电动化和智能网联化对汽车职业教育的变革需求

目前,汽车动力正由内燃机向电力等新能源驱动过渡,汽车的驾驶技术正经由人工驾驶到机器辅助并希望基于智能网联技术最终实现无人驾驶的快速发展过程中。职业技术学校除了增设新能源汽车、智能网联汽车相关专业外,还应在传统汽车类专业的教学标准中增加电动汽车、智能网联汽车相关课程,根据不同教育阶段和不同专业人才培养目标的差异确定相应的课程教学内容,以使学生的技术技能能够满足行业需求。

中国广西、广东、四川三省区β-地中海贫血基因突变类型及产前基因诊断研究

本文采用聚合酶链反应(PCR)技术及特异寡核苷酸探针斑点杂交,分析研究广西、广东、四川三省区95例β-地中海贫血患者150 条染色体的基因突变。发现发生率最高的前两种突变各有不同。广西的是编码子41-42框架位移与17(A→T)突变。广东的是编码子41-42框架位移与IVS-Ⅱ-654突变,四川的则是17与41-42(17稍高于41-42)。-29位突变在四川也很常见,但广东、广西不多。-30位的T→C突变,IVS-Ⅰ-1的G→T以及IVS-Ⅰ-5的G→C三种突变,在本研究的病例中没有发现。并在此基础上完成了14例β-地中海贫血病危胎儿的产前基因诊断。

苯丙氨酸脱氨酶cDNA在大肠杆菌中的克隆与表达

利用逆转录聚合酶链反应（ＲＴＰＣＲ）技术从欧芹总ＲＮＡ分离制备了苯丙氨酸脱氨酶（ＰＡＬ）ｃＤＮＡ，重组到质粒ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔ及ｐＥＴ２３ｂ中，后者转化大肠杆菌ＪＭ１０９ＤＥ３获得ＰＡＬ的高效表达。插入片段两端共９２０ｂｐ的测序结果与文献符合率为９９７８％。工程菌细胞裂解液用ＳＤＳＰＡＧＥ（聚丙烯酰胺凝胶电泳）分析显示在分子量７７ｋＤａ处有一条表达很强的蛋白区带，与ＰＡＬ亚基分子量相符，约占菌体总蛋白的１５％。用ＨＰＬＣ法检测到苯丙氨酸被ＰＡＬ脱氨的产物肉桂酸，且该ＰＡＬ酶活力特异性好，适于ＰＫＵ治疗之用。

重型血友病甲基因诊断新技术的研究及其应用

运用长距离ＤＮＡ扩增技术（ＬＤ－ＰＣＲ）成功地检测出凝血八因子ＦⅧ基因倒位缺陷患者，并检出该倒位的女性携带者。在建立并完善上述技术之后，对５３份ＨＡ患者及家系成员的ＤＮＡ标本进行了双盲试验，检出ＦⅧ倒位者２３份，野生型２７份，携带者３份。结果与用Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交技术检测的结果完全一致，说明运用本ＬＤ－ＰＣＲ技术检测ＦⅧ基因倒位的灵敏度与准确率均达到百分之百。运用这一新技术，完成了５个重型血友病甲家系的基因诊断。共检出３例基因倒位者，４位女性倒位基因的携带者。该技术较Ｓｏｕｔｈ－ｅｒｎ印迹杂交法简便、快速、高效直观、灵敏准确，便于推广应用，达到国际先进水平。

27例乙型血友病患者Ⅸ因子基因突变研究

采用ＰＣＲ（聚合酶链反应）及ＧＡＷＴＳ（ＧｅｎｏｍｉｃＡｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎｗｉｔｈＴｒａｎｓｃｒｉｐｔｓＳｅｑｕｅｎｃｉｎｇ）技术，研究了江苏、湖北、山东、广东、福建、宁夏六省区２７例乙型血友病患者及其家系成员ＦⅨ（九因子）基因各２．２Ｋｂ ＤＮＡ序列。在２ｌ例中发现２０种不同类型的突变。其中１２种是未曾报道的新突变。３８％的突变发生在ＣｐＧ二核苷致序列上，进一步证实了ＣｐＧ确系突变热点。同时检出６例女性为致病基因携带者。对开展基因产前诊断及优生优育等，具有重要意义。

