血培养研究的进展

血培养研究的进展刘恭植（镇江医学院检验系，镇江２１２００１）关键词血培养，方法，原则，儿童，自动化血培养检测病原菌是诊断传染病的一个既古老又实用的方法。在国际上关于血培养的研究进展很快，无论在菌群分布的变化上、检测手段上均有新的进展。目前仍然是菌血症...

大鼠DCs单抗和雷公藤多甙对大鼠同种异体心肺联合移植排斥反应的影响

采用改良的大鼠同种异体心肺联合移植手术，研究了大鼠树突状细胞（ＤＣｓ）单克隆抗体单独和联合雷公藤多甙片对移植排斥反应的影响，并与生理盐水对照组、雷公藤多甙片（ＴⅡ）组进行比较。结果表明：大鼠ＤＣｓ单抗单独和联合ＴⅡ两治疗组间无明显区别，但两组大鼠移植心脏存活时间明显长于生理盐水组和ＴⅡ组（Ｐ＜００１）；而且病理切片显示以慢性排斥反应改变为主。而生理盐水对照组和ＴⅡ组皆表现为急性排斥反应。提示ＤＣ单抗在治疗移植排斥反应中有实用价值。

磁场对荷瘤小鼠免疫功能的影响

本文研究了低频交变磁场和稳恒磁场对荷瘤小鼠免疫功能的影响。实验结果表明，磁场强度为１５ｍＴ的５０Ｈｇ交变磁场和８０ｍＴ的稳恒磁场均能提高机体的免疫功能；对肿瘤组织的供血情况有明显抑制效果，且磁场使肿瘤组织内形成较丰富的间质纤维，使肿瘤细胞坏死明显增多。

树突状细胞对小鼠实验性自身免疫性甲状腺炎的作用

目的：研究树突状细胞（ＤＣ）对小鼠实验性自身免疫性甲状腺炎（ＥＡＴ）的作用。方法：体外检测ＴｇＡｂ、Ｔｇ刺激的淋巴细胞增殖能力、ＩＬ１、ＴＮＦ水平，并对甲状腺进行病理学检查。结果：ＤＣ注射组早期ＴｇＡｂ、Ｔｇ刺激的淋巴细胞增殖能力以及ＩＬ１的水平均显著高于ＤＣ不注射组，但ＴＮＦ水平在两者间无明显差异；经ＤＣ单抗处理组的上述指标均低于ＤＣ注射组；病理学检查表明ＤＣ注射组甲状腺局部病变较其它各组严重。结论：ＤＣ对小鼠ＥＡＴ具有明显促进作用。

50Hz正弦交变磁场对K_（562）和WZDs细胞生长的影响

本文报道了５０Ｈｚ正弦交变磁场对Ｋ＿５６２和ＷＺＤｓｔｅ胞生长的影响。实验采用不同强度的磁场对体外培养的Ｋ＿５６２和ＷｚＤｓ细胞悬液进行时间长短不一的间歇曝磁，通过细胞计数来判断磁场对这两类细胞的影响。实验结果显示，所选用的磁场对这两类细胞的生长具有不同程度的抑制效应，抑制的程度除与细胞种类有关外，还与磁场强度，暴磁时间等因素有关。

人外周血树突状细胞的分离与鉴定

应用细胞分层剂密度梯度离心辅以细胞贴壁和花环沉降法，分离和纯化人外周血树突状细胞。通过Ｅｔ花环形成细胞测定、荧光染色镜检和ＦＡＣＳ分析表明，分离的细胞纯度可达４０％～６０％，残留的其他细胞多为ＮＫ细胞、单核细胞和Ｔ细胞。ＦＡＣＳ分析还显示：所分离的细胞表面ＭＨＣⅡ类抗原的阳性率达９７．３４％；扫描电镜观察可见独特的细胞形态。将此类细胞加入体外淋巴细胞增殖反应体系则呈现明显促进作用。提示：分离的细胞形态与功能均与树突状细胞相符。

大鼠DC单抗应用于移植排斥反应的初步研究

应用ＷＺＤ＿（１－５）细胞株分泌的抗大鼠树突状细胞单克隆抗体作微量细胞毒性试验，考察其对大鼠树突状细胞（ｄｅｎｄｒｉｔｉｃｃｅｌｌＤＣ）的特异性杀伤作用；并采用ＷＺＤ＿１单克隆抗体连续给大鼠体内注射，然后作用同种异体皮肤移植后观察移植皮片的存活时间。结果表明ＷＺＤ＿（１－５）单抗对大鼠ＤＣ呈现较高的特异性杀伤活性，杀伤率在６９．３％～７５．３％，ＷＺＤ＿１单抗能有效地延长移植皮片的存活时间，平均存活时间为１６．６ｄ（对照组平均为４．６ｄ．ｐ＜０．００１）。

