10株H9N2亚型禽流感病毒血凝素基因的序列分析

为了解中国目前H9N2亚型禽流感病毒(avian influenza virus,AIV)血凝素(HA)基因的遗传变异情况,对中国不同地区分离的10株H9N2亚型AIV的HA基因进行扩增、克隆和测序,并对所获得的HA全序列进行同源性和遗传进化分析。结果表明,10个分离株的裂解位点均为RSSR↓GLF,符合低致病性AIV的分子特征;10个分离株有7～9个潜在糖基化位点,由于基因突变有些HA基因出现了新的糖基化位点;与参考株相比,发现了4个抗原表位的突变,这些表位的突变可能引起病毒致病性的改变;受体结合位点除198位有变异外,其他位点均较保守;6株病毒234位氨基酸均为L,具有与哺乳动物唾液酸α,2-6受体结合的特征;10个分离株HA基因与国内疫苗株的核苷酸及氨基酸序列同源性分别为90.4%～99.2%和92.2%～98.7%;10个分离株同属于欧亚谱系中的A/duck/Hong Kong/Y280/97群,但差异显著,为此本试验又将其分为4个不同的亚群。人工感染排毒试验结果表明,BJ15和NJ17分离株在鸡体内具有较强的复制能力,排毒周期较长且排毒量也较大,而S145N的漂变导致在145—147位氨基酸多出1个糖基化位点NGT,可能是分离株复制能力增强的原因。

H9N2亚型禽流感病毒细胞高产株的拯救

为构建能够在MDCK细胞中高水平复制的H9N2亚型禽流感病毒(AIV)疫苗株,本研究在对病毒生长特性及HA基因遗传进化分析的基础上,筛选出一株细胞高度适应的国内流行株A/chicken/Shanghai/11/2011(H9N2)(SH11),并通过反向遗传操作技术拯救出全部基因均来自亲本株的AIV rSH11株。生物学试验结果表明rSH11在鸡胚半数感染量(EID50)、组织培养半数感染量(TCID50)、遗传稳定性等方面均与亲本株保持一致,rSH11经MDCK细胞连续传5代后血凝价稳定在1∶1 024,表明该病毒株具有细胞高度增殖的特性。采用rSH11株制备油乳剂灭活苗免疫4周龄SPF鸡,免疫一周即可以检测出HI抗体,免疫3周后HI抗体平均效价高于1∶700,表明其具有良好的免疫原性。rSH11疫苗对不同的H9N2病毒株能够产生良好的免疫保护作用,显著抑制免疫鸡排毒。H9N2亚型AIV细胞高产株的拯救为该亚型AIV细胞苗的研制奠定了基础。

H5亚型禽流感病毒样颗粒的构建及生物学活性鉴定

为构建H5亚型禽流感病毒(AIV)病毒样颗粒(VLPs),并鉴定其生物学活性,本研究通过杆状病毒/昆虫细胞表达系统,分别单独表达H5亚型AIV血凝素(HA)及共表达HA和基质蛋白(M1),并采用免疫组织化学法、SDS-PAGE、western blot和血凝试验等对重组蛋白进行鉴定。实验结果表明:透射电子显微镜观察结果显示,共表达HA和M1的重组蛋白可以形成VLPs,而单独表达HA未观察到VLPs;表达的重组蛋白HA和HA-M1均能够凝集鸡红细胞,血凝效价分别为1∶27和1∶28。结果显示该方法获得的AIV结构蛋白具有良好的生物学活性和抗原活性,从而为禽流感VLPs疫苗的研究提供依据。

我国创业板上市公司无形资产信息披露分析

我国大部分创业板中小企业属于高新技术行业,无形资产成为创业板上市公司的核心资产,对高新技术企业的经营绩效具有重要影响,文章以380家创业板上市公司为研究对象,通过对筛选获得的12家样本公司无形资产信息披露存在的问题进行分析,发现无形资产披露存在许多问题,主要体现在披露范围狭窄、内容不充分;非常规无形资产很少披露等。最后在此基础上提出了建议。

预浓缩气相色谱质谱在半导体洁净室VOC管控中的应用

对预浓缩气相色谱质谱在半导体洁净室VOC(Volatile Organic compound,挥发性有机化合物)管控中的应用进行了系统的归纳和总结。主要从三个方面的应用进行了讨论:一是洁净室VOC来源确认,二是确认厂务系统处理效率的应用,三是厂务系统处理最终效果的确认。也是实验室分析仪器在半导体行业应用方面的成功范例。

