。

核磁共振波谱技术诊断恶性肿瘤的临床研究

使用低磁场质子核磁共振波谱仪，采用双重抑制法、冷冻干燥法及预饱和法抑制血液样品质子ＮＭＲ谱中的水峰，分别测量和比较甲基、次甲基的平均线宽及其两者的平均线宽。通过ＮＭＲ检测２３６份临床血标本发现，恶性肿瘤患者血的甲基和次甲基峰明显窄于正常人和良性肿瘤患者，其平均线宽差异有高度显著性（Ｐ＜０．００１），检测准确率均达８５％以上。

用NMR测定辐射剂量

本文介绍了利用琼酯糖-亚铁为剂量液,经辐照,产生糖的自由基、质子和三价铁离子。根据Fe^(3+)本身具有的弛豫能力-减小弛豫时间,利用NMR法测量出不同剂量下的T_1值并获得整个辐照过程弛豫速率随剂量分布的曲线。还观察到整个辐射过程体系氧化还原反应的动态变化过程。

RP-HPLC法测定六味地黄丸中没食子酸的含量

目的:建立 RP-HPLC 法测定六味地黄丸中没食子酸含量的方法。方法:色谱柱:日本岛津 GL Sciences Inc.C_(18)(250mm×4.6mm,5μm),流动相:甲醇-0.1%醋酸水溶液(30∶70),流速:1mL·min^(-1),检测波长为273nm。结果:没食子酸在4-40μg·mL^(-1)范围内,峰面积积分值与浓度呈良好的线性关系(r=0.9995);平均回收率为99.5%,RSD 为2.1%。结论:该法准确、快速、灵敏,重复性好。

HPLC法快速测定5-氟尿嘧啶血药浓度

目的 :建立反相高效液相色谱法测定人血清中 5 -氟尿嘧啶浓度。方法 :血清样品用乙酸乙酯提取 ,水浴氮气吹干 ,残留物用水溶解后进样。色谱柱为C1 8柱 (2 5 0mm× 4 6mm) ,水为流动相 ,流速 1 0mL·min- 1 ,紫外检测波长 2 73nm ,桂皮酸为内标。结果 :本法最低检测浓度为 0 0 5 μg·mL- 1 ,线性范围为 1 0～ 5 0 0 μg·mL- 1 ,日内RSD为 2 7%～ 4 1% ,日间RSD为 3 8%～ 4 7(n =4)。结论 :该法适用于 5 -氟尿嘧啶的药代动力学研究及临床血药浓度检测。试验结果表明 ,该方法经济、简便、快速、灵敏度高、重现性好。

气相色谱法测定卡托普利含量

采用气相色谱法（２％ＯＶ－１７柱）测定了卡托普利片中卡托普利的含量，线性范围为０．２～１ｇ／Ｌ，以正十八烷为内标，重复性好，结果令人满意。

气相色谱法测定油脂中棕榈酸单甘油酯与油酸单甘油酯含量

建立了一种利用气相色谱法测定油脂中棕榈酸单甘油酯与油酸单甘油酯含量的方法。样品中加入六甲基二硅氨烷，于９５℃水浴中完成硅烷化反应。样品的平均加标回收率分别为９６．３０％与９７．８２％，ＲＳＤ分别为１．８％与２．１％。最低检出限分别为０．０１μｇ／ｇ与０．１μｇ／ｇ。

多发性硬化患者脑脊液蛋白质组学的研究

目的:筛选并鉴定多发性硬化患者脑脊液特异蛋白,探讨多发性硬化的发病机制。方法:以实验室确诊型和临床怀疑型多发性硬化患者的脑脊液为研究对象,采用固相pH梯度双向凝胶电泳分离总蛋白质,凝胶经银染色后,Image Master 2D Platinum 5.0图像分析软件进行比较分析、识别差异表达的蛋白质,应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱得到相应的肽质指纹图谱,然后搜索数据库鉴定部分差异蛋白质点。结果:从双向电泳图谱上获得蛋白质斑点,共鉴定出35种蛋白,并且发现其中大多是在正常的脑脊液中存在的,其中有6种是在多发性硬化双向凝胶谱库中已有的,有4种是本实验所发现的。结论:本研究识别并鉴定了4种多发性硬化患者脑脊液特异蛋白,但这4种蛋白质与多发性硬化的关系有待进一步研究。

