高效液相色谱法同时测定明胶空心胶囊中苯甲酸和山梨酸

建立明胶空心胶囊中苯甲酸、山梨酸的高效液相色谱测定方法。样品经水浴溶解,加入蛋白质沉淀剂并结合C18固相萃取小柱去除蛋白质,用体积分数为60%甲醇水溶液洗脱,定容后过0.45μm滤膜,以Agilent Zorbax SB-Aq色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm)为分析柱,以2 mmol/L甲酸与20 mmol/L乙酸铵混合溶液-甲醇(体积比为90∶10)为流动相,流量为1.0 mL/min,检测波长为230 nm。苯甲酸、山梨酸的质量浓度在0~50 mg/L范围内与色谱峰面积线性良好,相关系数分别为0.9998和0.9999,方法检出限分别为3、4 mg/kg,定量限分别为6、9 mg/kg。测定结果的相对标准偏差为1.9%、2.2%(n=6),样品加标平均回收率为92.4%~106.1%。该方法操作简便,灵敏度高,稳定性良好,可用于明胶空心胶囊中苯甲酸及其钠盐(以苯甲酸计)、山梨酸及其钾盐(以山梨酸计)的同时测定。

中药饮片三七粉微生物限度检查方法适用性试验

目的按照《中华人民共和国药典》2020年版分别对3个厂家的三七粉进行微生物限度检查方法适用性试验研究并建立其方法,为粉状中药饮片微生物限度检查方法研究提供参考。方法按照《中华人民共和国药典》2020年版四部通则1108,采用平皿法进行需氧菌总数、霉菌和酵母菌总数的计数方法适用性试验,并对沙氏葡萄糖琼脂培养基、沙氏琼脂(含氯霉素)、孟加拉红培养基进行培养基适用性检查试验,采用增菌液常规法和稀释法进行控制菌检查方法适用性试验。结果3个厂家三七粉的需氧菌总数计数方法分别为1∶100、1∶50、1∶20平皿法,霉菌和酵母菌总数计数方法分别为1∶20、1∶10、1∶10平皿法。大肠埃希菌、耐胆盐革兰氏阴性菌均为增菌液常规法,沙门菌增菌液胰酪大豆胨液体培养基最大体积量为200 ml。结论所建立的3个厂家的三七粉微生物限度检查方法符合《中华人民共和国药典》2020年版四部通则的有关规定,方法可行。三七粉对细菌有一定的抑制作用,不同厂家的三七粉微生物限度检查方法并不完全相同。

岩黄连栓微生物限度检查方法的适用性试验

按照《中国药典》2020年版四部通则1105、1106和1107的要求对岩黄连栓的微生物计数法、控制菌检查法适用性试验研究,比较供试品溶液稀释平皿倾注法和供试品溶液稀释薄膜过滤贴膜法优选需氧菌总数计数方法。结果表明,岩黄连栓需氧菌总数采用1∶200供试品溶液稀释平皿倾注法,霉菌和酵母菌总数采用常规1∶10平皿倾注法,金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)检查采用1000 mL增菌液接种法,铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)检查采用100 mL增菌液接种法,均符合《中国药典》2020年版四部通则的规定,为供试品溶液制备和适用性试验的方法提供参考。

5种同名异型中药制剂微生物限度检查法的建立与结果分析

目的建立5种同名异型(胶囊剂和片剂)中成药微生物限度检查的方法,并对结果进行分析。方法对同一生产企业5种同名异型(胶囊剂和片剂)的中成药按照2015年版《中国药典》四部中相关的规定方法,进行微生物限度检查。结果采用平皿法,10种中药制剂确定需氧菌总数最大稀释级别为1∶100,霉菌和酵母菌总数最大稀释级别1∶20,耐胆盐革兰氏阴性菌及大肠埃希菌均为常规法,沙门菌有4种制剂确定为接种200 m L胰酪大豆胨液体培养基,其余6种制剂均为常规法。结论所确定的方法经过验证,符合2015年版《中国药典》四部的有关规定,方法可行。同名不同剂型的中药制剂微生物检查方法并不完全相同。

中药胶囊剂微生物限度检查方法适用性试验研究及结果分析

对27种中药胶囊剂按照2020版《中国药典》四部相关规定进行微生物限度检查法的适用性试验。结果显示,27种中药胶囊剂微生物计数法均可采用平皿法:需氧菌总数及霉菌和酵母菌总数计数方法的供试品溶液最高稀释级别分别为1∶100、1∶20。试验表明,中药胶囊剂需氧菌总数计数一般可按照1∶10、1∶20、1∶50、1∶100共4个稀释级别进行预试验,霉菌和酵母菌总数一般可按照1∶10、1∶20进行预试验,控制菌检查一般可按照增菌液常规法、增菌液2倍稀释法进行预试验。

