牛冠状病毒DQ株感染BALB/c小鼠的敏感性研究

为研究牛冠状病毒DQ株（BCoV-DQ）对BALB／c小鼠的敏感性，本研究将该病毒以不同剂量、不同途径感染小鼠，观察比较临床表现、体重变化、剖检及组织病理学变化。分别以100TCID50-700TCID50感染小鼠，结果显示300TCID50病毒可使试验小鼠出现明显的临诊症状和可见的病理变化。采用滴鼻、灌胃、腹腔注射三种途径感染小鼠，结果显示灌胃组个体变化差异大，组织器官病变明显，为最佳感染途径。取主要病变部位组织进行病毒基因组的RT—PCR扩增，证实该病毒可以在小鼠肠道内成功增殖。本实验表明BALB／c小鼠可以作为BCoV．DQ研究的替代动物。

副猪嗜血杆菌病的诊断与防治

副猪嗜血杆菌病又称格拉斯氏病,是由副猪嗜血杆菌引起的猪的多发性浆膜炎、浆液纤维素性心包炎、关节炎和脑膜炎为主要特征的传染病。

牛轮状病毒双抗体夹心ELISA检测方法的建立

用差速离心法纯化的牛轮状病毒(BRV)分别免疫鼠和兔,制备了鼠抗BRV和兔抗BRV超免疫血清,并用层析方法进行了纯化,建立了检测BRV的双抗体夹心ELISA方法。该双抗体夹心ELISA的最佳反应条件为:兔抗BRV IgG包被浓度为10μg.mL-1,鼠抗BRV IgG工作浓度为5μg.mL-1,样品反应时间60 min,酶标抗体工作浓度为1∶5 000,以OD450 nm≥0.432作为阳性判定标准。该方法的板间、板内重复性变异系数小于10%,最低检测浓度为1.41μg.mL-1,并与牛呼吸道合胞体病毒(BRSV)、牛冠状病毒(BCV)和牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)等病原无交叉反应。用建立的ELISA方法与BRV RT-PCR方法同时检测40份临床粪便样品,符合率达到95%。结果表明,建立的双抗体夹心ELISA方法具有较好的特异性和较高的敏感性,可用于BRV的快速检测。

牛传染性鼻气管炎病毒PCR检测方法的建立及初步应用

为建立一种快速诊断牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)病的方法,根据GenBank中登录的IBRV保守基因gB序列,利用分子生物学软件Primer5.0设计1对特异引物,优化反应体系后,建立了IBRV PCR检测方法。特异性试验结果显示该方法可从IBRV DQ株中扩增出398 bp的特异性片段,而对牛呼吸道合胞体病毒、牛副流感病毒、MDBK细胞的扩增结果均为阴性。该方法检测IBRV的敏感性可达10-3 TCID50·mL-1。应用建立的PCR方法能够从发病的临床样品中检测出IBRV且比病毒分离方法更为敏感,操作简便。结果表明建立的PCR方法具有特异、敏感、快速的特点,可用于IBRV的临床检测。

BRSV和BPIV-3双重PCR检测方法的建立及初步应用

为建立一种快速诊断牛呼吸道合胞体病毒(BRSV),牛副流感病毒3型(BPIV-3)病毒病的方法,根据Genbank中登录的BRSV核衣壳蛋白N基因序列和BPIV-3的核衣壳蛋白N基因序列,利用分子生物学软件Primer5.0设计2对特异引物,经过条件优化,建立了BRSV和BPIV-3的双重PCR检测方法。采用该方法检测BRSV和BPIV-3参考毒株,特异性良好。对参考毒株进行梯度稀释检测,结果该方法检测BRSV的敏感性可达10 TCID50·100μL-1,BPIV-3可达10 TCID50·100μL-1。应用建立的双重PCR方法能够从临床样品中检测出BRSV和BPIV-3。表明建立的双重PCR方法具有特异、敏感、快速的特点,可用于BRSV和BPIV-3的临床检测。

仔猪源大肠杆菌分离株的血清型鉴定

由大肠杆菌引起的仔猪腹泻（习惯上称为仔猪黄痢和仔猪白痢）是猪场最常见的传染性疾病之一。该病以严重腹泻、脱水或败血症为主要临床表现,病猪往往生长停滞或死亡,对仔猪危害较大,已成为养猪业一个有重要经济意义的疾病。因大肠杆菌血清型众多,变异较大,给本病的有效防控带来困难。本试验从冀东地区的滦县、迁安、昌黎、抚宁等地12个发病猪场分离鉴定出31株仔猪源大肠杆菌,

