156例涂片诊断再生障碍性贫血患者的骨髓活检分析

目的探讨再生障碍性贫血（AA）的诊断方法及发病机制。方法应用骨髓塑料包埋病理检查。结果 156例中125例患者切片内造血组织比例小于20%,16例患者切片内造血组织所占比例为25%-50%,7例患者切片内造血组织比例小于25%,但残余造血组织内造血细胞生长旺盛,3例患者切片内造血组织/脂肪组织小于20%的同时检出粒系不成熟前体细胞异常定位（ALIP）现象,5例患者切片内造血组织减少,脂肪组织增多不明显,造血组织内造血细胞减少,剩余空间均被成熟红细胞充斥。结论大多数患者切片内造血组织与脂肪组织比例下降明显,呈典型的AA骨髓活组织像;少部分介于骨髓活检诊断AA的临界值,需要对造血细胞增生度及巨核细胞数量联合判断。

荧光原位杂交技术在判断异基因造血干细胞移植预后中的应用

目的 研究荧光原位杂交（FISH）技术在判断异基因造血干细胞移植（allo-HSCT）预后中的意义.方法 收集异基因外周血干细胞移植、骨髓移植、脐血移植及多种干细胞联合移植标本63例,收集条件为融合基因（BCR/ABL、AML1/ETO）阳性表达,供受者性别不同或同时满足以上2项条件者,分为同性别间干细胞移植和不同性别间干细胞移植两组：同性别间干细胞移植者20例,应用相应的基因探针进行检测;不同性别间干细胞移植者应用相应的基因探针及XY染色体探针联合检测.结果 43例异性allo-HSCT的受者中,25例供、受者骨髓嵌合率在99%以上;13例早期嵌合率偏低（82%~98%）,在随访过程中逐渐上升至99%以上,微量残留病灶（MRD）阴性,移植后原病均未复发;3例嵌合率由99%~100%逐渐下降,MRD比例上升,出现血液学复发.20例供、受者性别相同的allo-HSCT受者中,15例移植后未检测到原来的异常基因;2例检测到微量残留病灶,经免疫抑制剂减量、供者淋巴细胞输注等治疗后降为1%,目前仍在完全缓解中;3例在移植后1~4个月时出现原来的基因异常,复查骨髓为原病复发.结论 FISH技术简便、快速、准确性高、特异性强,对异基因干细胞移植预后判断具有重要意义.

急性混合细胞白血病诊断及疗效的临床研究

目的探索急性混合细胞白血病(acute mixed lineage leukemia,AMLL)的临床和实验室特征以及疗效和预后。方法根据骨髓细胞形态学、化学染色和免疫表型结果诊断AMLL,评价疗效及影响疗效的有关因素。结果AMLL可有发热、贫血、淋巴结肿大、肝脾肿大等临床表现。半数患者属高白细胞白血病。所有患者骨髓增生明显活跃,原始+幼稚细胞占0.86(0.79～0.96)。8例患者免疫表型均为B-Ly/My+。兼顾粒、淋二系的方案诱导化疗的7例AMLL中,6例首次完全缓解(CR1),1例发生诱导化疗有关死亡,完全缓解后坚持巩固强化治疗的3例患者,已平均无病生存7(5～9)个月。结论AMLL属特殊类型的白血病,其诊断有赖于对细胞形态学、化学染色和免疫分型的综合判断。对AMLL的治疗应予兼顾粒、淋二系的诱导和巩固化疗方案,缓解率较高,但长期疗效的评价还有待进一步观察。