两种瑶药酊剂微生物限度检查方法适用性试验及结果分析

目的:按照《中国药典》2020年版对两种瑶药酊剂抗风湿骨痛酊和抗骨质增生酊的微生物限度检查进行适用性试验,为有较强抑菌作用冲洗量较大的酊剂提供适用性试验的方法参考。方法:对有较强抑菌作用的抗风湿骨痛酊、抗骨质增生酊,按照《中国药典》2020年版四部中相关的规定,采用稀释法结合薄膜过滤法进行需氧菌总数、霉菌和酵母菌总数的计数方法适用性试验。控制菌采用增菌液常规法、增菌液稀释法和薄膜过滤法循序、科学、合理地进行适用性研究试验。结果:采用优选的方法进行微生物限度检查验证时,两种酊剂的计数方法回收比值均在0.5~2.0范围内,控制菌适用性试验中试验组均能检出所加试验菌相应的反应特征。结论:所采用的方法符合《中国药典》2020年版四部通则的有关规定。

药品微生物限度检查方法学验证的研究进展

《中国药典》对药品微生物限度方法学验证提出要求已实施了10多年,但目前它仍是药品生产企业工作中的重点难点。本文通过查阅文献并结合自身工作经历,论述了药品微生物限度方法学验证研究的必要性,对比现版与旧版药典相关要求与方法的差异,以帮助药品检验机构和药品生产企业正确解读、执行2015年版《中国药典》,并开展相关工作。

珍黄胶囊微生物限度检查方法适用性试验的研究

目的建立珍黄胶囊的微生物限度检查方法。方法按照《中国药典》20l5版要求,对珍黄胶囊需氧菌总数、霉菌及酵母菌总数的计数方法以及控制菌的检查方法进行适用性试验研究。结果采用供试品溶液稀释法(1∶100,1 mL/皿)进行需氧菌总数的测定,采用供试品溶液稀释与培养基稀释结合的方法 (1∶20,1 mL分注2皿)进行霉菌和酵母菌总数的测定,采用常规法进行大肠埃希菌、耐胆盐革兰阴性菌和铜绿假单胞菌的检查,采用培养液稀释法(200 mL TSB)进行沙门菌和金黄色葡萄球菌的检查。结论所采用的方法经过验证,符合《中国药典》2015年版四部通则的有关规定。

4种口服液微生物限度检查法验证

目的 分别建立清热银花糖浆、小儿止咳糖浆、治咳枇杷露、骨舒宁口服液的微生物限度检查方法.方法 采用常规法、原液稀释法、薄膜过滤法循序渐进地消除供试品溶液的抑菌作用,进行需氧菌总数、真菌和酵母菌总数的染菌回收实验,采用常规法来进行控制菌的验证.结果 4种口服液均有一定抑菌作用,需氧菌总数计数方法：1个品种采用原液稀释2倍法（1：2供试液每皿1 mL）,2个品种采用原液稀释5倍法（1：5供试液每皿1 mL）,1个品种采用薄膜过滤法（1：10的供试液10 mL,冲洗量每膜200 mL）.真菌和酵母菌总数计数方法：2个品种采用原液稀释2倍法（1：2供试液每皿1 mL）,1个品种采用原液稀释5倍法（1：5供试液每皿1 mL）,1个品种采用薄膜过滤法（1：10的供试液10 mL,冲洗量每膜200 mL）.控制菌检查方法：4个品种的控制菌检查都是常规法.结论 所采用的方法经过验证,符合《中华人民共和国药典》2015年版四部通则的有关规定,方法可行.

2种瑶方合剂微生物限度检查方法适用性试验的研究

目的 对瑶方祛湿合剂和瑶方胃安合剂的微生物计数法进行适用性试验研究,为有抑菌作用,且不适宜采用平皿倾注法进行需氧菌总数计数的液体制剂提供适用性试验的方法参考。方法 分别对有抑菌作用而原液1 mL的样品量可以薄膜过滤的瑶方祛湿合剂,以及有抑菌作用且原液1 mL的样品量薄膜过滤会堵膜的瑶方胃安合剂,按照《中国药典》2020年版四部相关规定,循序、科学、合理地展开适用性研究试验。结果 瑶方祛湿合剂需氧菌总数采用原液薄膜过滤贴膜法(1∶10,10 mL,冲洗量100 mL/膜),瑶方胃安合剂需氧菌总数采用原液稀释10倍薄膜过滤贴膜法(1∶10,1 mL,冲洗量100 mL/膜),霉菌和酵母菌总数均采用原液平皿倾注法(原液,1 mL/皿),控制菌-大肠埃希菌检查均采用增菌液常规法。结论 所采用的方法符合2020年版《中国药典》四部通则的有关规定。