抗坏血酸增强三氧化二砷诱导多发性骨髓瘤细胞凋亡

目的:探讨抗坏血酸(AA)对三氧化二砷(As2O3)诱导人多发性骨髓瘤(MM)细胞株RPMI8226细胞凋亡的作用及其分子机制。方法:采用细胞计数、细胞形态学、透射电镜、吖啶橙溴化乙锭(AOEB)染色、AnnexinⅤ染色以及细胞周期测定,观察As2O3联合AA对RPMI8226细胞的增殖抑制及促凋亡作用;应用流式细胞仪检测RPMI8226细胞死亡受体DR4分子的表达。结果:单用AA对RPMI8226细胞的生长无影响;As2O3抑制RPMI8226细胞的生长,其作用呈时间和剂量依赖性;As2O3联合AA较单用As2O3对RPMI8226细胞的抑制作用强(P<0.01)。单用5μmol/L的As2O3对靶细胞作用后,无明显凋亡形态学改变;100μmol/L的AA联合5μmol/L的As2O3作用靶细胞后:光镜、电镜和AOEB染色显示出典型的凋亡形态学改变;AnnexinV染色检测到早期凋亡细胞;细胞周期显示:G1期细胞比例增高,S期减低,并有凋亡峰。As2O3能上调RPMI8226细胞表达DR4分子,AA联合As2O3可以增强上述效应(P<0.05)。结论:AA对As2O3诱导RPMI8226细胞凋亡有增敏效应,该效应过程可能依赖于死亡受体DR4的过度表达。

非霍奇金淋巴瘤的研究进展

非霍奇金淋巴瘤(non-Hodgkin lymphoma,NHL)不是一种单一的疾病,而是一大类生物学行为迥异的一族疾患,瘤变后的局部淋巴组织中的淋巴细胞也极易循环至全身,通过相应的治疗取得一定的效果,然而仍有少部分原发化疗抗拒(难治性)或短暂缓解即复发的病例,预后不佳,需要寻找新的解救方案或治疗手段以控制肿瘤的生长。本文就最近研究进展作一简单综述。

急性髓系白血病128例免疫表型与预后的关系研究

目的:探讨急性髓系白血病(AML)免疫表型对临床诊断及治疗的意义。方法:回顾分析了初发的128例急性髓系白血病患者的细胞形态学、白血病免疫分型与预后相关资料。结果:128例患者中髓系抗原CD33表达率为96.8%、CD13表达率为98.4%,MPO表达率为93.7%,98.7%的Aml患者中至少有CD33、CD13、MPO中的两项阳性。急性早幼粒细胞白血病HLADR、CD34的阳性率极低。其余各亚型HLA-DR的阳性率为67.9%;CD34阳性率为53.1%;淋巴系抗原CD7阳性率为21.8%,CD19阳性率为16.4%。结论 :白血病免疫分型能够弥补形态学分类的不足,大大提高了Aml各亚型的诊断符合率,为临床分层治疗提供可靠实验室依据,CD19阳性是Aml预后良好指标之一,CD7阳性是Aml预后不良指标之一。

B细胞非霍奇金淋巴瘤PBK/TOPK表达与增殖活性的关系

目的研究PBK/TOPK在反应性淋巴组织增生和B细胞非霍奇金淋巴瘤组织(B cell non-Hodgkin s lymphoma,B-NHL)中的表达和肿瘤增殖活性的关系,探讨TOPK在淋巴瘤组织中发生发展中的作用及其临床意义。方法运用SP法免疫组化法检测PBK/TOPK和Ki-67在B细胞性侵袭性淋巴瘤22例、惰性淋巴瘤21例、淋巴结反应性增生15例中的表达。结果TOPK在惰性淋巴瘤中的阳性率明显低于侵袭性淋巴瘤(P<0·01)。Ki-67在反应性淋巴结增生和B-NHL中的表达与PBK/TOPK非常一致,二者存在正相关(P<0·01)。在淋巴结反应性增生中,PBK/TOPK主要表达于激活的中心母细胞,同时这些细胞亦表达Ki-67抗原。结论TOPK能激活B淋巴细胞,并与B-NHL的细胞增殖活性和恶性程度密切相关,提示TOPK在B细胞淋巴瘤的恶性增殖过程中发挥重要作用,为B细胞淋巴瘤的预后判断和诊治提供新的依据和靶点。

