右美托咪定对阻塞性睡眠呼吸暂停综合征大鼠海马神经元凋亡的影响及其机制研究

目的探究右美托咪定(Dex)对阻塞性睡眠呼吸暂停综合征(OSAS)大鼠海马神经元凋亡的影响,并分析其作用机制。方法45只SD雄鼠随机选取10只作为对照组,其余大鼠复制OSAS模型,5只大鼠窒息死亡,剩余30只大鼠成功复制OSAS模型并随机分为OSAS组及Dex高、低剂量组,每组10只。Dex高、低剂量组分别腹腔注射Dex 2.5、0.5μg/(kg·d),对照组与OSAS组给予等剂量的生理盐水。连续干预4周后,采用神经监测仪监测大鼠呼吸暂停情况、平均及最低血氧饱和度,苏木精-伊红染色观察海马组织CA1区病理学改变,流式细胞术检测大鼠海马组织神经元凋亡,Western blotting检测核因子E2相关因子2(Nrf2)/血红素氧合酶1(HO-1)通路相关蛋白的表达。结果与对照组比较,OSAS组呼吸暂停次数增多(P<0.05),平均及最低血氧饱和度降低(P<0.05),细胞凋亡率升高(P<0.05),Nrf2、缺氧诱导因子1α(HIF-1α)及HO-1蛋白相对表达量升高(P<0.05);与OSAS组比较,Dex高、低剂量组呼吸暂停次数减少(P<0.05),平均及最低血氧饱和度升高(P<0.05),细胞凋亡率降低(P<0.05),Nrf2、HIF-1α及HO-1蛋白相对表达量降低(P<0.05);与Dex低剂量组比较,Dex高剂量组呼吸暂停次数减少(P<0.05),平均及最低血氧饱和度升高(P<0.05),细胞凋亡率降低(P<0.05),Nrf2、HIF-1α及HO-1蛋白相对表达量降低(P<0.05)。结论Dex能够改善OSAS大鼠呼吸暂停及血氧饱和度,抑制海马神经元凋亡,其机制可能与Nrf2/HO-1通路有关。

丙泊酚对异氟烷镇痛、催眠效应的影响

目的观察丙泊酚对异氟烷镇痛、催眠效应的影响。方法试验小鼠120只(雌雄比2:1)随机分为热板法试验组(n=40,雌性)、甩尾法试验组(n=40,雌雄各半)和催眠试验法组(n=40,雌雄各半),各组再按分层随机设计分为NS组(生理盐水组)、Pp组(丙泊酚组)、Iso组(异氟烷组)和Pp+Iso组(丙泊酚与异氟烷合用组)。镇痛试验分别以热板法痛阈(HPPT)、甩尾潜伏期(TFL)为指标,催眠试验以小鼠睡眠潜伏期、睡眠时间和入睡率为指标。结果与NS组、Pp组和Iso组相比,Pp+Iso组HPPT在给药后5、10和15 min延长(P<0.01或P<0.05),TFL在给药后5、10、15、20、25和30 min延长(P<0.01或P<0.05),睡眠潜伏期明显缩短(P<0.01),睡眠时间显著延长(P<0.01),入睡率显著升高(P<0.01)。结论丙泊酚可增强异氟烷的镇痛和催眠作用。

鞘内注射NR2B9c缓解大鼠神经痛理性疼痛

神经病理性疼痛是临床上一个常见的慢性疼痛，其发病机制目前尚不清楚。中枢敏化被认为是慢性疼痛发生的重要内在机制[1-2]，大量证据表明：疼痛的中枢敏化与兴奋性氨基酸（EAA）（谷氨酸、天冬氨酸）及其受体N-甲基-D-天冬氨酸受体（NMDARs）[3-5]，尤其是含有NR2B亚单位的NMDARs在突触后膜的上调密切相关。NR2B亚基C末端的氨基酸残基可特异性地与突触后致密蛋白95（PSD-95）的PDZ2结构域结合[6]，

