蛇葡萄素的抗肿瘤作用研究

目的:研究蛇葡萄素在体内外对肿瘤生长的抑制作用。方法:用MTT法测定蛇葡萄素对人鼻咽癌HK-1细胞和人乳腺癌MCF-7细胞的体外细胞毒实验;观察蛇葡萄素对C57BL/6小鼠移植性B16黑色素瘤的体内抑瘤作用;用流式细胞仪测定含药小鼠血清对B16细胞周期及细胞增殖的影响。结果:蛇葡萄素对人鼻咽癌HK-1细胞及人乳腺癌MCF-7细胞的IC50分别为50.0μg/ml及79.4μg/ml。在100mg/kg、150mg/kg及200mg/kg的剂量下,与生理盐水对照组比较,蛇葡萄素对C57BL/6小鼠移植性B16黑色素瘤的抑瘤率分别为25.54%(P<0.05)、32.03%(P<0.01)及54.55%(P<0.001);60mg/kg氮烯咪胺(阳性对照组)的抑瘤率为59.31%,与200mg/kg的药物组比较无显著性差异(P>0.05);在150mg/kg及200mg/kg蛇葡萄素腹腔给药后10min的小鼠含药血清的作用下,B16细胞的G1期和G2/M期细胞数增高,S期细胞数减少,分裂增殖指数分别降低19.1%及21.7%。结论:蛇葡萄素对体外肿瘤细胞HK-1和MCF-7的增殖,及体内小鼠移植性B16黑色素瘤的生长均具有显著的抑制作用。

蛇葡萄素体内外对小鼠B16黑色素瘤侵袭和转移的抑制作用

目的 :研究蛇葡萄素对B16小鼠黑色素瘤体内外抗侵袭和转移的作用。方法 :B16细胞由尾静脉注入C5 7BL/ 6小鼠体内建立实验性肺转移模型 ,蛇葡萄素以 3个剂量从接种瘤细胞前一天腹腔给药 ,连续 18d ,于停药后第 2天观察肺转移瘤灶数。B16细胞经蛇葡萄素处理 3d ,用具有聚碳酸酯和重建基底膜 (Matrigel)的Tran swell小室侵袭模型 ,研究药物处理后细胞侵袭、趋化运动、粘附能力的改变。结果 :剂量为 15 0 ,2 0 0 ,2 5 0mg·kg-1的蛇葡萄素可抑制小鼠肺转移瘤灶形成 ,与溶剂对照组比 ,抑制率分别为 30 .97% ,4 0 .5 8% ,6 1.16 % (P <0 .0 5 )。经 2 0 ,4 0 ,80 μmol·L-1各浓度蛇葡萄素处理后 ,对B16细胞侵袭人工基底膜的抑制率分别为 36 .0 6 % ,5 9.5 8% ,79.0 9% (P <0 .0 1) ;对细胞的趋化运动抑制率分别为 5 1.5 9% ,5 6 .5 1% ,6 6 .75 % (P <0 .0 1) ;显著降低B16细胞与基质成分层粘连蛋白、纤维粘连蛋白及Matrigel的粘附作用。 结论 :蛇葡萄素具有抑制黑色素瘤的侵袭和转移的作用。

蛇葡萄素微囊的制备

以乙基纤维素(EC)为囊材,采用溶剂挥发技术制备缓释微囊,以二氯甲烷为溶剂,采用适当配比的聚乙烯醇(PVA)和十二烷基硫酸钠(SDS)水溶液为分散介质,制得白色微囊。在此过程中,内相聚合物浓度、投药量以及药物与分散相比例对包囊率有显著影响。经均匀设计法确定了优选工艺条件为:EC=6.0％,蛇葡萄素=0.2g,药物:EC=1:3,药物:分散介质=1:1,SDS:PVA=1:2。

从三七药材中快速批量分离提取人参皂苷Rd的方法

目的:从三七药材中快速批量分离提取人参皂苷Rd。方法:三七药材经乙醇提取总皂苷后,用大孔吸附树脂分离出人参二醇组皂苷,再经硅胶柱分离纯化。结果:用大孔吸附树脂乙醇溶液能分离去人参三醇组皂苷,再经硅胶柱“氯仿-甲醇-水”溶剂梯度洗脱一次过柱获得纯度达93%以上的Rd单体。结论:此法适合于批量分离提取人参皂苷Rd。

