缺血后处理及川芎嗪对大鼠肾缺血再灌注氧自由基的影响

目的:探讨缺血后处理及川芎嗪对大鼠肾缺血再灌注氧自由基的影响.方法:成年雌性SD大鼠32只,随机分为4组,每组8只,分别为:假手术对照组(S组)、缺血再灌注组(I/R组)、川芎嗪治疗组(I/R+T组)和缺血后处理组(IPO组).各组动物于再灌注24h时取血,检测血尿素氮(BUN)和肌酐(Cr),同时留取肾组织进行匀浆,测定匀浆中超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)活性、丙二醛(MDA)含量和总抗氧化能力(TAC).结果:与I/R组大鼠相比,I/R+T组和IPO组大鼠的BUN和Cr均下降(P<0.01),SOD升高(P<0.01),MDA下降(P<0.01),CAT升高(P<0.05),TAC升高(P<0.01);与I/R+T组大鼠相比,IPO组大鼠的BUN,Cr,SOD,MDA,CAT和TAC均无统计学差异(P>0.05).结论:缺血后处理能够抑制肾脏缺血再灌注损伤后氧自由基的过度生成,对缺血再灌注损伤有一定的保护作用,其保护效应与川芎嗪治疗无明显差异.

大鼠急性肾脏缺血再灌注后处理动物模型的建立

目的:建立肾脏缺血后处理动物模型.方法:将40只SD大鼠随机分为对照组、缺血再灌注组(IR组)和3个缺血后处理组(IPO1,IPO2,IPO3组),分别制作动物模型.IR组在同时夹闭双侧肾动脉45min后恢复血供,IPO1,IPO2和IPO3组在肾缺血45min后分别采用不同的后处理方法,其中IPO3组采用反复10次再灌注20s-缺血20s的后处理方法.恢复血供24h后留取各组大鼠静脉血标本及肾组织,检测肾功能指标,光镜下观察肾组织形态学变化并对肾小管损伤程度进行评分.结果:IPO3组血尿素氮为(27.9±3.2)mmol/L,血肌酐为(232±49)μmol/L,肾小管损伤程度评分为382±48.和IR组相比,IPO3组的血尿素氮、血肌酐及肾小管损伤程度评分均明显降低(P<0.01),肾组织损伤明显减轻,其余两个缺血后处理组与IR组相比差异无统计学意义(P>0.05).结论:在急性肾脏缺血后,采用IPO3组的方法可以减轻急性肾脏缺血再灌注损伤,从而成功建立大鼠急性肾脏IRI的后处理动物模型.

大鼠肾脏缺血后处理对肾功能及尿NAG酶的影响

目的探讨SD大鼠肾脏缺血后处理(ischemic postconditioning)对肾功能和尿N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG酶)的影响。方法 SD大鼠54只,随机分为对照组(结扎右肾蒂,分离左肾动脉,暴露30min)、缺血-再灌注(IR)组(结扎右肾蒂,左肾动脉阻断45min后恢复血供)、缺血后处理(IPO)组(在IR组处理基础上,左肾动脉给予10次的再灌注20s-缺血20s)。检测不同时间点肾功能和尿NAG酶。结果 IPO组比IR组的血尿素氮及肌酐均显著降低,6、12、24h下降最明显(P<0.05)。IR组和IPO组尿NAG酶均高于对照组,IPO组较IR组6、12h降低明显(P<0.05)。结论缺血后处理对大鼠肾脏缺血-再灌注损伤具有保护作用,可以减轻血尿素氮及肌酐水平,减少肾小管损伤。

缺血后处理对大鼠肾脏缺血再灌注后肾小管上皮细胞超微结构的影响

目的:观察缺血后处理对大鼠缺血再灌注后肾小管上皮细胞超微结构的影响.方法:将24只SD大鼠随机分为假手术组(S组)、缺血再灌注组(IR组)和缺血后处理组(IPO组),每组8只.分别建立动物模型.IR组在同时夹闭双侧肾动脉45min后恢复血供,IPO组在肾缺血45min后采用反复10次再灌注20s-缺血20s的后处理方法.恢复血供24h后留取各组大鼠肾组织标本,在透射电镜下观察肾小管上皮细胞超微结构变化,分别计算微绒毛、细胞器、细胞核的超微病变指数.结果:IR组大鼠肾小管上皮细胞表现出不同程度的变性、坏死、崩解,IPO组大鼠肾小管上皮细胞可见变性、凋亡,较少见坏死及崩解.对病变指数分析提示,其微绒毛、细胞器、细胞核等超微结构改变均较IR组轻.结论:缺血后处理可以减轻缺血再灌注后肾小管上皮细胞的损伤,减少细胞坏死,稳定线粒体等细胞器结构,从而减轻急性肾脏IR损伤.

缺血后处理对大鼠肾脏缺血再灌注损伤P38 MAPK和JNK的影响

【目的】探讨缺血后处理(IPO)对大鼠肾脏缺血-再灌注损伤(IR)P38 MAPK和JNK蛋白表达的影响。【方法】将72只SD大鼠随机分为假手术组(S组)、IR组、IPO组,每组又分为8个时间段。S组分离出左肾动脉,结扎右肾蒂,暴露45 min后关腹;IR组阻断左肾动脉45 min后恢复血供;IPO组给予反复10次的恢复血供20 s阻断血供20 s处理。检测肾功能及检测P38 MAPK和JNK蛋白的表达。【结果】与IR组相比,IPO组的血尿素氮及肌酐均显著降低,24 h时下降最明显(P<0.05)。IPO组的P38 MAPK、JNK蛋白表达较IR组明显减弱(P<0.05)。【结论】IPO对大鼠肾脏IR损伤具有保护作用,可能是通过减弱P38 MAPK和JNK蛋白表达发挥其保护作用。

缺血后处理对缺血再灌注损伤大鼠肾脏HIF-1α的影响

目的观察缺血后处理对缺血再灌注损伤(IRI)大鼠肾脏缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)表达的影响。方法将72只成年SD大鼠随机分为假手术组(S组)、缺血再灌注组(IR组)、缺血后处理组(IPO组),每组24只。S组结扎右肾动脉,暴露左肾45min后关闭腹腔:IR组结扎右肾动脉并完全阻断左侧。肾动脉45min后恢复血流;IPO组在IR模型的基础上,恢复血流前给予反复10次20s供血-20s缺血处理。每组分别在造模后0.5h、1h、3h、6h、12h、24h、48h、72h留取血和肾组织标本,检测血肌酐和血尿素氮,并对肾组织行免疫组化染色和单盲评分:Western blot检测HIF-1α的表达强度。结果HIF-1α主要在小管上皮细胞中表达,肾小球中未发现阳性染色。各组HIF-1α表达情况:与S组相比IR组HIF-1α在1h表达开始显著升高,6h达到高峰,12h开始下降。而IPO组HIF-1α在3h表达开始升高,6h达到高峰,且高峰水平显著高于IR组,24h后HIF-1α开始下降,48h其表达水平与IR组差异无显著性。结论缺血后处理能增加缺血再灌注损伤大鼠肾脏HIF-1α表达并延长其表达高峰时间,从而减轻缺血缺氧对肾脏的损伤。

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