联合骨髓涂片和骨髓活检诊断非霍奇金淋巴瘤骨髓侵犯

目的探讨骨髓涂片和骨髓活检在非霍奇金淋巴瘤(NHL)骨髓浸润诊断中的价值。方法 NHL患者同时做骨髓涂片和骨髓活检。骨髓涂片经瑞氏染色,分类计数肿瘤细胞;骨髓切片采用塑料包埋法,制作组织切片,常规HGF染色。结果 62例NHL患者经骨髓涂片和骨髓活检联合检测,确诊为NHL细胞骨髓侵犯,其中49例(79.0%)骨髓涂片检出NHL细胞,59例(95.2%)骨髓活检检出肿瘤细胞浸润灶,骨髓活检阳性率略高于骨髓涂片,但差异无统计学意义(P>0.05)。NHL细胞形态分为4种类型:小细胞成熟型、大细胞幼稚型、大细胞原始型和组织细胞型。13例骨髓涂片检查阴性而骨髓活检阳性的病例中,10例是小细胞成熟型(76.9%);9例为骨髓淋巴瘤细胞轻度侵犯(69.2%),3例为重度侵犯合并骨髓纤维化(23.1%)。结论骨髓涂片和骨髓活检都是诊断NHL骨髓侵犯的重要手段,两者各有优势,联合应用可以提高诊断阳性率。骨髓活检在淋巴瘤细胞轻度骨髓侵犯或合并骨髓纤维化,以及浸润瘤细胞为小细胞成熟型时,更能准确地提供诊断依据。

单倍相合异基因外周血联合骨髓造血干细胞移植的干细胞采集及移植效果评价

目的采集单倍相合异基因供者外周血和骨髓中的造血干细胞,分析不同采集方式的差异,并进行移植后的效果评价。方法单倍相合异基因造血干细胞移植的受者为2006年6月-2008年12月在第三军医大学新桥医院血液科就诊的56例白血病患者,健康供者为患者的父母或兄弟姐妹。在供者皮下注射重组人粒细胞集落刺激因子进行造血干细胞动员,当外周血单个核细胞(MNC)>4.0×109/L时用血细胞分离机采集外周血中的造血干细胞,采集后1h内输给受者。56例供者根据骨髓造血干细胞的采集方法不同分为3组:第1组(n=5)采用注射器针头半密闭式过滤法,第2组(n=6)采用Thomas不锈钢开放式过滤法,第3组(n=45)采用本课题组的改进方法(用过滤输血器替换注射器针头及不锈钢网)。如若供、受者ABO血型不合,则对采集后的骨髓液进行处理:主侧不合用羟乙基淀粉沉降法去除红细胞,次侧不合采用低温低速离心去除血浆。骨髓液干细胞采集后4h内输给受者。结果56例供者外周血采集量的中位值为56ml,MNC中位值5.15×108/kg,CD34+细胞中位值5.80×106/kg;骨髓液采集量中位值950ml,有核细胞(NC)中位值10.31×108/kg,CD34+细胞中位值11.33×106/kg;外周血和骨髓采集的CD34+细胞总数中位值为13.42×106/kg。3种骨髓干细胞采集方法收集的有核细胞及CD34+细胞的质量无明显差异。供受者ABO血型匹配情况:15对ABO血型主侧不合,17对ABO血型次侧不合,均成功留取有效造血干细胞。移植后21d,2例受者死于颅内出血,余54例移植后30d成为完全供者型植入,且均成功造血重建。结论采用单倍相合异基因供者的外周血和骨髓造血干细胞进行移植,可使白血病患者达到有效的造血重建。采用过滤输血器收集供者骨髓干细胞的方法安全、可行,经此法采集的骨髓有核细胞及CD34+细胞的质量与传统方法无明显差异。

AML1/ETO+融合基因阳性的AML患者骨髓细胞形态学分析

目的探讨AML1/ETO[t(8;21)(q22;q22)]融合基因阳性的急性髓细胞白血病(AML)的骨髓细胞形态学特点。方法对66例AML(M1,M2a,M2b,M5,MDS-RAEB-Ⅱ)骨髓片用瑞氏染液染色后,按照国内AML分型标准进行观察分析;进行荧光原位杂交技术(FISH)检测AML1/ETO融合基因。结果 M2a52例,M2b8例,M52例,M12例,MDS-RAEB-Ⅱ2例,AML1/ETO融合基因阳性为34.84%,其中(14/52)26.9%,(8/8)100%,(0/2)0%,(0/2)0%,(1/2)50%。回顾分析AML1/ETO阳性病例骨髓涂片,都检测到多少不一的异形中幼粒细胞。AML1/ETO阳性病例在治疗过程中首次化疗完全缓解(CR)率为78.4%(9例M2a、8例M2b及1例RAEB-Ⅱ),4例M2a2次化疗后达到CR,1例M2a5次化疗仍为NR。结论 AML-M2b都有AML1/ETO融合基因改变,AML1/ETO融合基因阳性AML在骨髓涂片中能检测到异形中幼粒细胞。