无莿根中蛇葡萄素的提取及其对黑色素瘤的抑制作用

目的：从民间传统中草药无根中用具有较高产率而又简便实用的方法提取其主要有效成分蛇葡萄素，通过对小鼠Ｂ１６黑色素瘤的抑制来考察其抗肿瘤药效。方法：采用经改进的甲醇提取、水重结晶的方法进行提取分离；急性毒性实验采用对小鼠一次腹腔注射测定药物的ＬＤ５０；以ＭＴＴ法测定药物对肿瘤细胞的抑制作用。结果：蛇葡萄素的提取率为１０３％；对昆明小鼠一次腹腔注射ＬＤ５０为１０２５ｍｇ／ｋｇ；对Ｃ５７小鼠Ｂ１６黑色素瘤细胞的ＩＣ５０为９８×１０－５ｍｏｌ／Ｌ。结论：与氮烯咪胺比较。

杨梅黄素及蛇葡萄素对酪氨酸酶的抑制作用

杨梅黄素及蛇葡萄素对酪氨酸酶有显著的抑制作用；在２ｍｍｏｌ／Ｌ的Ｌ－多巴浓度下，５０％抑制的药物浓度分别为０．０８２ｍｍｏｌ／Ｌ及０．２０８ｍｍｏｌ／Ｌ，用Ｌ－多巴作底物，蛇葡萄素对酪氨酸酶是竞争性抑制，其Ｋ＿ｉ是０．０８５ｍｍｏｌ／Ｌ；而杨梅黄素对酪氨酸酶则是混合性抑制，其Ｋ＿ｉ与Ｋ′＿ｉ分别是０．０２６ｍｍｏｌ／Ｌ与０．０７２ｍｍｏｌ／Ｌ。

血清药理学方法研究蛇葡萄素抗B16黑色素瘤的作用

目的:研究蛇葡萄素对黑色素瘤的抑制作用。方法:以血清药理学方法考察不同剂量的蛇葡萄素含药血清对B16黑色素瘤细胞的抑制作用,分别用MTT法及流式细胞术进行评价。结果:0.420mmol/kg、0.560mmol/kg剂量组的C57BL/6小鼠含药血清能有效抑制黑色素瘤B16细胞,与空白血清中加入浓度相当的蛇葡萄素的抑制率相同;两个剂量组的含药血清使肿瘤细胞的分裂增殖指数分别降低了19.1％、21.7％。结论:蛇葡萄素在血药浓度达峰期对小鼠黑色素瘤B16细胞的抑制可能以原型物形式起作用,抑制细胞的DNA合成。

填精益气中药对BMSCs成骨分化及甲基化转移酶METTL3的影响

目的 探究基于“精气互化”理论的填精益气中药对骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells, BMSCs)向成骨分化的影响以及其分化过程中对甲基化转移酶METTL3、WTAP、PPARγ影响的实验研究。方法 将BMSCs随机分为对照组、诱导组、填精组、益气组以及填精益气组。填精组药物为鹿茸提取液,益气组药物为黄芪甲苷,填精益气组药物为鹿茸提取液联合黄芪甲苷。使用ELISA法检测6、12、18 d各组细胞碱性磷酸酶(alkaline phosphatase, ALP)含量变化;qRT-PCR法检测各组细胞METTL3、WTAP、PPARγ的基因转录;Western blot法检测各组METTL3、WTAP、PPARγ的蛋白表达。结果 ALP实验结果显示,填精益气组ALP活性优于填精组和益气组,且在第12天填精益气组的ALP活性达到了最高值;QRT-PCR及Western blot的实验结果表明,与对照组相比,各用药组甲基化转移酶METTL3和WTAP mRNA及蛋白表达水平均显著上调(P<0.01),PPARγ mRNA及蛋白表达水平显著下调(P<0.01)。结论 填精法、益气法、填精益气法对BMSCs向成骨分化均具有促进作用,可能是通过提高甲基化转移酶METTL3和WTAP表达,降低PPARγ的表达,进而促进BMSCs向成骨分化增加,向成脂分化减少而实现的。三组中填精益气组明显优于单独用药组,说明填精益气组更有效提高BMSCs增殖向成骨分化,延缓成骨细胞凋亡进程,对绝经后骨质疏松症及其并发症的防治具有指导意义。

离子选择电极法测定单氟磷酸钠型牙膏中的含氟量

本文研究了离子选择性电极法测定单氟磷酸钠型牙膏中的有效氟和总氟含量的方法。样品的水解时间、稀释度及水解酸度对测定结果均有极大影响。该法简便快速,变异系数1. 5~3．4%,回收率92．0~100．8%,与蒸馏——滴定法无显著性差异。

骨盆骨折及合并症治疗体会

目的分析骨盆骨折及合并症的体会。方法回顾总结55例骨盆骨折合并腹腔脏器损伤的原因、手术治疗及结果。结果本组55例病例均为外伤,休克14例,手术治疗18例(同时腹部探查手术8例),保守治疗37例,未出现死亡病例。结论骨盆骨折及合并症其治疗原则是纠正失血性休克,确定出血的原因,及早止血及骨盆固定,有腹部闭合损伤的及时剖腹探查,行腹腔脏器损伤的处理,能够有效地提高骨盆骨折的救治率,减少病死率有重要的临床意义。

