淫羊藿苷对小鼠慢性低氧诱导学习记忆功能降低的防护作用及机制

目的探究淫羊藿苷(ICA)对小鼠慢性低氧环境暴露诱导记忆障碍的主要保护作用机制。方法选择8周龄雄性C57BL/6小鼠40只,建立模拟海拔6000 m低氧环境暴露动物模型。40只小鼠随机分至常氧组、常氧+ICA组、低氧组、低氧+ICA组(每组10只)。暴露28 d后进行Y迷宫、新物体识别实验评测小鼠空间记忆功能。利用免疫荧光染色观察小鼠海马组织小胶质细胞活化程度和神经元损伤情况,利用qRT-PCR方法检测海马组织iNOS、IL-1β、TNF-α、Cxcl-1、IL-4等炎性分子表达。使用喹啉酸试剂盒检测海马组织色氨酸犬尿氨酸途径代谢产物喹啉酸含量,使用qRT-PCR方法检测色氨酸犬尿氨酸代谢途径Ido1、Kmo、Haao、Kynu、Kyat3相关分子mRNA表达情况。结果与常氧组相比,Y迷宫及新物体识别实验结果显示低氧组小鼠出现明显空间记忆障碍(P<0.01);免疫荧光染色组织切片可见低氧组较常氧组海马小胶质细胞活化及神经元损伤明显(P<0.01);低氧组海马组织喹啉酸含量较常氧组升高(P<0.01);qRT-PCR检测发现低氧组海马组织炎症相关分子表达较常氧组显著升高(P<0.01),色氨酸犬尿氨酸代谢相关分子Ido1(P<0.01)、Kmo(P<0.01)、Haao(P<0.01)表达较常氧组明显升高,Kynu(P<0.01)、Kyat3(P<0.01)较常氧组表达降低。低氧+ICA组与低氧组小鼠相比,空间记忆能力有所改善(P<0.05),海马区小胶质细胞活化及神经元损伤相对减弱(P<0.05),炎症相关分子(P<0.01)及色氨酸犬尿氨酸代谢相关分子(P<0.01)表达均有相应回调。结论ICA可通过调控小胶质细胞色氨酸犬尿氨酸代谢,抑制小胶质细胞炎性活化和喹啉酸生成,缓解慢性低氧诱导小鼠海马神经元损伤,改善记忆功能减退。

铅暴露对体外血脑脊液屏障功能及ZO-1和闭合蛋白表达的影响

目的通过建立体外血脑脊液屏障(BCB)模型,研究铅诱导BCB损伤的可能机制。方法使用Z310细胞建立BCB体外细胞模型,分别加入Pb(AC)22.5,5.0和10.0 mmol·L-1,暴露24,48和72 h。采用跨内皮电阻(TEER)检测法及葡聚糖法检测BCB模型通透性;Western蛋白印迹法和免疫荧光法检测BCB中紧密连接蛋白ZO-1和闭合蛋白表达及分布。结果与细胞对照组相比,Pb(AC)22.5,5.0和10.0 mmol·L-1暴露48 h对Z310细胞存活率和密度均无明显影响。暴露后第12天,与细胞对照组比较,Pb(AC)25.0和10.0 mmol·L-1组TEER值明显降低(P<0.05),葡聚糖通过率显著增高(P<0.05)。Western蛋白印迹法和免疫荧光法检测结果显示,与细胞对照组相比,Pb(AC)2各浓度暴露48 h后,ZO-1和闭合蛋白表达水平明显降低(P<0.05)。结论铅暴露能够破坏BCB模型的通透性,其机制可能与抑制紧密连接蛋白的表达有关。

军队医学院校空气质量检测实践教学反思

“空气质量检测”实践教学是军队医学院校预防专业学员的一项专业实践课,实践教学中存在内容繁多、理论性强、操作规范性强、时间有限等特点。在学习过程中,学员缺乏化工、物理学等背景知识,易导致实验结果出现偏差。为响应最新军事院校提出针对实践教学的理念——理论与实践相结合,“以学促练,以练促学”的教学要求,文章以“空气质量监测实践教学”为研究对象,结合近十年来传统的实践教学特点和面临的问题,就探索新型实践教学模式进行了反思。

军队卫生学教学现状分析与改革策略

军队卫生学是军医大学重要课程之一。针对军队卫生学课程进行教学研究,开展一系列改革的课程,并通过问卷调查的方式了解本科学员对专业课程军队卫生学实验及理论教学的情况,为军队卫生学课程教学改革提供依据,为提高预防医学专业建设、培养高素质应用型预防医学专业人才奠定基础。