氢溴酸东莨菪碱口崩片的制备

目的探讨氢溴酸东莨菪碱(scopolamine hydrobromide,SH)口崩片制备工艺,优化口崩片处方。方法将湿法制粒与直接压片法进行比较,选择合适的制备方法 ;以硬度、崩解时间和溶出度为指标,采用正交设计综合评分法优化SH口崩片的处方和制备工艺,并进行优化后验证实验。结果确定以湿法制粒法制备SH口崩片;优化处方为甘露醇40%,微晶纤维素35%,乳糖0,羧甲基淀粉钠10%。以此处方制备SH口崩片的硬度为3.8kg,崩解时间为54s,溶出度T50在2.5min以内。结论该口崩片处方合理,质量可控。

骨髓切片组织病理检查在血液病诊断中的临床应用

目的研究骨髓切片组织病理检查对血液病的诊断价值。方法采用骨髓活组织病理学、骨髓涂片细胞形态学检测方法。结果300例血液病患者中骨髓细胞形态学检查与骨髓活检结果完全吻合者215例(占71.67%),骨髓形态学不能肯定诊断而经骨髓活检结果确诊的病例30例(占10%),骨髓细胞形态学检查与骨髓活检结果不相吻合的有55例(占18.33%)。结论骨髓活检病理诊断是对骨髓形态学检查的补充和修正,二者合用能提高血液病诊断的正确率。在MDS、AA、MF的诊断上,骨髓活检病理检查具有决定性的意义,对转移性肿瘤和急性髓细胞白血病是否合并骨髓纤维化的诊断也具有特殊价值。

流式细胞术在首诊非霍奇金淋巴瘤骨髓侵犯中的作用

目的探讨流式细胞术(FCM)在诊断非霍奇金淋巴瘤(NHL)骨髓浸润中的价值。方法采用骨髓涂片和切片联合FCM检测NHL骨髓侵犯。骨髓涂片经瑞氏-吉姆萨液染色,分类计数瘤细胞。骨髓切片采用塑料包埋法制作组织切片,常规苏木精-姬姆萨-酸性品红(HGF)染色。流式细胞仪每份标本分析10 000个细胞。检测方案采用CD45/侧向散射角(SSC)设门,重点分析幼稚细胞群及成熟淋巴细胞群,经前向散射角(FSC)、SSC、异硫氰酸荧光素(FITC)标记的单克隆抗体(McAb1-FITC)、藻红蛋白(PE)标记的单克隆抗体(McAb2-PE)、CD45-Percp五参数分析确定免疫表型。结果 17例骨髓首诊病例中,骨髓穿刺(BMA)确诊12例(70.6%),骨髓活检(BMB)确诊15例(88.2%),FCM确诊17例(100%),FCM确诊率最高,较BMA差异有统计学意义(P<0.05),较BMB差异无统计学意义(P>0.05)。BMB检查发现NHL骨髓浸润方式间质型、结节型和弥漫型均易见,分别占23.5%,23.5%和52.9%。FCM检测结果为B细胞淋巴瘤13例(76.5%)、T细胞淋巴瘤和NK/T细胞淋巴瘤4例(23.5%)。结论骨髓涂片和骨髓切片检查是诊断NHL-BMI的基本方法,可以做出定性诊断。FCM可进一步做出明确的病理诊断。对于骨髓检查首诊NHL-BMI的病例,3种技术的联合应用可以提高NHL-BMI的诊断正确性和阳性率。