自体骨镶嵌人工股骨头置换治疗严重骨质疏松型股骨颈骨折(附23例报告)

应用自体骨镶嵌人工股骨头置换术治疗严重骨质疏松型股骨颈骨折 2 3例 (男 9例 ,女 14例 ,年龄 5 8～ 82岁 ) ,其中新鲜骨折 17例 ,陈旧性骨折 6例。随访 1～ 13年 ,平均 2年 9个月。按荣国威等人工股骨头置换术后功能评价标准 ,本组优 8例 ,良 14例 ,可 1例 ,优良率为 95 .6 %。认为自体骨镶嵌人工股骨头置换治疗严重骨质疏松型股骨颈骨折操作简便 ,取材容易 ,不存在异物反应 。

海洋生物保健制剂中的粘多糖含量测定

本文在醋酸钾存在下,以42%乙醇为介质,从海洋生物保健制剂中提取分离出粘多糖,用硫酸-咔唑法测定其含量,方法的平均回收率为100.7%(n=7),CV=3.2%,并与季铵盐沉淀法及Alcian蓝染料法作了对比.

基于相火论探讨原发性骨质疏松症的防治

原发性骨质疏松症是一种骨吸收和重建失衡的退行性病变,是老年人易发生骨折的主要病理因素,对老年人造成严重的身体和心理创伤。探求相火论和原发性骨质疏松症病机之间的关系,进而在其理论指导下进行防治。通过阅读朱丹溪的相火论,基于相火失常的2种状态,分析“相火不足”“相火妄动”和骨质疏松症病机的内在联系。“相火不足”导致肾阳得不到温煦,气化不利,精不得化,骨失所养;“相火妄动”会煎熬真阴,致肝肾阴亏,髓空骨枯,为原发性骨质疏松症发病的重要病机。相火不足多是由相火妄动日久,肝肾阴亏,无法涵养相火,致使相火失位,向外飘散,阴损及阳。从秋冬养阴、清淡饮食、怡情寡欲、滋阴降火4个方面来防治由“相火妄动”引发的原发性骨质疏松症。

蛇葡萄素对人肺癌GLC-82裸鼠移植瘤的抑制作用

目的 :为了进一步研究蛇葡萄素体内抗肿瘤作用 ,我们进行了人肺癌GLC 82裸小鼠移植瘤的抑瘤实验研究。方法 :人肺癌GLC 82细胞接种于裸鼠腋窝建立移植模型。荷瘤BALB/C裸鼠随机分成 6组 ,蛇葡萄素以 3个剂量腹腔给药。观察肿瘤体积、相对肿瘤体积、瘤重、相对肿瘤增殖率以及肿瘤生长曲线 ,以此评价蛇葡萄素的抗瘤作用。结果 :2 5 0mg/kg蛇葡萄素对裸鼠移植瘤的抑制率 ,二次实验结果分别为 35 5 % (P <0 0 1)和 37 1% (P<0 0 1) ,相对肿瘤增殖率则分别为 5 5 2 4 % (P <0 0 1)和 5 7 71% (P <0 0 5 )。结论 :蛇葡萄素对人肺癌GLC 82裸鼠移植瘤具有显著的抑制作用。

旺长期烤烟叶片的叶绿素荧光特性与激发能分配

以烤烟品种龙江911为试验材料,研究了烤烟植株上、中、下3个部位叶片实际光化学效率(ΦPSⅡ)和PSⅡ最大光能转化效率(Fv/Fm)的日变化,以及激发能的分配特性。结果表明,烤烟叶片Fv/Fm和实际光化学效率(ΦPSⅡ)中午降低,PSⅡ功能下调,有明显的光抑制。在光合有效辐射(PPFD)逐渐增强过程中,Fv/Fm和ΦPSⅡ降低,非光化学猝灭(NPQ)增加,激发能由PSⅠ向PSⅡ分配的比例增加,说明引起烤烟光抑制的原因除了NPQ之外,分配给PSⅡ能量增加是光抑制非常重要的因素。PPFD逐渐减小时,光抑制逐渐减缓,光化学效率恢复,激发能分配不平衡性系数(β/α-1)下降,PSⅡ能量负荷减轻,失活的PSⅡ恢复活性。