鞘内注射KN93对神经病理性疼痛大鼠痛行为学的影响

目的观察鞘内注射钙，钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ（Ca2＋／calmodulin dependent proteinkinaseⅡ，CaMKⅡ）抑制剂KN93对腰背根神经节慢性压迫（chronic compression of dorsal root ganglion，CCD）大鼠神经病理性疼痛的影响。方法SD雄性大鼠48只，按随机数字表法分为3组：假手术组（S组，11只）、CCD模型组（C组，11只）、KN93组（K组，26只）。C组、K组制备CCD模型，S组仅暴露L。椎间隙。术后14dS组和C组鞘内注射10％溶媒二甲基亚砜（dimethylsulfoxide，DMSO）25μl，K组鞘内注射溶于10％DMSO的KN9350μg／25μl。各组在造模前1d（t1），造模后4（t2）、7（t3）、10（t4）、14d（t5）随机取8只大鼠检测热缩足反射潜伏期（paw withdrawal thermal latency，PWTL）和机械缩足反射阈值（paw withdrawal mechanical threshold，PWMT）；并于鞘内注射DMSO或KN93后2（t6）、4（t7）、10（t8）、12（t9）、24h（t10）时进行相同的行为学检测。各组于给药前以及K组的给药后各时间点（t6．t9）随机取8只大鼠处死并取脊髓腰膨大部分，采用Westernblot方法检测CaMK11蛋白表达水平。结果鞘内给药后t6．t9时点，K组PWTL[（14．7±1．6）、（18．6±1．8）、（21．2±2．5）、（15．3±2．0）S]，PWMT[（12．0±1．0）、（15．4±1．4）、（17．5±1．7）、（14．9±1．6）g]比C组PWTL[（11．6±1．8）、（10．7±1．7）、（11．7±2．4）、（9．9±1．7）s]，PWMT[（8．4±0．9）、（9．6±1．6）、（10．6±1．7）、（8．9±1．3）g]升高，差异有统计学意义（P〈0．05）。给药前及给药后t10时，K组PWTL、PWMT与C组比较，差异无统计学意义（P〉0．05o和t5时CaMKII值（1．55±0．12）比较，给药后t6～t9时间点CaMKⅡ蛋白[（1．37±0．11），（1．15±0．12）、（0．75±0．08）、（0．86±0．12）]表达下降（P〈0．05）。结论鞘内注射KN93可有效缓解神经病理性疼痛大鼠的疼痛反应。

罗哌卡因切口周围局部浸润对大鼠慢性术后疼痛的抑制作用

目的评价术中不同浓度罗哌卡因切口周围局部浸润对慢性术后疼痛的抑制作用。方法雄性SD大鼠30只，体重180g-220g，按随机数字表法分为5组，每组6只：假手术组（S组）、生理盐水组（R0组）、0．5％罗哌卡因组（R1组）、0．75％罗哌卡因组（R2组）、1％罗哌卡因组（R，组）。按Flatters法制作皮肤／肌肉切开牵拉模型（skin／muscleincisionandretraction，SMIR），s组大鼠除未进行SMIR之外其他操作均与其他组相同。应用yonFrey细丝法测定术前及术后1、3、7、10、14、17、21、24、28d的机械缩足反射阈值（pawwithdrawalmechanicalthreshold，PWMT）。结果各组术前PWMT基础值差异无统计学意义（P〉0．05）；与凡组比较，R。组PWMT于术后1、3、7、10、14、17、24d升高[（20．9±3．7）、（14．8±4．6）、（15．8±4．4）、（13．9±1．6）、（9．8±0．8）、（10．2±1-3）、（10．3±2．7）g]（P〈0．05），R2组[（21．0±5．2）、（21．3±3．9）、（15．3±4．1）、（18．4±3．3）、（12．1±1．1）、（11．5±1．6）、（14．1±1．9）、（13．2±3．0）、（9．5±2．4）g]和R3组[（22．2±2．9）、（22．5±4．1）、（22．1±4．7）、（23．8±0．9）、（18．2±3．2）、（15．7±3．2）、（21．3±3．9）、（18．4±4．2）、（21．0±4．2）g]PWMT在术后所有时间点均升高（P〈0．05）。结论术中罗哌卡因切口周围局部浸润可以抑制慢性术后疼痛。

鞘内注射单羧酸转运蛋白抑制剂α-氰基-4-羟基肉桂酸缓解大鼠神经病理性疼痛

目的 观察鞘内注射4-CIN对坐骨神经慢性缩窄性损伤（CCI）大鼠神经病理性疼痛的影响.方法 18只雄性SD大鼠按随机数字表法分为3组（n=6）：假手术组（S组）、CCI组（C0组）及4-CIN组（C1组）.C0组与C1组建立CCI动物模型,S组仅分离而不结扎坐骨神经.术后第2天,C1组鞘内注射溶解于10％二甲基亚砜（DMSO） 10μl中的4-CIN（α-cyano-4-hydroxy-cinnamate）100 μmol,C0组仅鞘内注射DMSO10μl.各组在术前1d、术后第1,3,7,10,14天（T0-5）测定大鼠机械缩足反应阈值（PWMT）和热缩足反应潜伏期（PWTL）.结果 各组术前PWMT和PWTL差异无统计学意义（P＞0.05）.与S组相比,C0组在T1-5时PWMT[（11.71±2.81）g,（9.76±1.00）g,（8.22±1.33）g,（6.50± 1.48）g,（4.67± 1.03）g]、PWTL[（11.36±2.18）s,（11.60±2.54）s,（8.54±1.42）s,（7.59±1.00）s,（6.88±0.42）s]均出现明显降低（P＜0.05）,而C1组在给药后T2-5时与S组无明显差异（P＞0.05）.结论 鞘内注射4-CIN可缓解CCI所致的慢性神经病理性疼痛.