小儿急性白血病患者外周血T淋巴细胞亚群的研究

本文用单克隆抗体SACI-Ig花环法测定了小儿急性白血病及再生障碍性贫血患者外周血T淋巴细胞亚群的变化。结果显示,在急性淋巴细胞性白血病及再生障碍性贫血患儿OKT8^+细胞均明显高于正常,OKT4^+/OKT8^+比值显著降低,但在急性粒细胞性白血病患儿淋巴细胞亚群变化不明显。这提示,抑制性T细胞(OKT8^+)的增多可能与小儿急性淋巴细胞性白血病及再生障碍性贫血的发生或发展有关。

雷公藤与单抗应用对大鼠免疫功能影响的研究

体内应用雷公藤多甙（ＴⅡ），Ⅰａ单抗（２１－２）及树突状细胞单抗（ＷＺＤ３）分别处理ＳＤ大鼠（连续１０ｄ），以观察其对细胞和体液免疫功能的影响。结果表明：ＴⅡ灌胃和２１－２，ＷＤＺ３静脉注射各组，混合淋巴细胞增殖反应（ＭＬＲ）和对Ｃｏｎ－Ａ刺激的淋巴细胞增殖反应能力皆明显降低，与对照组相比Ｐ＜０．０５。此外ＴⅡ灌胃与ＷＤＺ３静脉注射联合应用显示较强的细胞免疫抑制作用，在ＭＬＲ中与ＴⅡ单独处理相比Ｐ＜０．０５，但与ＷＺＤ３单独应用相比无显著差异（Ｐ＞０．０５）。经定量溶血测定法（ＱＨＳ）检测各组溶血素水平亦呈现相似结果。

DC单抗调节供、受体大鼠免疫功能和抑制排斥反应的研究

目的 :研究体内应用大鼠DC单抗WZD3对大鼠免疫状态的影响 ,在此基础上应用DC单抗同时处理供、受体 ,进行同种异体心脏移植 ,研究单抗诱导供、受体间双向移植耐受可能机理 ,为联合应用单抗和耐受性DC诱导移植免疫耐受奠定基础。方法 :用不同剂量WZD3处理SD(受体 )和Wistar(供体 )大鼠 ,两周后观察单向、双向混合淋巴细胞培养结果和经ConA或LPS刺激脾细胞产生的细胞因子水平变化。选择合适WZD3剂量同时对供、受体大鼠体内注射 ,进行异体异位心肺联合移植 ,术后观察移植器官存活时间和器官排斥终点时受体脾细胞分泌细胞因子水平。结果 :高剂量 (8mg kg体重 )WZD3对大鼠单向、双向MLC以及脾细胞产生IL 2和TNF有明显抑制作用 ,且能明显延长移植心脏存活时间 ;中剂量 (4mg kg体重 )和低剂量 (2mg kg体重 )WZD3对上述指标有轻度或无抑制作用。结论 :采用高剂量WZD3能下调大鼠免疫功能 ;同时处理供、受体大鼠 ,能诱导供、受体间双向免疫耐受 ,明显延长移植器官存活时间 ,其机制可能与清除DC、下调Th1细胞功能有关。

雷公藤多甙与DC单抗对小鼠自身免疫性甲状腺炎作用的研究

在建立小鼠自身免疫性甲状腺炎（ＡＩＴ）的基础上，研究雷公藤多甙和树突状细胞（ＤＣ）单克隆抗体对诱导小鼠ＡＩＴ的影响。结果表明，经雷公藤多甙、ＤＣ单抗单独及联合应用后，与未用药组相比，血清中ＴｇＡｂ水平、Ｔｇ刺激的淋巴细胞增殖能力、脾淋巴细胞产生ＴＮＦ水平均显著降低（Ｐ＜０．０５），其中以联合应用组尤为明显，病理学检查亦与之相符。提示雷公藤多甙、ＤＣ单抗的应用对小鼠ＡＩＴ的发生具有抑制作用。

脂质血管生长因子对皮肤创伤愈合中表皮细胞增殖周期的影响

应用从兔大网膜抽提的脂质血管生长因子在浅Ⅱ度烫伤模型上观察了对表皮细胞增殖周期的影响。结果显示，脂质血管生长因子从d3开始能明显增加表皮细胞DNA的合成，维持到d5，d7后趋于正常。G2＋M期从d7开始明显增加，表明此时表皮细胞已进入细胞分裂期。

Dot-ELISA法检测家蚕核型多角体病毒蛋白组份方法的建立及应用

目的建立家蚕核型多角体病毒蛋白的 dot- EL ISA检测方法。方法免疫家兔制备抗蚕核型多角体病毒蛋白组份的多克隆抗体 ,并用 EL ISA间接法建立了检测方法。结果此法与人血清和兔血清无交叉反应 ,可检测微量多角体病毒蛋白 ,其灵敏度达 10 ng,且操作简便。