筛查基因突变的新技术──循环双脱氧指纹图谱法及其应用

建立了适用于大批量标本基因突变筛查的双脱氧指纹图谱法即ｄｄＦ。该技术集测定ＤＮＡ序列的％脱氧末端终止法及ＳＳＣＰ二者长处于一身，即只作一个（例如用ｄｄＡ）双脱氧末端终止反应，然后将反应产物在与ＳＳＣＰ相同的电泳条件下进行聚丙烯酰胺凝胶电泳，这样有突变的样品不会漏检，阳性检出率高达１００％。简化了原方法中ＲＮＡ转录及逆转录等步骤，直接以ＰＣＲ产物为模板，将双链ＤＮＡ循环测序的反应用作ｄｄＦ反应，称之为Ｃｙｃｌｅ－ｄｄＦ，省去了Ｔ７ＲＮＡ聚合酶及ＭＭＶ逆转录酶二种酶。这样，Ｃｙｃｌｅ－ｄｄＦ既保持了阳性检出率高的优点，又降低了成本，简化了步骤，使之便于在大多数实验室推广开展。运用Ｃｙｅｌｅ－ｄｄＦ技术进行了乙型血友病（ＨＢ）患者九因子基因（Ｆ Ⅸ）及β地中海贫血患者β珠蛋白基因突变的筛查。对筛查出的有异常指纹图谱的片段，进而用ＡＢＤ３７３Ａ－０１型ＤＮＡ自动测序仪有针对性地测出了具体突变点。

地中海贫血的快速产前基因诊断

本研究采用聚合酶链反应(PCR)技术,完成了20例重症β-地中海贫血(β-地贫)及2例重症α-地中海贫血(α-地贫)高危胎儿的产前基因诊断。20倒重症β-地贫高危胎儿中,双重杂合子及纯合子6例,杂合子10例,正常胎儿4例,其中10例已经正常分娩后或流产后基因分析验证,结果与产前诊断完全一致。讨论了三种取材方法及影响PCR的主要因素。PCR技术具有简便快速、早期取材、诊断率高及结果准确可靠等优点,便于推广使用。

胡憨战争与善后会议

段祺瑞以“执政”的名义重新上台后，为使其政权合法化， 召开了“善后会议”。但是，在会议召开期间，河南又爆发了国民军系胡景翼与镇嵩军憨玉 琨的战争。该战争是段祺瑞一手造就而成，但又严重影响了会议的进程，从而给执政府本 身以沉重打击，并对北方政局产生了重大影响。

一个α,β地中海贫血复合家系β珠蛋白基因的进一步研究

前文~[1]曾报道广西一个α,β地中海贫血复合家系的血红蛋白组成及α珠蛋白基因分析结果,并讨论了各成员可能的β珠蛋白基因结构情况。本文利用先进的PCR即基因扩增技术,结合特异寡核苷酸探针斑点杂交及扩增后直接测定DNA序列的技术,进一步研究并彻底搞请了该家系各成员的β珠蛋白基因结构情况。结果显示:母亲及两个弟弟都是编码子41—42TTCT四个碱基缺失造成框架位移所致β地中海贫血的杂合子。父亲与先证者的β基因均属正常。前三个成员均为α地贫复合β地贫,其α与β珠蛋白链合成的不均衡状态得到改善,贫血症状也明显轻。

应用脂质体及直接注射法在小鼠体内表达人生长激素的研究

本文以构建的含人生长激素(hGH)cDNA的重组真核表达质粒为外源靶基因,研究了直接注射质粒及脂质体与质粒复合物后hGH在小鼠体内表达的情况.用RT-PCR技术检测hGH转录产物,用免疫放射检测分析法(IRMA)检测hGH蛋白质表达水平.结果发现,注射质粒与脂质体复合物组的表达效率高于单纯质粒组,Lipofectamine的作用强于Lipofectin,表明应用脂质体及直接注射法是使外源靶基因在小鼠体内表达的简便、有效途径.

