乌司他丁抑制脓毒症患者血清诱导的血管内皮细胞高通透性

目的观察乌司他丁(UTI)对脓毒症休克患者血清诱导的人脐静脉血管内皮细胞高通透性的影响。方法 ELISA检测5例健康志愿者和5例脓毒症休克患者血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平;分别以(10、100、1000)U/mL UTI、300μL脓毒症休克患者血清、22 ng/mL TNF-α作用于体外培养的EA.hy926人脐静脉内皮细胞,采用Transwell^(TM)法检测细胞通透性;跨上皮细胞电阻法(EVOM)检测单层细胞电阻;免疫荧光细胞化学染色法检测细胞纤维型肌动蛋白(F-actin)形态及分布情况。结果与健康志愿者相比,脓毒症患者血清中TNF-α含量明显增高;脓毒症血清作用于EA.hy926单层细胞后,细胞电阻值明显降低,细胞通透性显著升高,F-actin重新分布,细胞内应力纤维增多,而UTI可改善EA.hy926细胞的上述变化。结论 UTI能够抑制脓毒症血清引起的EA.hy926细胞通透性增加,且呈现一定的剂量依赖性。

嗜铬粒蛋白A衍生多肽CHR抑制LPS诱导的永生化脑微血管内皮细胞高通透性

目的探讨嗜铬粒蛋白A衍生多肽CHR(chromofungin)对LPS所诱导的永生化人脑微血管内皮细胞高通透性的影响。方法分别用LPS、CHR、CGA4-16作用于人脑微血管内皮细胞(human brain microvascular endothelial cells,HBMEC),用CCK8法检测不同浓度LPS刺激HBMEC细胞活力变化;EVOM法及Transwell小室法检测内皮细胞相对通透性;Western blot及RT-PCR法检测紧密连接蛋白(ZO-1和Claudin-5)的表达情况。结果与空白组相比,随着LPS浓度增加,HBMEC细胞的活性受到显著抑制(P<0.05)。随着LPS作用时间延长,其细胞内紧密连接蛋白ZO-1、Claudin-5的表达逐渐下调,6 h后蛋白表达量降到最低(P<0.05),12 h和24 h后其蛋白表达与6 h相比无明显差异。LPS作用下HBMEC单层细胞电阻值明显降低(t=-18.214,P<0.001),细胞通透性显著升高(t=6.083,P=0.004),ZO-1、Claudin-5的蛋白和mRNA表达明显下调(P<0.05),而CHR可显著改善上述变化。结论嗜铬粒蛋白A衍生多肽CHR能通过上调紧密连接相关蛋白的表达从而改善LPS所致的脑微血管内皮细胞高通透性。

多肽bCAT通过下调白念珠菌HWP1基因表达抑制生物被膜的形成机制

目的明确多肽bCAT抑制白念珠菌生物被膜形成能力,并探索其与黏附基因HWP1表达的关系。方法标准菌株白念珠菌ATCC10231和临床菌株作为研究对象,XTT法检测其生物被膜形成能力,bCAT抗浮游白念珠菌的MIC值以CLSI-M27-A3方法确定,XTT法及菌落计数检测bCAT抑制生物被膜形成作用,并计算代谢活性确定抑制50%生物被膜形成的MIC(BIC_(50)),bCAT减少白念珠菌的黏附作用经倒置显微镜下观察及菌落计数法检测,并采用RT-PCR通过2^(-ΔΔCt)法计算HWP1的表达量。统计方法为单因素方差分析,组内比较采用Dunnett T3检验。结果标准菌株及临床菌株均有较强生物被膜形成能力。bCAT抗浮游状态的白念珠菌MIC值为40~80μmol/L,BIC_(50)为80~160μmol/L;并且bCAT能减少白念珠菌的黏附作用,空白对照组菌落计数为(27 822.22±2 472.74)cfu,bCAT浓度为160、80、40、20、10μmol/L时的菌落个数分别为(5 355.55±1 264.03)cfu、(11 377.78±2 232.58)cfu、(17 488.89±1 136.27)cfu、(22 377.78±3 521.99)cfu、(26 044.44±1 329.57)cfu。组间差异具有统计学意义(F=147.018,P=0.001),组内比较发现160、80、40μmol/L处理组与不含bCAT时差异具有统计学意义(P<0.05)。RT-PCR发现160μmol/L处理组HWP1相对表达量为空白对照组的12.24%。结论 bCAT能有效抑制白念珠菌生物被膜形成,其机制可能与降低HWP1基因的表达从而减少白念珠菌的黏附有关。具有一定的临床前景。

中高海拔地区AECOPD肺功能及定量CT研究进展

慢阻肺是一种全球发病率和死亡率较高的疾病,其急性加重直接影响患者的生活质量。尽管近年来对于慢阻肺急性加重的研究已经取得了一定进展,但在中高原地区的相关研究仍然相对缺乏。因此,本文旨在对于最新的肺功能及定量CT诊断技术在慢阻肺急性加重中的应用进行综述,意在为相关地区对于慢阻肺急性加重患者的诊断及预后提供借鉴。