Adr型HBV全基因转基因小鼠DC和T细胞功能的研究

目的方法 :通过对分离Adr型HBV全基因转基因小鼠的脾脏淋巴细胞和树突状细胞 ,并研究其对ConA ,HBeAg ,ConA +HBeAg刺激的应答能力。结果 :发现HBV转基因小鼠对ConA的应答基本正常 ,但对HBeAg ,ConA +HBeAg的应答明显低于对照组 ,说明HBV转基因小鼠DC和T细胞对HBV存在特异性的免疫耐受。

OT致小鼠DTH模型及雷公藤多甙抑制效应的实验观察

以局部血管通透性的改变为指标，比较了旧结核菌素（ＯＴ）和牛血清白蛋白（ＢＳＡ）诱导小鼠迟发型超敏反应（ＤＴＨ）的作用，并以此为基础，在成模前给小鼠连续９～１５ｄ灌喂３０ｍｇ／ｋｇ的雷公藤多甙（ＴⅡ），以观察该药的抑制效应。结果表明，０．２５Ｕ的ＯＴ２次注射后能明显导致小鼠的ＤＴＨ；ＴⅡ应用后可有效地减轻第２次ＯＴ注射局部血管的通透性，降低ＤＴＨ的发生率。通过树突状细胞（ＤＣ）过继后对ＤＴＨ的影响、ＴⅡ对ＤＣ作用的研究及模型小鼠淋巴细胞增殖能力和血清ＴＮＦ、ＮＯ水平的检测，对ＤＴＨ的发生和ＴⅡ抑制ＤＴＨ的机制做了初步探讨。

人外周血树突状细胞递呈可溶性肿瘤抗原触发抗瘤免疫的体外研究

考察人外周血树突状细胞（ＤＣ）递呈可溶性肿瘤抗原激发抗瘤免疫作用。应用改良Ｓｔｅｉｎｍ ａｎ 法分离纯化人外周血ＤＣ，同时将ＭＤＡ、３ＡＯ及Ｗｉｓｈ 三种瘤细胞制成可溶性肿瘤抗原，将二者于体外共育，分析ＤＣ表面标记的改变及某些细胞因子产生的水平，并检测其对肿瘤细胞杀伤作用的影响。结果表明，经可溶性肿瘤抗原刺激的ＤＣ分泌ＩＬ－１２及ＴＮＦα水平增加，同时高水平表达ＣＤ４０ 、ＣＤ８０ 等表面分子；与对照组相比，显示不同程度的促杀伤作用并有效地促进特异性淋巴细胞增殖。ＧＭ－ＣＳＦ上调ＤＣ的上述作用。

小鼠脾脏树突状细胞免疫功能的体外研究

本实验通过对小鼠脾脏分离到的树突状细胞免疫功能的研究表明,在ConA,PHA刺激的淋巴细胞增殖反应和混合淋巴细胞反应(MLR)中树突状细胞具有明显强于巨噬细胞的抗原递呈作用(P<0.001或P<0.005)。树突状细胞的这种作用可被特异性的单克隆抗体所抑制(抑制率>95％)。少量的巨噬细胞可促进其作用。

小鼠树突状细胞过继转移免疫作用的研究

目的 探讨树突状细胞 (DCs)在过继免疫中的作用 ,以及递呈不同性质抗原的特点 ,为应用DCs诱导免疫耐受或治疗肿瘤奠定基础。方法 分别用绵羊红细胞 (SRBC)和人白蛋白单次免疫和再次免疫小鼠 ,分离脾DCs和腹腔巨噬细胞 (MΦ) ,并分别转移至各组小鼠体内 ,检测抗SRBC和抗人白蛋白抗体效价。结果 实验组中不论是DCs组 ,还是MΦ 组产生的抗体效价均较高于对照组。过继转移白蛋白时 ,DCs组产生抗体水平较MΦ 组低 ;过继转移SRBC时 ,DCs组产生的抗体水平较MΦ 组稍高 ,但无统计学意义 ,而血清中的抗体水平与抗体形成细胞 (AFC)水平发生分离。结论 DCs既能处理递呈可溶性抗原 ,又具有较强的处理 ,递呈颗粒性抗原通过过继转移给受体 ,使受体T。

LAF在体外对淋巴细胞产生细胞因子的影响

脂质血管生长因子（ＬｉｐｉｄＡｎｇｉｏｇｅｎｉｃＦａｃｔｏｒ，ＬＡＦ）是由大网膜中提取的一种具有促血管生长的脂溶性因子，将该物质与小鼠脾细胞和ＣｏｎＡ或ＬＰＳ共育，观察该物质对淋巴细胞产生细胞因子的影响，并与脂肪提取物和乳化剂作对照，结果表明ＬＡＦ具有抑制淋巴细胞产生ＩＬ－２、ＩＦＮ和ＴＮＦ的趋势。