脊髓背角单羧酸转运蛋白-2在大鼠术后持续性疼痛中的作用

目的研究脊髓背角单羧酸转运蛋白-2（monocarboxylatetransporter-2，MCT-2）在术后慢性疼痛中的作用。方法76只健康雄性SD大鼠，采用随机数字表法分为3组：假手术组（S0组）、模型组（S1组）和给药组（S2组）。S1组和S2组建立皮肤肌肉切口牵拉术（skin／muscleincisionandretraction，SMIR）动物模型，S0组仅切开而不进行SMIR操作。术后第10天，S2组鞘内注射溶解于10％二甲基亚砜（dimethylsulfoxide，DMSO）10μl中的d氰基4堀基肉桂酸（α-cyano-4-hydroxy-einhamate，4-CIN）100μmol，S1组仅鞘内注射10％DMSO10μl。各组在术前1d（-1d）及术后1、3、7、10、14、21、28d测定大鼠机械缩足反射阈值（pawwithdrawalmechanicalthreshold，PWMT）。So组与S2组于术后14d、S1组于-1d-28d各时间点分别取4只大鼠，处死后取术侧L4-5脊髓背角组织，采用Westernblot法测定MCT-2表达变化。结果各组术前PWMT差异无统计学意义（P〉0．05）。与S0组比较：S1组从术后3d[（10．7±3．4）g]起PWMT明显降低，且一直持续至28d[（10．6±2．5）g]（P〈0．05），且术后1d-28d时脊髓背角MCT-2表达水平上调（P〈0．05）；S2组PWMT在给药P后14d～28d，差异无统计学意义（P〉0．05）。与S1组比较，S0组与S2组在14d时脊髓背角MCT-2表达水平均下调（P〈0．05）。结论SMIR大鼠脊髓背角MCT-2表达上调，鞘内注射4-CIN可缓解SMIR所致的术后持续性疼痛，其机制可能与抑制脊髓背角MCT-2有关。

齐墩果酸对糖尿病大鼠心肌保护作用及机制研究

目的观察研究齐墩果酸(oleanolic acid,OA)对糖尿病心肌病(diabetic cardiomyopathy,DCM)大鼠心脏的保护作用及其机制。方法50只健康4周龄雄性SD大鼠随机(随机数字法)分为正常对照组(CON)、糖尿病组(DM)、糖尿病+齐墩果酸组(DM+OA)、糖尿病+氯喹(chloroquine,CQ)组(DM+CQ)和糖尿病+齐墩果酸+氯喹组(DM+OA+CQ),每组10只。通过喂食高脂高糖食物(质量百分比35.5%)和腹腔注射链脲霉素建立糖尿病动物模型。OA 80 mg/(kg·d)灌胃喂药4周,CQ 10 mg/(kg·d)腹腔注射4周。于20周后进行超声心功能检测后麻醉取大鼠心脏组织。采用超声心动图检测SD大鼠心脏功能,并通过Western blot技术对自噬相关蛋白LAMP2、p-ULK1、p-p70S6K、p-raptor、LC3、p62进行蛋白半定量分析,观察大鼠心功能及心肌细胞中自噬相关蛋白表达的变化。正态分布计量资料多组间比较采用单因素方差分析,组间两两比较采用SNK-q检验。结果与CON组相比,DM组大鼠心脏舒张末期心肌前壁厚度、左室舒张末期容积、左室收缩末期容积[(7.58±0.25)mm、(376.6±13.6)μL、(132.6±10.8)μL]低于CON组[(8.37±0.11)mm、(458.3±16.4)μL、(166.6±12.8)μL](均P<0.05)。与DM组比较,DM+OA组大鼠心脏舒张末期心肌前壁厚度、左室舒张末期容积、左室收缩末期容积[(8.63±0.14)mm、(473.6±18.6)μL、(174.6±12.7)μL]高于DM组(均P<0.05)。DM+OA+CQ组大鼠心脏舒张末期心肌前壁厚度、左室舒张末期容积、左室收缩末期容积[(7.97±0.17)mm、(393.6±15.6)μL、(147.6±10.2)μL]低于DM+OA组(均P<0.05)。DM组心肌细胞自噬相关蛋白p-ULK1表达升高、p-p70S6K及p-raptor表达降低(均P<0.05)。与DM组比较,OA治疗组心脏功能障碍减轻,伴随p62表达降低、LC3Ⅱ/Ⅰ表达升高(均P<0.05)。与DM+CQ组比较,DM+OA+CQ组p62表达降低,LC3Ⅱ/Ⅰ表达升高(均P<0.05)。结论OA对糖尿病大鼠的心肌具有保护作用,其机制可能与增强自噬有关。