军队卫生学实验教学改革及进展

军队卫生学实验课程具有特殊性。强化实践性、改进学员分组方式、完善任务式教学模式、设立任务组长等措施,可以提高实验教学有效性,促进学员在以后的部队工作中灵活运用所学知识。在教学过程中,不断加强学员基本知识应用能力培养,致力于为军队提供高素质的医务人员。

新形势下完善军队卫生学教育的思考与实践

军队卫生学具有其特殊的教学特点,在教学改革的新形势下,通过对其教学进行改进,可形成独有的教学特色。在教学过程中主要做好教学的组织、准备、创新和建设4个方面的工作,并把教学改革工作深入到教学工作的各个环节,从教学内容、教学环节、教学手段、教学形式等多方面多层次对教学进行改革创新。创新的教学模式会极大地激发学生的参与意识,有利于提高学生主动获取知识的能力,有利于培养学生的实践能力、创新精神,为军队培养更加优秀的军队卫生人才。

案例教学法在医学院校环境卫生学课程中的应用

案例教学法是基于情境学习理论和弹性认知理论,以学生为主体的教学方法,具有启发性、实践性的特点,能够有效提高学生决策能力和综合素质。《环境卫生学》课程的特点则体现在边缘性、综合性与实践性上,二者的结合具有很强的适应性。通过案例教学中教师和学生的对话与思考,能够协助学生建立跨学科的知识结构,强化学生主动参与学习的行为。该文结合具体的教学实践活动,探讨了医学院校《环境卫生学》本科教学中如何有效实施案例教学方法的问题。

微课结合CBL模式在低温影响心肺功能教学中的实践及评价

目的探讨微课程结合以案例为基础的教学模式(CBL)在低温影响心肺功能教学中的效果。方法选取60名五年制临床医学专业学生作为研究对象。随机分为对照班(5组,6人/组)为传统教学班,试验班(5组,6人/组)为微课结合CBL联合教学模式班。课程结束后,通过成绩分析和问卷调查进行教学效果评价。学生对教学效果的评价以百分比表示。结果试验组学生的总成绩明显高于对照班(P<0.01)。问卷调查的结果显示,学生对微课结合CBL模式的教学效果评价明显优于传统的授课方式,不仅有助于提高学生的学习兴趣和独立思考问题的能力,而且有利于知识点的理解和掌握。结论微课结合CBL模式教学法在低温影响心肺功能教学中的应用可以明显提高课堂教学效果,加深学生对理论知识的掌握,提高学生的综合能力。

PBL教学法在军队卫生学实验教学中的应用

根据军队卫生学实验教学的特点,针对现有教学中存在的问题,改革传统的教学模式,引入以问题为基础的学习(PBL)教学法,围绕教学设计将两种教学模式相结合,通过问卷调查和课程考核的形式检测教学效果。结果显示,PBL教学法可以提高学生主动学习的意愿和学习能力,提高创造性解决问题的水平,同时也能够提供更有激励和更愉悦的教学体验,但是PBL教学法并没有明显提高学生的课程考核的能力。

针对预防医学本科生环境卫生学课程教学设计的思考

改变传统的课程教学理念,创新教学方法,完善课程教学设计,总结以往的教学经验,是当今教学改革的主要方向。以环境卫生学课程教学设计为例,从课程教材和教学内容的分析、课程标准的理解、教学实施方面,针对目前环境卫生学教学设计中存在的普遍问题进行思考和研究,并提出相应的解决方案,为相关专业教师的教学设计提供借鉴。