特发性血小板减少性紫癜外周血Th1/Th2平衡偏移的研究

目的拟建立一种准确的、客观的检测T淋巴细胞亚群的方法,探讨在特发性血小板减少性紫癜(ITP)中T淋巴细胞亚群Th1/Th2平衡状态的变化及其意义。方法选择2007年3月至2008年2月在延安大学附属医院血液免疫科住院的30例特发性血小板减少性紫癜(ITP组)和同期20例健康体检者(对照组)作为研究对象,收集其外周抗凝血,以PE标记的抗CD195单抗和CD30单抗与FITC标记的抗CD4单抗作双色流式细胞术,用淋巴细胞设门,分别以CD4+CD195+和CD4+CD30+细胞代表Th1、Th2细胞,分析ITP患者及健康人外周血T细胞各亚群百分率及Th1/Th2比例的变化。结果ITP组治疗前Th1、Th2细胞百分比均低于对照组,而Th1/Th2比值高于对照组,差异具有显著性(P<0.05);经大剂量人免疫球蛋白和地塞米松冲击治疗后,血小板数上升,Th1/Th2比值降低,与治疗前相比差异有显著性(P<0.05)。结论在ITP患者中外周血T淋巴细胞表面标志表达异常,T细胞亚群比例失调,即ITP患者体内Th1/Th2比值升高,提示特发性血小板减少性紫癜是一种Thl优势的疾病。

三氧化二砷对多发性骨髓瘤细胞生物学特性的影响

目的探讨三氧化二砷(As2O3)对人多发性骨髓瘤细胞系RPMI8226细胞生物学特性影响的分子机制。方法用人多发性骨髓瘤细胞系RPMI8226细胞作为体外实验对象。应用流式细胞仪检测细胞周期、凋亡峰、死亡受体DR4和DR5分子及黏附分子VLA4(CD49d)的表达;用聚合酶链反应测定靶细胞CXCR4基因表达;免疫组化染色和荧光显微镜检测DR4和DR5分子的表达情况。结果5μmol/L的As2O3可以明显上调RPMI8226细胞DR4、DR5分子的表达(P<0.01),明显下调CXCR4基因和VLA4分子表达;还可以诱导RPMI8226细胞凋亡、增加G1期细胞比例,出现明显凋亡峰。结论As2O3诱导RPMI8226细胞凋亡,可能与死亡受体DR4、DR5分子过度表达有关;As2O3抑制靶细胞CXCR4基因和黏附分子VLA4的表达,从而影响细胞的增殖、迁移与归巢能力。

细胞凋亡与活性氧

随着对细胞凋亡机制研究深入,具有凋亡诱导作用的药物不断被发现,可以通过不同的手段在不同阶段进行干预细胞凋亡而治疗疾病。许多研究表明活性氧(reactive oxygen species,ROS),即氧自由基及其衍生物与细胞凋亡密切相关。ROS在多种抗肿瘤药物诱导凋亡过程中起着介导和调节作用。本文就近年来有关ROS及药物参与下诱导细胞凋亡研究进展作一综述。

