产地和炮制次数差异对黄精多糖结构和体内抗氧化活性影响

目的对不同产地和不同炮制次数黄精提取物多糖含量和结构进行分析,比较不同产地和不同炮制次数黄精提取物对小鼠的体内抗氧化活性的影响。方法以不同产地和不同炮制次数黄精为原料,采用热水辅助超声提取黄精多糖、硫酸-蒽酮法测定多糖含量、离子色谱法(ion Chromatography,IC)测定单糖组成、高效凝胶色谱法(high performance gel permeation chromatography,HPGPC)测定多糖分子量分布、傅里叶红外光谱法(fourier transform infrared spectrometry,FTIR)测定官能团信息;将实验小鼠随机分为4组:一蒸一晒九华黄精组、一蒸一晒四川黄精组、九蒸九晒九华黄精组和对照组,分别给予灌胃干预,测定各组小鼠肝脾指数、采用酶联免疫法测定血清中总抗氧化能力(total antioxidant capacity,T-AOC)、总超氧化物歧化酶(total superoxide dismutase,T-SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)活性。结果表明一蒸一晒九华黄精提取物多糖含量最高,不同产地和炮制次数黄精提取物多糖单糖组成和分子量存在差异;红外光谱分析表明3种黄精提取物均含有β-D-吡喃糖环;体内抗氧化实验表明黄精提取物对小鼠肝脾指数没有显著影响,一蒸一晒九华黄精能够显著提高小鼠体内总抗氧化活性,并且3种黄精提取物均能够提高机体抗氧化酶活性。结论不同产地和不同炮制次数黄精多糖含量和结构存在差异,九华黄精提取物在体内的抗氧化活性略优于四川黄精。

黄精水提物干预脂多糖诱导的巨噬细胞极化与自噬研究

目的探讨黄精水提物(Polygonatum sibiricum aqueous extract,PSAE)对脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)诱导的RAW264.7巨噬细胞M1极化与自噬的调节作用,探究其抗炎机制。方法实验分为对照组(无任何处理)、LPS组(100 ng/mLLPS刺激12 h)、PSAE低、中、高剂量组(50、100、200μg/mLPSAE预处理细胞4 h后,再加入100 ng/mL LPS刺激12 h)。细胞计数(cell counting kit-8,CCK-8)法检测细胞活性;Griess法检测细胞NO分泌量;实时荧光定量PCR检测细胞诱导型NO合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)、白细胞介素-1β (interleukin-1β,IL-1β)、肿瘤坏死因子-α (tumor necrosis factor-α,TNF-α)及单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemotactic protein-1,MCP-1)的mRNA水平;蛋白质免疫印迹和免疫荧光法检测M1型极化标志物iNOS表达水平;蛋白质免疫印迹检测微管相关蛋白1轻链3 (microtubule-associated protein 1 light chain 3,LC3)和螯合体1 (sequestosome 1,p62)表达水平。结果与LPS组相比,PSAE可使RAW264.7细胞NO的分泌减少(P<0.05,P<0.01),PSAE也可降低M1极化相关炎症因子(iNOS、IL-1β、TNF-α、MCP-1) mRNA表达水平(P<0.05,P<0.01,P<0.001),降低M1极化标志物iNOS蛋白表达水平(P<0.05,P<0.001),同时,PSAE可降低LC3Ⅱ/Ⅰ值(P<0.01,P<0.001),促进p62蛋白表达(P<0.01),从而降低自噬水平。结论 PSAE能够抑制LPS诱导的RAW264.7细胞M1极化和自噬水平,减轻细胞炎症反应。