截短NDVF蛋白的原核表达

根据NDV LaSota株F基因已知的抗原表位,对F蛋白进行分段表达。应用RT-PCR方法分段扩增F基因,并将其克隆到pET30a(+)原核表达载体上,得到重组质粒pET30-F780和pET30-F760,将质粒导入BL21(ED3)感受态中,经IPTG诱导表达。表达的重组蛋白通过SDS-PAGE和Westem-blotting方法进行鉴定。表达的两段蛋白大小约为31.1 kDa和27.9 kDa,与预期的蛋白分子量大小相符。Western blot分析表明重组蛋白可以和NDV抗体发生特异性反应。成功构建了原核表达质粒pETF780和pET-F760,并获得了高效表达,通过Western blot分析表明重组蛋白具有良好的免疫反应性。

猪传染性胃肠炎病毒S截短蛋白在干酪乳杆菌表面展示表达的研究

为构建细菌外膜展示表达猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)S截短蛋白的重组干酪乳杆菌(Lactobacillus casei),本研究采用RT-PCR扩增TGEV S基因的截短片段BC和AD,构建了重组pLA-BC/L.casei和pLA-AD/L.casei,利用western blot、间接免疫荧光法(IFA)和流式细胞术(FACS)检测外源蛋白在干酪乳杆菌的表面表达与定位。IFA和FACS结果显示重组菌株pLA-BC/L.casei和pLA-AD/L.casei表面均能够检测到截短的S和PgsA融合表达蛋白与TGEV阳性血清的特异性荧光信号,而对照菌没有检测到荧光信号。表明本研究构建的的TGEV重组L.casei具有胞外展示表达TGEV抗原蛋白的功能,可以作为TGEV候选疫苗应用于动物试验研究。

常见禽呼吸道疾病鉴别诊断

冬季气温较低,各种病毒、细菌比较活跃并能长期存活,因而极易引发禽类各种呼吸道疾病。常见禽呼吸道疾病在临床上易造成混淆,如何对病因、病症进行快速鉴别诊断,是防治该类疾病的重点。现将不同禽呼吸道疾病病症的诊断要点简述如下。1禽流行性感冒该病是由A型流感病毒引起的禽传染病,一年四季均可发生,但以晚秋和冬春寒冷季节高发,且易造成大群感染。

鹅异刺线虫病诊断与治疗报告

鹅异刺线虫病是一种寄生在鹅盲肠内,可以造成鹅严重死亡的寄生虫病。通过对本例临床鹅异刺线虫病的诊断治疗,明确了鹅异刺线虫病的临床症状及流行病学特征、剖检变化,为该病在实际生产中的治疗预防提供参考。

冬季高发禽流感诊断与防治

禽流感是由A型流感病毒引起的禽类一种急性传染病,以高热、呼吸困难、全身败血症等为主要特征,具有较高的死亡率。冬季为禽流感高发期,加之春节将至,市场活禽需求量大、跨区域调运频繁,进一步加大了该病的防控难度。1禽流感流行现状禽流感按致病性的不同可分为高致病性、低致病性和非致病性3大类。非致病性禽流感仅使感染的禽体内产生病毒抗体,并没有明显临床症状。

香猪养殖场食盐缺乏症诊断与治疗报告

食盐(NaCl)缺乏可以引起猪严重的异食癖、营养不良。免疫力下降。本报告对一例长期饲喂低盐饲料的猪群所引起的临床症状、病理解剖等情况详细描述,并通过治疗佐证了营养缺乏对机体抗病力的影响。

冀东地区猪源大肠杆菌分离株的耐药性调查

现代养殖业的持续发展离不开抗菌药物，然而，抗菌药物的广泛使用和不合理滥用导致耐药现象日趋严重，给临床用药带来很大难度。而且大肠杆菌作为人和动物的肠道共栖菌和条件性致病菌，其可以通过耐药质粒和耐药基因传递等多种方式将耐药性传播给人类，给食品安全和人类健康带来潜在危害。对动物源大肠杆菌耐药性的调查和监测不仅为兽医临床合理用药提供科学依据，

一例鸵鸟曲霉菌病的诊治报告

曲霉菌是一种真菌,广泛存在于自然界,是一种条件性致病菌,一般由饲料或垫料霉变所引起。笔者对一例鸵鸟曲霉菌病的病原学、流行特点、临床症状、病理变化、实验室诊断、预防和治疗措施等方面进行了介绍,以供业界参考。