2型糖尿病血小板活化与血糖变化的相关分析

目的探讨糖尿病患者糖化血红蛋白水平与血小板膜GPⅡb/Ⅲa复合物纤维蛋白原受体(PAC-1)和P选择素(CD 62P)的关系及其临床意义。方法采用流式细胞仪三色荧光标记技术来测定45例40岁以下初发的2型糖尿病患者及20名健康对照组的PAC-1、CD 62P的表达率和糖化血红蛋白A1(GHbA1)比率,同时进行治疗前后及与对照组比较。结果初发的2型糖尿病组PAC-1(12.38±3.15%)、CD 62P(8.74±2.01%)、GHbA1(9.53±2.73%),其表达分别显著高于健康对照组的2.67±1.52%(P<0.001)、1.07±1.41%(P<0.001)、6.21±1.05%(P<0.001)。降糖治疗6月后糖尿病组血糖达标,PAC-1(7.38±3.25%)、CD 62P(6.26±3.01%)、GHbA1(6.33±1.46%),与治疗前比较有显著差异(P<0.001)。结论2型糖尿病血小板活化与糖化血红蛋白水平密切相关。严格控制血糖可以抑制血小板活化,预防血栓性疾病的发生。

CD4^+ CD25^+调节性T细胞在白血病中的表达及临床意义

目的:研究CD4+CD25+调节性T细胞(CD4+ CD25+ Treg细胞)在白血病中的表达及临床意义。方法:30例确诊的白血病患者在入院时各采静脉血2ml,予EDTA-K2抗凝后送流式细胞仪(FCM)检测CD4+ CD25+调节性T细胞的表达水平。分别给予30例患者VCDP(长春新碱、环磷酰胺、柔红霉素、泼尼松)方案、DA、MA(柔红霉素、阿糖胞苷)或HA(高三尖杉碱、阿糖胞苷)方案静脉注射化疗,化疗后骨穿+外周血示完全缓解或部分缓解,再次采取外周血样,流式细胞仪检测CD4+ CD25+调节性T细胞的表达水平。结果:化疗缓解后患者外周血中CD4+ CD25+ Treg细胞下降明显。结论:外周血CD4+ CD25+ Treg细胞的表达水平对白血病的诊断和治疗具有一定的指导作用。

Pho-P38与Ki67在B细胞非霍奇金淋巴瘤中的表达及其意义

目的研究Pho-P38在B细胞非霍奇金淋巴瘤组织(BcellNon-Hodgkin’sLymphoma,B-NHL)和反应性淋巴组织增生中的表达和肿瘤增殖活性的关系,探讨Pho-P38在淋巴瘤发生发展中的作用以及其临床意义。方法采用免疫组织化学方法(S-P法),检测20例B细胞侵袭性淋巴瘤、20例惰性淋巴瘤、10例反应性增生淋巴结组织中Pho-P38、Ki67的表达。结果惰性淋巴瘤组织中Pho-P38和Ki67的阳性表达率分别是24.3%±13.6%,22.3%±13.2%,显著低于它们在侵袭性淋巴瘤的阳性表达率,P<0.01;Pho-P38在反应性淋巴结增生和B-NHL中的表达与Ki67基本一致,两者呈正相关(γ=0.79,P<0.01)。结论Pho-P38和Ki67的表达与B-NHL的细胞增殖和恶性程度密切相关,提示Pho-P38在淋巴瘤的恶性增殖过程中发挥重要作用,可成为药物治疗作用的靶点。

PBK/TOPK在TPA诱导的人HL-60细胞分化中的表达及意义

目的:研究PBK/TOPK在TPA(佛波酯)诱导白血病细胞HL-60的分化时的表达及意义.方法:细胞化学染色法观察药物作用后细胞形态的变化;流式细胞仪检测药物对HL-60细胞周期及细胞表面分化抗原CD11b,CD14,CD13和CD33表达的影响;用westernBlot法检测PBK/TOPK在HL-60细胞分化前后表达的变化.结果:经5.1nmol/LTPA处理72h后,NBT阳性细胞数和CD11b,CD13,CD14表达是增加的,HL-60细胞体积缩小,核浆比例减低,核仁减少甚至消失,核形态扭曲折迭或分叶;PBK/TOPK在HL-60细胞向成熟分化后表达下调.结论:TPA能抑制白血病细胞HL-60的增殖,并诱导其向成熟单核、粒细胞分化,在此过程中,PBK/TOPK表达是下调的,但Pho-PBK/TOPK的表达是增加的.