民国初期北京电车与人力车的矛盾

民国初期北京城内的交通工具非常落后。人们出行的代步工具主要是人抬的轿子和骡马拉的轿车以及人力车。随着北京城市人口日益增加,住户遍及四城,＂交通滋形不便＂[1],急需发展公共交通事业。北洋政府为解决交通困难情形,决定兴办北京电车,成立了官商合办性质的北京电车股份有限公司,筹备电车开通事宜。

苏俄占领外蒙古及对华外交活动

苏俄 1919年及 192 0年的二次对华宣言 ,主要是为维护自己在远东国家利益而进行宣传的手段。苏俄占领外蒙古 ,是联共 (布 )、第三国际对外输出革命的产物 ,是民族利己主义的典型表现。它为了缓和由此而给中苏关系带来的负面影响 ,对华朝野采取了欺骗手法 ,使其相信了苏俄不分裂中国的虚伪许诺 ,从而给中国领土主权带来了在 2 0世纪最大的损害。

试析国民党对“两面政权”的应对措施

一、保甲的推行与中国共产党的对策——"两面政权"国民党政府之所以推行保甲,主要是为了对付中国共产党。国民党政府定鼎南京后,一直标榜推行"地方自治"。但在南昌起义之后,中国共产党和红军的力量越来越强大。对此,国民党政府异常恐惧,慌忙调集军队对中央苏区进行围剿。

人头发DNA的提取及其基因扩增

头发是犯罪现场最容易得到的材料之一。本文报道从人的头发中提取DNA的方法以及利用PCR(聚合酶链反应)技术,从少量人发DNA扩增大量拷贝数的基因片段。对基因扩增得到的大量基因片段进行进一步的基因分析,将为法医物证学提供客观证据,具有重要价值。

简析西南联合大学办学成就突出的原因

西南联合大学是抗日战争时期由北京大学、清华大学、南开大学三所大学合并而成的,为中华民族培养了大批人才。其在办学理念、校风、校训、管理体制、课程设置等各方面都有着很多优点与特色,故能在当时极为艰苦的条件下取得异常丰硕的成果。本文对此进行了较为系统的分析,希望能给今天的高等教育提供有益的借鉴。

冯玉祥与武穴主和

武穴主和是冯玉祥在护法战争时期 ,对抗段祺瑞武力统一政策的特殊事件。在此事件中 ,冯玉祥虽然有赞同孙中山护法的因素 ,但也包含着其欲乘直皖之间的矛盾 ,实现与陆建章策划的驱逐安徽督军倪嗣冲夺取安徽的阴谋 ,而此事件最终以其对直系的完全依附告终。

日本对华北沦陷区的移民及其影响

近代日本为配合其侵华步骤,大肆对华推行殖民政策。尤其是在抗战爆发之后,日本对作为其统治中心的华北沦陷区掀起了移民狂潮,日侨人数因而急剧增长。大量日本移民的到来,加重了华北地区人民的负担,并给其生产、生活带来了极大的影响。

等温条件下序列特异性核酸扩增技术:NASBA

介绍了一种能在等温条件下进行序列特异性核酸体外扩增的技术──ＮＡＳＢＡ（ＮｕｃｌｅｉｃＡｃｉｄＳｐｅｃｉｆｉｃ－ＢａｓｅｄＡｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ）。该技术同时使用ＡＭＶ反转录酶、Ｔ７ＲＮＡ聚合酶及ＲＮａｓｅＨ，在同一个恒定温度下协同作用，使特异的核酸序列得以扩增至１０６～１０８倍。起始的模板可以是ＲＮＡ，也可以是ＤＮＡ，尤其适用于微量ｍＲＮＡ的特异性扩增。本文研究了各种因素对ＮＡＳＢＡ扩增效率的影响，找到了最适反应条件。并成功地从人脐带血总ＲＮＡ中扩增了人Ｔ细胞受体γ链ｍＲＮＡ。