H3N8亚型EIV HA基因在昆虫细胞中的表达及生物学特性分析

为表达H3N8亚型马流感病毒(EIV)HA蛋白,本研究将A/equine/xinjiang/3/2007(H3N8)的HA基因克隆至杆状病毒转移载体pFastBac1中,构建重组转移质粒pFB-XJ3-HA,并将其转化至DH10BAC感受态细胞中,与杆状病毒骨架质粒Bacmid进行重组,重组杆粒rBac-XJ3-HA转染Sf9昆虫细胞,构建重组杆状病毒rBv-XJ3-HA,并通过细胞免疫组化和western blot进行鉴定。结果表明rBv-XJ3-HA构建正确,表达的HA蛋白与抗EIV的血清反应良好;血凝试验结果表明表达的HA蛋白具有良好的血凝活性。本研究为研制EIV HA蛋白亚单位疫苗提供了实验依据。

表达H5N1亚型禽流感病毒HA基因重组腺病毒的构建及鉴定

为构建表达H 5N 1亚型clade 2.3.4禽流感病毒(AIV)HA基因的重组腺病毒,本研究通过RT-PCR扩增A/wild duck/Shandong/628/2011(H 5N 1)的H A基因,克隆于腺病毒穿梭质粒pShuttle-CMV中,构建重组腺病毒穿梭质粒pShuttle-CMV-HA。采用A d-Easy技术,制备表达AIVHA基因的复制缺陷型重组腺病毒rAd-H A。将rA d-HA感染Ad293细胞,可产生明显的细胞病变。通过细胞超薄切片观察到完整的腺病毒颗粒。经RT-PCR、间接免疫荧光及western blot证明HA基因在A d293细胞中成功转录和表达,并且表达的蛋白具有良好的生物学活性。本研究为新型H5N1亚型AIV活载体疫苗的研发奠定了基础。

关于中小房地产开发企业设计管理的探讨

在分析设计和设计管理本质的基础上指出,中小型房地产开发企业即使技术力量薄弱,但通过加强管理———设计任务书的编制、设计单位的选择、设计合同的订立、设计方案的评审以及设计沟通管理的把控,仍然能显著提高设计管理的成效。

浅谈如何做好建设项目档案管理工作

建设项目档案是整个工程建设者们辛勤汗水的见证,是全体参建人员智慧的结晶,也是整个工程质量的合格证。做好建设项目档案管理工作,首先正确认识档案的重要作用,从档案管理的基础环节入手,把握做好档案工作的各个环节,突出"高""金""细""严"的管理方法,实现项目档案的自身价值,为发展和谐社会和经济建设提供便利的服务,提升各项工作的管理水平及基建工程的建设水平。

关于CDM项目相关问题的探讨

世界经济高速发展和人类文明的进步的背后,是空气的污染,是森林的砍伐,是生态的破坏,尤其是"温室效应"的加剧让人忧心忡忡。而CDM项目对减少温室效应有着举足轻重的作用。

档案管理在企业发展中的重要作用及创新改善

档案管理对企业发展具有重要的影响作用,档案管理主要是对一些有价值的资料信息进行归纳、整合、挖掘,为企业未来发展提供有力支持。目前随着科学技术的创新,很多现代化信息技术逐渐投入使用,如大数据、云计算、物联网信息等,都已经在各个领域中得到广泛应用,基于新时代背景下,对档案管理也 提出更高要求,只有改变传统的档案管理模式,积极创新档案管理技术,才能够更好地满足企业发展要求,提高档案管理的质量与效率。

党在我心中

在欢庆建党八十周年之际，我这个73岁的老党员，按捺不住内心的激动，走上这个讲台，我由衷地感谢党对我多年的教育和培养，是党给了我今天的地位和荣誉。我要在有限的生命里，实现一名共产党员的人生价值。