急性髓系白血病伴骨髓增殖异常相关改变的形态学及染色体核型研究

目的研究急性髓系白血病伴骨髓增殖异常相关改变(AML-MRC)的遗传学及形态学改变,以提高检出率。方法通过对281例急性髓系白血病(AML)初诊患者回顾性研究,其中分别有60例AML-M2,68例AML-M4,54例AML-M5,51例AML-M6及48例AML-MRC。对各组的原始细胞数(原始细胞/原始粒细胞+原始幼稚单核细胞)、有核红细胞数、每个类型病态造血的细胞个数及染色体核型,进行统计学分析。结果原始细胞数比较:M2(99.70±36.11),M4(110.26±40.23),M5(159.77±29.22),M6(35.05±19.70),MRC(59.39±17.94),方差分析差异有统计学意义(F=121.456,P<0.05);MRC组与其他各组比较,M6原始细胞数<MRC组<AML-M2,4,5组(P均<0.05);有核红细胞数比较:M2(16.66±17.17),M4(14.15±14.64),M5(9.09±10.62),M6(126.31±27.75),MRC(47.43±21.21),方差分析结果差异有统计学意义(F=309.407,P<0.05),MRC与其他各组比较,M2/4/5组有核红细胞数<MRC组<M6组(P均<0.05)。各系病态造血:其中,粒系的假性佩许氏畸形、环状核等,红系的多/奇数核、母子核等,巨核系的小巨核、多核或单核圆核巨核细胞等,各组出现的个数比较,MRC组远高于其他组[(P<0.05)且异常细胞大于60%];另外,粒系的空泡、核溶解等,红系的核分裂相、芽孢等及巨核系的巨大巨核细胞、核断裂等比较,MRC组与其他组出现频率差异无统计学意义[(P>0.05)且均低于20%]。染色体核型分析:AML-MRC核型异常58.8%(20/34),包括MDS相关改变核型14例,及其他复杂核型6例。结论染色体核型异常的MRC仅58.8%;AML-MRC的形态学特征:原始细胞轻度增高,但较其他组增多并不明显,红系不受抑;各系病态造血现象:病态造血现象中前部分为异常特征性改变,主要见于AML-MRC及MDS,对AML-MRC具有诊断意义;后部分为非特征性改变,可见于各类疾病,包括感染、巨幼细胞贫血、白血病等。通过以上特征,可以更好的鉴别AML-MRC与其他各亚型。

应用蛋白质芯片检测白血病细胞株耐药相关蛋白的表达

目的利用低密度蛋白质芯片检测白血病细胞株耐药相关蛋白的表达。方法选择与白血病耐药密切相关的11种蛋白为检测指标,制备低密度蛋白质芯片,对人白血病细胞株HL-60、K562、Jurkat及耐药细胞株HL-60/VCR、K562/ADM、人Burkitt淋巴瘤Raji细胞株细胞裂解物进行检测。结果髓系白血病耐药细胞株P-糖蛋白(P-gp)、肺耐药蛋白/主要穹窿蛋白(LRP/MVP)、谷胱甘肽-硫-转移酶-π(GST-π)、血管内皮细胞生长因子(VEGF)、黏附分子淋巴细胞功能相关抗原-1(LFA-1)表达高于非耐药细胞株,而淋巴系白血病细胞株P-糖蛋白及趋化因子受体CXCR4均有高表达。结论检测白血病耐药相关蛋白的蛋白质芯片可发现不同的白血病细胞株的耐药相关蛋白表达的差异,联合检测多种耐药相关蛋白有助于更好的研究白血病的耐药机制。

BCR-ABL融合基因阳性的急性混合细胞白血病2例并文献复习

目的探讨BCR-ABL融合基因阳性的急性混合细胞白血病的特点及其可能原因。方法对2例BCR-ABL融合基因阳性的急性混合细胞白血病患者的临床资料、细胞形态学、流式细胞仪免疫分型结果及荧光原位杂交术进行分析,并结合文献进行复习。结果文献及本组病例共6例,6例患者均BCR-ABL融合基因阳性或t(9;22)(q34,q1l)即Ph染色体阳性;3例慢性粒细胞白血病急变为BCR-ABL融合基因阳性的急性混合细胞白血病,3例无慢性粒细胞白血病病史,初发诊断为BCR-ABL融合基因阳性的急性混合细胞白血病;4例双系列型,1例双表型,1例系列转换型。结论初发的BCR-ABL融合基因阳性的急性混合细胞白血病鲜有报道,部分病例由慢性粒细胞白血病急变而来。