噪声对豚鼠耳蜗血管纹紧密连接蛋白claudin-5表达及血迷路屏障通透性的影响

目的研究噪声对豚鼠耳蜗血管纹紧密连接蛋白claudin-5表达及血迷路屏障功能的影响。方法40只豚鼠随机分为正常对照组(20只)和噪声暴露组(20只),噪声暴露组给予声强为115dB SPL白噪声暴露,每天6小时,连续两天,对照组不予噪声暴露。于实验前及噪声暴露后次日对两组豚鼠行ABR检测,第二次ABR检测后对两组豚鼠耳蜗基底膜行鬼笔环肽-异硫氰酸荧光素(Phalloidin-FITC)染色;用硝酸镧透射电镜和常规透射电镜观察两组豚鼠内耳血迷路屏障通透性和紧密连接的变化;Western blot和免疫组织化学染色观察两组豚鼠耳蜗血管纹和螺旋韧带处claudin-5的表达。结果噪声暴露组豚鼠ABR波Ⅲ反应阈较正常对照组阈移40dB以上,差异有统计学意义(P<0.05);基底膜铺片FITC染色示噪声暴露组底回基底膜毛细胞大量缺失,其余部分毛细胞纤毛排列紊乱并出现融合,而对照组毛细胞排列整齐,其纤毛呈V或W型,两组间外毛细胞计数比较差异有统计学意义(P<0.05);透射电镜下,可见噪声暴露组血管内皮细胞间和边缘细胞间的紧密连接均遭到破坏,细胞间隙增大;硝酸镧透射电镜下,大量镧颗粒从血管腔内渗漏到管腔外的组织间隙,而对照组镧颗粒仅局限于血管腔内;Western blot结果示,两组耳蜗外侧壁血管纹均有claudin-5表达,但噪声暴露组的表达量明显低于正常组;免疫组织化学染色也表明,两组豚鼠耳蜗外侧壁毛细血管内皮细胞、边缘细胞等处均有claudin-5阳性表达,但噪声组表达量显著低于正常组(P<0.05)。结论噪声通过下调紧密连接蛋白claudin-5的表达,破坏细胞间紧密连接,增加豚鼠血迷路屏障的通透性,从而导致内耳微环境的破坏,是噪声性聋可能的发病机制之一。

基于微课的新型翻转课堂教学模式在高原心脏病课程网络教学中的应用

目的探究基于微课的新型翻转课堂教学模式在高原心脏病课程网络教学中的应用。方法选择40名临床医学专业学生为研究对象,随机分为试验组(20人)与对照组(20人)。试验组利用网络平台接受基于微课的新型翻转课堂教学,对照组接受在线开展的传统课堂教学,利用随堂测试+课后作业+期末终考的综合测评方式对学生学习效果进行评价,并通过网络问卷形式进行满意度调查。结果试验组学生在课后作业、期末终考以及综合考评整体表现方面显著优于对照组(P<0.01),同时试验组学生在学习兴趣提升、自学能力提升、实践能力提升、课堂知识的掌握等方面满意度高于对照组(P<0.01)。结论基于微课的新型翻转课堂教学模式能够帮助学生更深刻地理解知识重点、难点,提高学生对医学学科的学习兴趣和学习能力,为我国未来医学发展奠定坚实基础。

小组式教学法在大气污染物所致心血管损伤课程中的应用

目的探讨小组式教学法(TBL)在大气污染物所致心血管损伤课程中的应用效果。方法选取空军军医大学2013及2014五年制航空航天医学专业的两个班级为研究对象,分为对照组(2013级,87人)和试验组(2014级,90人),对照组接受传统的授课方式,试验组接受TBL授课。课程结束后,以随堂测试和课后测试的形式进行检测,同时使用调查问卷评价教学效果,评价结果以百分比显示。结果试验组学生综合测试成绩高于对照组学生(P<0.05)。问卷调查结果显示,学生对于TBL的教学效果评价明显高于传统教学法,不仅在团队协作、独立思考及自主学习方面都有提高,而且有利于课程内容的学习。结论 TBL在大气污染物所致心血管损伤课程中的应用可以显著提高课堂教学效果,充分调动学生的学习积极性,有利于学生对知识的掌握,提高学生的综合学习能力。

盐酸小檗碱通过抑制TNF-α/caspase-8/caspase-3信号通路减轻急性低氧暴露引起的肝损伤

目的 研究盐酸小檗碱(BBR)对急性低氧暴露后肝脏的保护作用及相关机制。方法 C57BL/6小鼠分为常氧组、低氧暴露组、低氧暴露联合BBR组。实验第7天处死小鼠,取肝脏组织。称量小鼠及肝组织的质量,利用HE染色观察肝组织病变情况,利用实时定量PCR检测肝组织白细胞介素1β(IL-1β)、 IL-6、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的mRNA表达水平,Western blot法检测肝脏组织TNF-α、裂解型胱天蛋白酶3(c-caspase-3)、 caspase-8的蛋白表达水平,原位末端转移酶标记技术(TUNEL)检测小鼠肝组织细胞凋亡情况。结果 低氧暴露7 d后,小鼠体质量及肝质量显著降低且肝组织损伤明显、肝组织细胞TNF-α和IL-1β的mRNA的水平以及caspase-8、 c-caspase-3蛋白的表达显著增加、肝组织细胞凋亡增加;BBR给药处理可以显著提升低氧暴露7d小鼠体质量及肝质量、降低TNF-αmRNA表达水平以及caspase-8、 c-caspase-3蛋白表达水平、减轻肝组织的细胞凋亡。结论 BBR可能通过抑制TNF-α/caspase-8/caspase-3凋亡信号通路缓解低氧暴露导致的肝脏损伤。