过敏性紫癜患儿外周血IL-16、IL-18水平的研究

目的探讨IL-16、IL-18在过敏性紫癜患儿中的应用价值。方法采用固相酶联免疫分析法检测69例过敏性紫癜患儿血清IL-16、IL-18水平。结果过敏性紫癜急性期患儿血清IL-16、IL-18较健康对照组明显升高(P<0.01),而过敏性紫癜缓解期患儿与健康对照组间无显著差异(P>0.05),过敏性紫癜患儿IL-16与IL-18呈正相关。结论 IL-16、IL-18可能参与过敏性紫癜血管炎的发病,IL-16、IL-18的检测与过敏性紫癜病情发展有一定关系。

慢性中性粒细胞白血病合并肺纤维化1例报告

为提高对少见病慢性中性粒细胞白血病的认识,探讨慢性中性粒细胞白血病与肺纤维化共同发病的关系。运用骨髓细胞学检查,中性粒细胞碱性磷酸酶积分,染色体检查,融合基因及CT检测诊断。得出慢性中性粒细胞白血病是临床罕见类型白血病,慢性中性粒细胞白血病与肺间质纤维化发病机制中均存在免疫缺陷,若两者联合发病预后极差。

流式细胞术在特发性血小板减少性紫癜临床研究中的应用

流式细胞术（flow cytometry,FCM）是20世纪70年代发展起来的对单细胞定量分析的一种新技术,它通过对流动液体中排成单列的细胞或颗粒进行逐个分析、测定细胞或颗粒的光散射和荧光情况,以获取其大小、内部结构、DNA、RNA等理化特性。

羟基脲诱导的K562细胞分化中PBK/TOPK的表达变化及其意义

目的研究PBK/TOPK在HU(羟基脲)诱导白血病细胞K562的分化时的表达及意义。方法用不同浓度的羟基脲对K562细胞进行诱导分化实验,通过联苯胺、吉姆萨-瑞氏染色和流式细胞仪证实其分化方向;用Western blot法检测PBK/TOPK在K562细胞分化前后表达的变化。结果400μmol/L的羟基脲对K562作用4d后具有良好的诱导分化效果,并诱导其向红系分化,且PBK/TOPK在K562细胞向成熟分化后表达不变,而Pho-PBK/TOPK和Pho-p38有少量增加。结论HU能抑制白血病细胞K562的增殖,并诱导其向红系分化,在此过程中,有激活的PBK/TOPK参与,推测很可能通过磷酸化下游分子p38而起作用。

低分子肝素钙联合黄芪治疗过敏性紫癜70例疗效观察

过敏性紫癜又称出血性毛细血管中毒症，是一种毛细血管变态反应性出血性疾病。临床特点为紫癜、关节肿痛、腹痛、肾炎。春秋两季发痫率高，儿童和青年患者居多。肾脏病变见于1／2～1／3患者，个刖严最病例死于尿毒症。临床上本病的治疗主婴为抗过敏、激素、免疫抑制剂等，但其不良反应大，治愈后易复发。本院自2006年以来，笔者用低分子盯素钙联合黄芪注射液治疗过敏性紫癜70例，取得了良好的效果，现报道如下。

免疫功能异常在免疫相关性疾病中的作用及临床意义

目的探讨外周血CD3、CD4、CD8、CD19细胞亚群在过敏性紫癜(HSP)、特发性血小板减少性紫癜(ITP)发病中的作用及临床意义。方法收集患病组和健康组外周抗凝静脉血,用流式细胞术分别检测外周血淋巴细胞亚群CD3+、CD4+、CD8+、CD4/CD8和CD19比例的变化。结果HSP患者CD4+细胞比例和CD4/CD8(1.13±0.08)均减低,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);ITPCD8+细胞比例增高(P<0.05),CD4/CD8比值下降至(1.02±0.26)(P<0.05)。结论CD4+细胞数量和CD4/CD8减少导致的免疫调节效应不足以及B细胞数量增多,可能是造成HSP免疫失衡的重要原因。ITPCD4/CD8比例减少、CD8细胞数量增多导致的免疫抑制效应过强,可能是ITP发病的重要因素。