不同通气容量对全身麻醉诱导胃进气的影响

目的通过超声测量评估全身麻醉诱导时不同通气容量对腹腔镜胆囊切除术（Laparoscopic cholecystectomy，LC）患者胃进气的影响。方法选择择期行LC的患者45例，年龄30～60岁，BMI19—24kg／m^2，ASA分级Ⅰ、Ⅱ级，采用随机数字表法分为3组（每组15例）：6ml／kg通气组（V6组）、7ml／kg通气组（V7组）和8ml／kg通气组（V8组）。静脉全身麻醉诱导后，采用容量控制模式行面罩通气2min。使用超声监测仪在面罩通气前及通气2min时采集胃窦部面积（cross-sectional antral area，CSA），并记录患者睫毛反射消失即刻（T0）、面罩通气30s（T1）、面罩通气60s（T2）、面罩通气90s（T3）、面罩通气2min（T4）及插管后即刻（B）的SpO2及PETCO2。结果T4、T5时V6组患者SpO2较T0及其余两组降低（P〈O．05），T3-T5时V6组患者PETCO2较T0及其余两组升高（P〈0．05）；v8组面罩正压通气后CSA明显大于面罩通气前（P〈0．05）。结论患者全身麻醉诱导去氮给氧时，面罩通气容量为7ml／kg时既可保证通气效果，又可避免发生胃进气。

白藜芦醇预处理对心肌缺血再灌注损伤的影响

目的探究白藜芦醇(resveratrol,Res)预处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤(myocardial ischemia reperfusion injury,MIRI)的影响.方法将42只健康成年雄性SD大鼠按随机数字表法分为4组:假手术组(Sham组,12只)、心肌缺血再灌注损伤组(IR组,12只)、白藜芦醇组(Res组,12只)和地尔硫卓组(阳性对照组,6只).IR组、Res组和阳性对照组大鼠均采用结扎冠状动脉左前降支30 min再灌注2 h的方法建立MIRI模型,Sham组大鼠只穿线不结扎.建立MIRI模型前,Res组和阳性对照组大鼠连续7d、每天分别腹腔注射1次Res(20 mg/kg)和地尔硫卓(5mg/kg),Sham组和IR组大鼠每天腹腔注射1次等容量二甲基亚砜(dimethyl sulfoxide,DMSO)溶液.4组大鼠于再灌注2 h时取腹主动脉血,采用ELISA法测定血清乳酸脱氢酶(lac-tate dehydrogenase,LDH)、肌酸激酶同工酶(creatine kinase isoenzyme,CK-MB)浓度;取心肌组织测定心肌梗死面积,计算心肌梗死面积百分比.Sham组、IR组和Res组大鼠取心肌组织检测铁含量、丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量和超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性,采用Western blot法检测心肌组织谷胱甘肽过氧化物酶4(glutathione peroxidase 4,GPX4)、铁蛋白重链(ferritin heavy chain,FTH)、脂肪酸辅酶A连接酶4(fatty acid-coenzyme A ligase 4,FACL4)蛋白水平.结果与Sham组比较:IR组、Res组、阳性对照组血清CK-MB、LDH浓度升高(P<0.05),IR组、Res组心肌梗死面积百分比增大(P<0.05);IR组心肌组织铁含量、MDA含量和FACL4蛋白水平升高(P<0.05),心肌组织SOD活性和FTH、GPX4蛋白水平降低(P<0.05).与IR组比较:Res组和阳性对照组血清CK-MB、LDH浓度降低(P<0.05),心肌梗死面积百分比减少(P<0.05);Res组大鼠心肌组织铁含量、MDA含量和FACL4蛋白水平降低(P<0.05),SOD活性和FTH、GPX4蛋白水平升高(P<0.05).其他指标比较差异无统计学意义(P>0.05).结论Res预处理可降低大鼠心肌组织氧化应激水平以抑制铁死亡,从而减轻MIRI.