蛇葡萄素的血管生成抑制作用

目的：探讨蛇葡萄素对内皮细胞及肿瘤细胞的生长及其血管生成的影响。方法：体外用MTT法对牛主动脉内皮细胞进行增殖抑制实验；用ELISA法、免疫组化染色法以及流式细胞仪观察蛇葡萄素对人肝璃细胞Bel-7402分泌VEGF、bFGF的抑制作用；体内观察蛇葡萄素对人肝癌Bel-7402裸鼠移植瘤的抑制作用。结果：蛇葡萄素对牛主动脉内皮细胞的增殖在6．4～51．2μg/ml呈现浓度依赖性抑制作用，IC50=22.0±4.0μg/ml。ELISA法测定结果显示，12．8μg/ml、25.6μg/ml、38．4μg/ml蛇葡萄素对肝癌Bel-7402细胞分泌VEGF的抑制率分别为14.2％、40．0％及49．6％。免疫组化染色结果显示，12．8μg/ml以卜的蛇葡葡素能使细胞体积缩小，分泌VEGF、hFGF明显减少。流式细胞仪检测VEGF、hFGF结果，25．6μg/ml及38．4μg/ml蛇葡萄索对VGEF的抑制率分别为32．2％及57.4％，对bFGF的抑制率分别为54．9％及62．6％。蛇葡葡素浓度为100、150、200mg／kg时对人肝痛Bel-7402裸鼠移植瘤的抑制率分别可达24．3％、41．4％及45．7％。结论：蛇葡萄素在体外能有效抑制内皮细胞增殖投人肝癌Bel-7402细胞分泌VEGF和bFGF，具有抑制血管牛成的作用；体内能有效抑制人肝癌Bel-7402裸鼠移植瘤的生长，提示蛇葡萄素也许可作为一个肿瘤血管牛成抑制剂用于肿瘤防治。

人参皂苷Rd固体脂质纳米粒的体外释放和大鼠的在体吸收

目的研究人参皂苷Rd固体脂质纳米粒(Rd-SLN)的体外释药特性、在大鼠肠道的吸收和体内药物动力学行为。方法采用透析法测定Rd-SLN体外释药速率;通过大鼠在体分段肠回流实验,研究Rd-SLN的肠道吸收行为;建立血浆样品中人参皂苷Rd的HPLC分析方法,在大鼠灌胃给药后测定不同时间的血药浓度,观察Rd-SLN在体内的吸收和药动学特征。结果Rd-SLN具有缓释特征。在十二指肠和空肠段,Rd-SLN与人参皂苷Rd对照溶液的吸收率差异没有显著性;在回肠和结肠段,Rd-SLN与对照溶液的吸收率差异有显著性。Rd-SLN在回肠段的吸收率高于其它肠段。与对照组相比,Rd-SLN组的血药浓度水平维持时间更长,其Cmax、MRT、AUMC和AUC均明显增加。结论Rd-SLN具有一定的缓释作用,其在回肠的吸收优于其他肠段,并且能明显提高人参皂苷Rd的生物利用度。

人参皂苷RdC_(12)差向异构体的合成及其对大鼠主动脉环收缩反应的影响

目的 探讨人参皂苷RdC12 手性碳构型改变与其药理活性的关系。方法 制备RdC12 位差向异构体 (12 epi Rd) ;观察比较 12 epi Rd与Rd对苯肾上腺素 (phenyle phrine ,Phe)收缩大鼠离体主动脉环作用的影响。结果 首次成功制备了 12 epi Rd ;Rd(40、80 μmol·L-1)与 12 epi Rd(40、80 μmol·L-1)均可浓度依赖性抑制Phe收缩血管环的最大效应 ,其拮抗指数 pD2 ′分别为 :4 0 8± 0 15和 4 0 7±0 16 ,二者差异无显著性 (P >0 0 5 )。结论 人参皂苷RdC12

黄酮类化合物诱导肿瘤细胞凋亡的研究进展

黄酮类化合物是存在于自然界的一大类化合物。研究发现它们有强大的抗肿瘤作用 ,并提出多种抗肿瘤机制 ,其中诱导肿瘤细胞凋亡是目前的研究热点之一。本文就黄酮类化合物诱导肿瘤细胞凋亡作用的研究进展进行综述。

蛇葡萄素脂质体的制备研究

目的:优选蛇葡萄素脂质体的处方和制备工艺,并评价其质量。方法:采用薄膜-超声法制备蛇葡萄素脂质体及冻干粉,以包封率、表面形态和粒径为检测指标,利用均匀试验法优选出制备蛇葡萄素脂质体的最佳工艺条件。用显微镜法观察其形态,粒度测定仪测量粒径和表面电荷。采用透析法测定包封率和渗漏率,紫外分光光度法测定蛇葡萄素含量。结果:脂质体呈典型单室,近球型,大小相近,分散均匀,平均粒径为(258.2±51.2)nm,表面电荷19.0 mV。包封率达到62.3%,磷脂氧化指数为0.83%。结论:该脂质体处方和制备工艺稳定可行。