低氧减弱CD4^(+)T细胞激活降低脑脊髓炎小鼠神经病理损伤

目的:分别于常氧环境和低压低氧环境下建立实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)小鼠模型,通过测定小鼠的神经病理损伤和外周免疫激活,评估低压低氧环境对EAE小鼠的病理影响和潜在机制。方法:C57BL/6J雌性小鼠皮下注射髓鞘少突胶质细胞糖蛋白33-35(MOG33-35),建立EAE模型,于常氧环境和低压低氧环境(模拟海拔4500 m)分别暴露32 d,通过测定小鼠体重、临床病理评分(CS)评估小鼠病理损伤,利用苏木精-伊红(HE)染色测定中枢神经系统(CNS)炎性浸润、腊克沙固蓝(LFB)染色评估白质脱髓鞘状况,并利用CD3、CD4、IL-17α和IFN-γ免疫组织化学染色明确CNS浸润的免疫细胞种类;此外,利用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定血清细胞因子IL-17α、IFN-γ和IL-21水平,流式细胞分析测定脾脏CD4^(+)效应T细胞中IL-17α^(+)、IFN-γ^(+)和IL-2^(+)细胞比例,进而评估小鼠外周免疫激活状态。结果:与常氧EAE组小鼠相比,低压低氧EAE组小鼠临床病理评分在疾病高峰期显著降低,同时HE染色和LFB染色显示CNS炎性浸润和白质脱髓鞘均显著减轻,提示小鼠神经病理损伤减轻。此外,低压低氧EAE小鼠CNS中CD3^(+)、CD4^(+)、IFN-γ^(+)细胞浸润显著减少,同时血清中IFN-γ和IL-17α细胞因子水平显著降低,脾脏激活的IL-17α^(+)、IFN-γ^(+)的CD4^(+)效应T细胞比例显著降低,提示低压低氧导致EAE小鼠外周免疫激活减弱,可能是中枢浸润免疫细胞减少的主要原因。结论:低压低氧环境可以通过减弱外周CD4^(+)T细胞的免疫激活,减少IFN-γ和IL-17α细胞因子的分泌,从而减少CNS免疫细胞浸润,降低EAE小鼠神经病理损伤。

整合应激反应抑制剂在治疗神经系统疾病中的研究进展

整合应激反应(ISR)是调节细胞蛋白质代谢的重要信号通路,在多种神经系统疾病发生发展过程中被激活.整合应激反应抑制剂(ISRIB)是近年来新发现的小分子抑制剂,通过特异性抑制多种神经系统疾病中ISR的激活,调节神经细胞蛋白质代谢,从而很好的抑制神经系统疾病的发生发展.多项研究显示ISRIB在治疗阿尔茨海默病(AD)、脑白质消融病(VWMD)、创伤性脑损伤(TBI)、MEHMO综合征等疾病中发挥重要作用.本综述结合近年来国外相关研究,就ISRIB在神经系统疾病治疗方面的进展进行总结.

临床医学专业《劳动卫生学》课程教学探索

目的了解国内临床医学专业《劳动卫生学》课程教育现状和存在问题,探索《劳动卫生学》课程改革的必要性和重难点。方法2021年11月,以西安市某医学院校五年制和八年制临床医学专业150名学生为研究对象进行问卷调查,分析学生对《劳动卫生学》课程满意度、新教法熟悉度及学习自主性等情况。结果收回有效问卷135份,有效率为90.0%。临床医学生对《劳动卫生学》课程的课时安排满意度(88.1%)有待提高。八年制学生的课时满意度为89.5%,对教材满意度为73.7%;五年制学生的课时满意度为87.9%,对教材满意度为81.9%。临床医学生对现代化教学手段的熟悉度(54.1%)不高,八年制学生对以问题为导向和翻转课堂教学法的熟悉程度显著高于五年制学生(χ^(2)=11.810,P<0.001和χ^(2)=7.603,P<0.001),差异有统计学意义。课外学习主动性(50.4%)较差,不超过15.0%的学生能在课余时间学习《劳动卫生学》相关知识。结论优化课时安排、合理应用现代化教学手段、激发学生学习热情是下一阶段《劳动卫生学》课程改革的重点内容。