中枢神经系统脱髓鞘疾病脑脊液蛋白质组学研究

目的建立中枢神经系统脱髓鞘疾病蛋白质组学技术体系,寻找并鉴定与中枢神经系统脱髓鞘疾病发生有关的生物标识物。方法以中枢神经系统脱髓鞘疾病患者的脑脊液为研究对象,分别采用固相pH梯度双向凝胶电泳分离总蛋白质,凝胶经银染显色后,用图像分析软件进行比较分析、识别差异表达的蛋白质,离线应用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱得到相应的肽指纹图谱;同时用超高压液相色谱分离酶解肽段,在线采用电喷雾四极杆飞行时间质谱鉴定肽段氨基酸序列;搜索数据库鉴定部分蛋白质。结果分别获得中枢神经系统脱髓鞘疾病患者组和对照组的脑脊液双向电泳蛋白质组表达图谱,筛选并鉴定出表达有明显差异的蛋白质10个,其中在疾病组中血红蛋白有明显上调而前列腺素H2表达下调明显。结论这些差异蛋白可能成为具有临床诊断意义的中枢神经系统脱髓鞘疾病潜在标识物,从而为中枢神经系统脱髓鞘疾病的早期诊断和治疗提供理论和实验依据。

复方斑蝥胶囊中斑蝥素的气相色谱法测定

复方斑蝥胶囊由斑螫、人参、黄芪、刺五加、三棱等药味组成,具有破血消瘀、攻毒蚀疮的功效,临床用于原发性肝癌、肺癌、直肠癌等恶性肿瘤病征。为有效控制产品质量,保证临床用药安全有效,参考文献报道,本文研究建立了气相色谱测定复方斑蝥胶囊中斑蝥素(cantharidin)的方法,选用OV-17填充柱,内标法定量,结果的精密度和重复性良好。

气相色谱法测定大鼠血清脂肪酸

目的:用气相色谱法测定大鼠酒精性脂肪肝血清中7种游离脂肪酸的含量。方法:选用10%丁二酸二乙二醇酯(DEGS)色谱柱,样品经乙酸乙酯提取后,用三氟化硼-乙醚/甲醇甲酯化处理。内标采用正十七碳酸。结果:月桂酸、豆蔻酸、硬脂酸与花生四烯酸的线性范围在1～50mg/L,棕榈酸、油酸与亚油酸的线性范围在10～100mg/L。7种脂肪酸的变异系数在0.9991～0.9998之间。7种脂肪酸的加样回收率在85.6%～94.3%之间。结论:本法简便、快速、可靠,为临床科学研究及疾病的诊断提供参考依据。

多发性硬化和格林巴利综合征脑脊液细胞学及寡克隆区带测定的临床意义

多发性硬化和格林巴利综合征脑脊液细胞学及寡克隆区带测定的临床意义于素贞，刘梅仕，邓小梅，赵庆胜，党恩训，吴围屏，秦明德，刘师莲多发性硬化（ＭＳ）和格林巴利综合征（ＧＢＳ）是神经系统脱髓鞘疾病，系自身免疫性疾病．目前国内关于ＭＳ和ＧＢＳ的脑脊液细胞学（...

HPV16L1E7的基因克隆及其在大肠杆菌中的表达

目的:研究人乳头瘤病毒(HPV)的主要衣壳蛋白L1和主要的转化蛋白E7的融合基因在原核细胞中的表达,为研制HPV16L1E7疫苗和诊断试剂盒提供依据。方法:采用聚合酶链反应(PCR)以重组质粒pUC19L1E7为模板扩增HPV16L1E7基因片段,克隆至载体pMD18-T中,并用限制性内切酶将HPV16L1E7基因切下,克隆至原核表达质粒pQE30中,经IPTG诱导表达,再使用SDS-PAGE和蛋白印迹检测其抗原性和表达水平。结果:HPV16L1E7融合蛋白能被抗HPV16L1抗体识别,分子量为66KD,经IPTG诱导4h后,表达的HPV16L1E7融合蛋白占菌体总蛋白量的25%以上。结论:成功构建的表达载体pOE30-L1E7可在原核表达细胞中高效表达,且表达出的HPV16L1E7融合蛋白具有反应活性,可与HPV16抗体发生反应。