儿童再生障碍性贫血转化急性淋巴细胞白血病并文献复习

目的 探讨儿童再生障碍性贫血转化为急性淋巴细胞白血病的特点及其可能原因.方法 对儿童再生障碍性贫血转化为急性淋巴细胞白血病的临床资料、细胞形态学、骨髓活检病理、流式细胞仪免疫分型结果进行分析,并结合文献进行复习.结果 19例儿童首发全血细胞减少,诊断为再生障碍性贫血;经过1～4周自然缓解或治疗后缓解;但间隔1~10个月发展为急性淋巴细胞白血病.结论 儿童再生障碍性贫血是急性淋巴细胞白血病前期表现;再生障碍性贫血转化为急性淋巴细胞白血病的临床资料及在疾病发展中多种技术联合诊断,有助于提高急性淋巴细胞白血病前期的诊断.

B淋巴细胞淋巴瘤的基因改变和相关发病机制

现有的造血理论认为,与髓系一样,淋系来源于淋巴干细胞,但是淋系的发育过程比髓系复杂,已知的淋系肿瘤也更多。WHO 2016分类包括的淋系肿瘤超过50种,B淋巴细胞（下文均简称为B细胞）和T淋巴细胞肿瘤的发病占了90%以上,在分类、临床特征和病理机制上T淋巴细胞肿瘤比B细胞肿瘤复杂,发病率相对较低,本文将重点阐述常见的慢性B淋巴细胞淋巴瘤的来源、基因改变和相关发病机制[1]。

骨髓活检塑料包埋在儿童低增生MDS-RC MD诊断中的意义

目的探讨骨髓活检塑料包埋法在儿童低增生MDS-RCMD临床诊断中的意义。方法应用骨髓活检塑料包埋技术,对长期未能确诊和有效治疗的全血细胞减少或两系减少患儿,进行骨髓病理学研究,并结合患儿的血象、骨髓细胞学以及临床疗效进行综合分析。结果通过应用骨髓活检塑料包埋技术,确诊了11例儿童低增生性MDS-RCMD,并及时进行了早期治疗。结论骨髓活检塑料包埋法是临床诊断儿童低增生MDS-RCMD非常重要的方法。

双克隆慢性淋巴细胞白血病1例报道并文献复习

慢性淋巴细胞白血病（CLL）是造血系统的一种小淋巴细胞惰性淋巴瘤,免疫表型主要为CD5~＋和CD23~＋。其临床特征表现为克隆性B淋巴细胞在外周血、淋巴结、骨髓和脾脏等淋巴组织大量积聚。根据世界卫生组织造血和淋巴组织肿瘤分类要求,CLL定义需要外周血至少存在高至5×10~9/L的单克隆B细胞群[1],并且3个月以上,以成熟小淋巴细胞为主,幼稚淋巴细胞小于55%。白血病细胞限制性表达κ或者λ,

单倍相合异基因骨髓移植前后骨髓像分析

目的观察单倍相合异基因骨髓移植前后骨髓像、造血能否重建。方法对22例患者造血干细胞移植前骨髓穿刺抽吸涂片镜检;骨髓移植成功出层流室首次骨髓穿刺抽吸涂片;每月定期复查骨髓穿刺抽吸涂片镜检。同时观察外周血涂片和骨髓涂片2张或2张以上。结果22例患者单倍相合异基因造血干细胞移植后骨髓像全部达到正常,完全缓解。移植成功随访,其中6例患者随访中骨髓细胞出现少许病态造血现象,2例出现纯红细胞性再生障碍性贫血(PRCA),余14例骨髓正常。结论单倍相合异基因骨髓移植能够使白血病和重型再障骨髓重建。造血重建恢复期可能继发骨髓增生异常综合症(MDS)和PRCA。

遗传性球形红细胞增多症长期误诊原因分析

目的探讨遗传性球形红细胞增多症误诊的原因,提高临床工作者对该病的认识。方法回顾性分析我科近3年确诊的遗传性球形红细胞增多症病例,并对长期误诊者的原因进行分析。结果有8例患者长期误诊为其他血液系统疾病,导致病情治疗的延误。结论正确掌握诊断要点、详细询问病史及熟练的骨髓细胞学观察可避免误诊。