慢性间歇低压低氧暴露对小鼠空间记忆及海马谷氨酸受体磷酸化水平的影响

目的:观察慢性间歇低压低氧暴露对成年C57小鼠认知功能、海马区p-Glu R-831、845位点蛋白表达以及海马区突触囊泡释放的影响。方法:雄性C57小鼠,随机分为对照组(n=16)与暴露组(n=16)。暴露组给予每天6 h 5000 m低压低氧暴露,持续4w;对照组无低压低氧暴露。两组小鼠其他饲养条件一致。利用Morris水迷宫实验检测每组小鼠空间记忆能力;免疫印迹实验检测Glu R1蛋白ser831和ser845位点磷酸化水平变化;透射电镜实验观察低氧对突触囊泡的影响。结果:(1)水迷宫结果显示慢性间歇低压低氧暴露后,暴露组平均逃脱潜伏期(17.6±1.69 s)显著低于对照组(27.3±1.45 s),暴露组小鼠平台搜索能力提升;(2)免疫印迹结果显示,暴露组小鼠海马Glu R1蛋白ser831和ser845位点磷酸化水平显著高于对照组小鼠;(3)透射电镜结果显示,暴露组小鼠海马区突触囊泡数目显著多于对照组,且差异有统计学意义。结论:慢性间歇低压低氧暴露可以显著提升C57小鼠空间认知功能,其机制可能是通过增加Glu R1蛋白ser831和ser845位点磷酸化水平,并增加突触结构内囊泡数目。

铅暴露对神经元和脉络丛上皮细胞的损伤机制研究

目的研究铅暴露对神经元和脉络丛上皮细胞的损伤作用及分子机制。方法大鼠嗜铬细胞瘤PC12细胞和脉络丛上皮Z310细胞体外培养。采用噻唑蓝法(MTT),通过暴露于0~50μmol/L醋酸铅24 h和48 h筛选适合剂量。两种细胞分别以醋酸铅10μmol/L处理,于48 h时间点用TUNEL法检测细胞凋亡水平,于24 h和48 h时间点用Western blot法检测bcl-2、bax及caspase-3蛋白水平。结果醋酸铅浓度为10μmol/L及以上时,PC12和Z310细胞活力均受到显著抑制,故选择10μmol/L为铅暴露剂量。与正常对照组相比,铅暴露后PC12细胞凋亡(TUNEL阳性)细胞数显著增多(P<0.05),Z310细胞凋亡细胞数无显著变化(P>0.05)。与正常对照组相比,醋酸铅10μmol/L处理PC12细胞24 h和48 h后,PC12细胞bax/bcl-2比值显著上升,cleaved caspase-3蛋白表达水平也显著增高(P<0.05),而Z310细胞bax/bcl-2比值及cleaved caspase-3蛋白水平均无显著改变(P>0.05)。结论铅暴露诱导不同类型大脑细胞损伤的方式和途径存在差异,通过线粒体途径诱导细胞凋亡参与了铅损伤PC12细胞的机制,但可能并不是铅诱导Z310细胞损伤的主要方式。

CSPGs在大鼠脊髓损伤后的表达及其与GFAP的关系

目的:观察脊髓损伤后CSPGs的表达及其与GFAP的关系。方法:成年雄性SD大鼠25只,随机分为对照组和损伤组,损伤组分脊髓挤压损伤后0h、72h、1w、4w组,运用免疫荧光双重染色方法观察CSPGs与GFAP的表达。结果:挤压伤后损伤部位的CSPGs和GFAP的表达均增高,但二者的变化趋势并不一样。其中CSPGs从损伤后表达开始增高,此后一直增加,并在1w至4w时逐渐稳定,主要分布逐渐集中于损伤部位;星形胶质细胞的免疫反应也逐渐增加,其分布逐渐集中于损伤区域的边缘,逐渐形成胶质瘢痕界膜。损伤1w至4w,损伤区域内几乎没有了星形胶质细胞表达,但仍留有大量的CSPGs。结论:早期抑制星形胶质细胞分泌CSPGs,可以防止在损伤部位沉积大量的CSPGs,从而减小其对再生纤维的抑制作用。