浅析化工工厂电能质量优化方案

化工工厂电能的质量直接关系到整个化工工厂生产的安全和效率,化工工厂由于电能质量的问题常常导致化工工厂生产过程中造成一系列事故的现象,不仅给化工工厂的生产和安全带来了很大的影响,极大的威胁到了人民的生命财产安全,而且给我国的经济发展造成了巨大经济损失,阻碍了社会的发展。本文就化工工厂电能质量的问题和现状进行分析和探讨,并为提高化工工厂电能的质量提出一些可供参考的意见和措施,并制定一个化工工厂电能质量优化方案。

CHR抑制白假丝酵母菌生物被膜形成作用及机制探讨

目的：CGA47-66（chromofungin,CHR）是嗜铬粒蛋白A（chromograinin A,CGA）水解形成的生物活性多肽,已有研究证实其具有免疫调节和抗菌作用,本研究旨在进一步证实CHR抗白假丝酵母菌生物被膜形成的作用,探讨其作用机制。方法：根据CLSI-M27-A3参考方法检测CHR对浮游状态下白假丝酵母菌的最低抑菌浓度,菌落计数法及XTT比色法验证CHR是否具有抑制生物被膜形成的作用,并确定CHR对白假丝酵母菌的BIC50,通过菌落计数法和倒置显微镜证实CHR抗真菌粘附作用,并使用q RT-PCR检测粘附基因Hwp1的表达情况从而进一步验证其作用的分子机制。结果：CHR对浮游状态白假丝酵母菌的MIC值为10～20μmol/L,并证实CHR具有抗白假丝酵母菌生物被膜形成作用,BIC50值为80～160μmol/L,且具有浓度依赖性;q RT-PCR检测CHR下调C.albicans Hwp1基因的表达,160μmol/L CHR处理组相对Hwp1基因表达量通过2-△△Ct值计算为（0.089 5±0.036 0）,无处理组Hwp1基因的表达是CHR组的11.17倍,差异具有统计学意义（t=44.008,P=0.001）。结论：CHR具有抑制白假丝酵母菌生物被膜形成的作用,其机制可能与CHR减少白假丝酵母菌细胞的粘附有关。本研究为CHR在抗真菌材料方面的应用提供了理论基础。

鸡油组织中的磷脂对鸡油挥发性风味化合物形成的影响

磷脂是肉类特征性风味的重要前体物质。鸡油具有浓郁的脂香和鸡汤香气,磷脂可能对其风味有重要作用。该研究采用去除鸡油组织中的磷脂,以及在鸡油中添加磷脂等处理方法,结合顶空固相微萃取-气相色谱-质谱联用技术和感官评价方法研究经不同处理鸡油中的挥发性风味物质相对含量和风味的变化。结果表明添加了磷脂的鸡油,其特征性风味成分显著增加,特别是(E,E)-2,4-癸二烯醛和1-辛烯-3-酮分别增加了4.5倍和10.4倍;而去除磷脂鸡油的挥发性风味物质种类和丰度显著减少;感官评价结果也表明添加磷脂鸡油的风味最浓郁,而去除磷脂鸡油的风味最弱。因此,该研究证明鸡油组织中的磷脂对鸡油的风味具有重要的贡献作用,添加磷脂可显著增加鸡油的香气。该研究结果为浓香鸡油的开发提供理论依据和参考工艺。

高容量血液滤过治疗对重症感染性休克合并肾功能障碍患者循环水平及免疫功能的影响

目的分析高容量血液滤过(HVHF)治疗对重症感染性休克合并肾功能障碍患者循环水平及免疫功能的影响。方法将2017年2月-2019年2月成都市第二人民医院重症监护室住院的116例重症感染性休克合并肾功能障碍患者,随机数字表法分为分照组(57例)和观察组(59例),对照组采用液体复苏常规治疗,观察组在液体复苏6 h内再实施HVHF治疗。观察两组患者治疗后的临床疗效,循环水平和免疫功能。结果治疗前两组全身多器官功能障碍(multiple organdysfunction,MODS)评分、急性生理与慢性健康(APACHEⅡ)评分、尿量、血尿素氮(BUN)含量、血清血肌酐(Scr)水平、血清钾(K^+)、肿瘤坏死因子(TNF-α)水平、C反应蛋白(CRP)水平、降钙素原(PCT)水平、血压调整性心率(PAR)值、动脉血氧分压(PaO2)值、氧合指数(PaO2/FiO2)值、二氧化碳结合能力(CO2CP)值及免疫功能CD3^+、CD4^+、CD8^+和CD4^+/CD8^+差异均无统计学意义(P>0.05);治疗后观察组MODS评分、APACHEⅡ评分、BUN含量、Scr水平、血清K^+、TNF-α水平、CRP水平、PCT水平明显低于对照组,且差异有统计学意义(P<0.05);PAR值、PaO2值、PaO2/FiO2值、CO2CP值和CD3^+、CD4^+、CD4^+/CD8^+均明显高于对照组,且差异有统计学意义(P<0.05)。结论HVHF治疗重症感染性休克合并肾功能障碍患者比单纯液体复苏治疗临床疗效更好,HVHF可保护重症感染性休克合并肾功能障碍患者的肾功能,改善血流动力学和增强免疫功能的作用。