跳跃扩散过程下企业的最优投资策略

越来越多的不确定因素使得投资企业很难快速决策以抓住最佳投资时机从而获取最大收益。针对这一问题,假定项目投资成本和产出价格均不确定且受突发事件的影响,通过建立不确定因素服从跳跃扩散过程的实物期权模型,求解了企业的投资期权价值和投资阈值,并分析了最相关参数对企业投资阈值的影响。在以往文献假设不确定因素相互独立的基础上,考虑了不确定因素的随机波动之间具有相关性的情形;在保留突发事件引起的跳跃幅度随机分布的假设框架下,运用均值、波动率、偏度3个统计特征参数对突发事件进行了刻画,进而推广了比较静态结果。研究结果表明:投资成本和产出价格的波动相关性越大,投资阈值越小,企业的最优投资策略为加快执行投资期权;而且,投资成本和产出价格的随机波动率对投资阈值的影响不仅与自身有关,而且取决于它们的相对波动率与相关性之间的大小关系;此外,引起投资阈值波动的主要因素是跳跃幅度均值和偏度而不是标准差,因此企业在作出投资策略前应重点考察突发事件的性质和影响方向。

创业板市场推出势在必行

创业扳又称二板市场,即第二股票交易市场,是指主板之外的专为暂时无法上市的中小企业和新兴公司提供融资途径和成长空间的证券交易市场,是对主板市场的有效补给,在资本市场中占据着重要的位置.10年轮回,中国证券市场创业板有望在2009年正式推出.在创业板即将推出之即,本文就创业板市场中存在的几个问题作一探讨.

巨大左房黏液瘤致心房纤颤1例报告

心脏原发性肿瘤(Cardiac tumors)极少见,据Sirauss报告480331例尸检中心脏肿瘤有8例,发病率为1.7/10万。心脏黏液瘤(Cardiac myxomas)占心脏原发性肿瘤的30%-50%,其中良性者占75%[1],但心脏黏液瘤致房颤的病例更少有报告,我科收治一例巨大左房黏液瘤致房颤患者,现报告如下。1病例资料患者女,42岁。因'气急10年,心悸3年,呼吸困难1周'为主诉入院。患者于10年前无明显诱因出现活动后气急,未就诊治疗。3年前出现反复心悸。

关注动态生成,让课堂绽放精彩

在日常课堂教学过程中．因为学生个体认知水平的差异和认知需要．以及师生情感交流的不同导向．往往使学生产生很多超出我们预想的思维．而使教学处理起来很被动，甚至有时候感觉很尴尬。然而这些“节外生枝”的思维往往又是不可多得的隐性教学资源。乃至整节课的一个精彩亮点。如果教师对这些不曾预约的生成．束手无策或简单粗暴地处理．势必与很多的精彩思维擦肩而过，因此．我们要重视这些课堂意外生成。那么．我们如何才能敏锐地抓住教学契机，巧妙地进行点拨。提高自己的教育智慧，把课堂中的“意外”化为异样的“精彩”呢？

好玩的数学

《数学课程标准》指出：教学中，要创设与学生生活环境、知识背景密切相关的，学生感兴趣的学习情境。因而，在平时的教学中，教师应创设活动情境，让学生去经历、去体验，在实现数学化的进程中体验数学乐趣、体验自主探究、体验数学价值，使学生学生活中的数学、学自己的数学，让学生觉得数学好玩。

脑脊液置换术治疗脑出血破入脑室系统的临床观察

脑出血是一种严重危害人类健康的常见病、多发病,具有很高的致残率和致死率,临床治疗以内科保守治疗为主,出血量大的可采用手术治疗。但对脑出血破入脑室系统者,如不发生中脑水管阻塞,手术治疗弊大于利。故脑脊液置换术仍可作为一种临床常用的简易非手术治疗法。

H3N8亚型马流感病毒VLPs的构建及其生物学特性分析

为了构建含H3N8亚型马流感病毒HA蛋白和M1蛋白的病毒样颗粒疫苗,把A/equine/Xinjiang/3/2007(H3N8)的HA基因和M1基因克隆到杆状病毒穿梭载体pFastBac Dual中,将得到的重组穿梭质粒pFBD-XJ3HA-M1转化至DH10Bac感受态细胞,与杆状病毒骨架质粒Bacmid进行重组从而获得重组杆状病毒转座子rBac-XJ3HA-M1,然后将其转染Sf9昆虫细胞,包装重组杆状病毒rBV-XJ3HA-M1。通过PCR鉴定、细胞免疫组织化学试验、Western-blot分析以及血凝试验证明,HA蛋白和M1蛋白在昆虫细胞中能够有效表达,且表达产物具有良好的反应活性,表达的HA蛋白具有血凝活性。电镜观察发现,HA蛋白和M1蛋白能够稳定形成病毒样颗粒。上述研究结果为研制马流感亚单位疫苗提供了技术储备,也为马流感病毒蛋白的功能研究奠定了基础。