NMR和GC-MS研究加热对奶油主要成分及香气化合物的影响

为深入了解加热过程中奶油主要成分和香气成分的变化机理,对加热前后奶油进行分析。利用核磁共振(nuclear magnetic resonance,NMR)技术分别对奶油中的极性组分和非极性组分进行定量分析,同时利用气相色谱-质谱(gas chromatography-mass spectrometry,GC-MS)联用技术对加热前后奶油中的关键香气化合物进行鉴定。NMR分析表明,奶油中的极性组分主要为乳糖以及少量的游离氨基酸、游离脂肪酸和有机酸,非极性组分主要为甘油三酯以及少量的双甘酯和单甘酯。经加热后,极性组分含量大量减少,主要为乳糖和游离氨基酸,而非极性组分含量减少相对较小;GC-MS分析表明,短链脂肪酸和醛类含量增加相对较少,甲基酮、内酯和美拉德反应产物含量增加显著,其中甲硫基丙醛、麦芽酚和呋喃酮仅在加热后奶油中检出。结果表明加热过程中美拉德反应产物的形成和脂质来源化合物的增加分别造成了奶油中极性组分和脂肪酸的减少。该研究结果为奶油风味及产品研究提供了思路。

乌司他丁抑制肿瘤坏死因子-α诱导血管内皮细胞高通透性的机制研究

目的探讨乌司他丁(UTI)对肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导的血管内皮细胞通透性增高的影响及其主要分子机制。方法离体培养人脐静脉内皮细胞系EA.hy926,分别以UTI和TNF-α作用于EA.hy926,小室法测单层细胞通透性,免疫荧光法测磷酸化肌球蛋白磷酸酶靶向亚基1(p-MYPT1)的表达;分别采用免疫细胞化学法、Western Blot法测与通透性相关的关键分子(RhoA、ROCK2、MYPT1、p-MYPT1及VE-cadherin)表达的变化情况。结果 TNF-α作用下EA.hy926单层细胞通透性增加,细胞内p-MYPT1的表达量较正常对照组明显增加,而UTI可改善EA.hy926细胞的上述变化情况;免疫细胞化学结果显示,与正常对照组比较,TNF-α作用下RhoA、ROCK2的表达明显增加,而UTI可抑制RhoA、ROCK2的高表达;Western Blot结果显示,与正常对照组比较,TNF-α作用下p-MYPT1、RhoA和ROCK2的表达明显增加,VE-cadherin的表达明显降低(均P<0.05),而UTI可抑制p-MYPT1、RhoA和ROCK2蛋白的高表达,增加VE-cadherin的表达。结论 UTI可能通过Rho/ROCK信号通路抑制TNF-α引起的EA.hy926细胞通透性增加。

肺尘埃沉着的影像学及支气管镜表现分析

炭末沉着(anthracosis)是由长期接触煤炭、烟尘等非生产性粉尘后在支气管黏膜及黏膜下层存在黑色色素沉积的一种临床表现。以往认为与煤尘环境暴露有关,但随着支气管镜技术的广泛发展,发现无特殊职业、环境接触及接触史的炭末沉着患者越来越多炭末沉积的临床表现是非特异性的,胸部CT无尘肺特征性改变[1]。支气管镜检查黏膜炭末端沉积在本病的诊断中起决定性作用[2]。本文收集我院2020年6月至2021年8月住院行支气管镜检查的炭末沉着患者15例,分析支气管镜检查结果与临床资料,报道如下。

乌司他丁对炎症状态下血管内皮屏障功能的影响及机制

目的阐明乌司他丁(UTI)对炎症状态下血管内皮屏障功能的影响及具体分子机制。方法以人脐静脉内皮细胞系EA.hy926为研究对象,建立炎症细胞模型及RhoA过表达细胞模型,分别用UTI和TNF-α处理细胞,采用Transwell法、TEER法检测细胞通透性;Western Blot法及RT-PCR法检测Rho/ROCK信号通路相关关键分子(RhoA、ROCK2、MYPT1、p-MYPT1及VEcadherin)的表达变化情况。结果与正常对照组相比,TNF-α作用后EA.hy926细胞电阻值明显降低,细胞通透性显著升高,差异具有统计学意义[(33.67±4.04)Ω/cm2 vs(67.17±3.81)Ω/cm2,t=10.435,P<0.01],细胞内RhoA、ROCK2、p-MYPT1的表达量明显增加,差异具有统计学意义(均P<0.05),VE-cadherin的表达量明显降低,差异具有统计学意义(P<0.05),而UTI可逆转上述变化情况;与UTI处理组相比,RhoA过表达细胞模型中RhoA、ROCK2及p-MYPT1的表达显著增高,VE-cadherin表达降低,细胞通透性增加,差异具有统计学意义(均P<0.05),而空载病毒组中上述分子的表达水平以及细胞通透性无明显变化,差异无统计学意义(均P>0.05)。结论UTI能通过Rho/ROCK信号通路抑制TNF-α引起的血管内皮细胞通透性增加,改善血管内皮屏障功能障碍。