猪传染性胃肠炎病毒S基因RAA检测方法的建立与初步应用

本研究旨在建立一种基于猪传染性胃肠炎病毒(porcine transmissible gastroenteritis virus,TGEV)S基因便捷、高效和特异的由重组酶介导的核酸等温扩增(recombinase-aid amplification,RAA)检测方法。通过基因组序列比对,选择TGEV S基因中特定片段为检测靶标,构建重组质粒pUC57-S,设计并筛选RAA引物和探针;建立RAA检测方法;评价该方法灵敏度、特异性和重复性;运用该方法检测腹泻临床样品,与荧光定量PCR方法比较检测结果的符合率。结果确定最佳引物对F2/R1和探针PF2;该方法在40℃恒温条件下,30 min即可完成反应;荧光型RAA法最低检出限可达1.34×10^(1)copies·μL^(-1);与猪流行性腹泻病毒、猪丁型冠状病毒、猪呼吸道冠状病毒等常见猪源病毒核酸无交叉反应;采用该方法检测107份临床样本,阳性率为5.61%(6/107),与荧光定量PCR法相比较,检测结果一致。本研究成功建立了一种灵敏、特异、可视化的RAA检测方法,可摆脱对昂贵设备、专业人员和检测技术的依赖,为临床检测TGEV提供良好的技术基础。

慢性皮质酮暴露对肉鸡生长性能及肝脏铁稳态的影响

[目的]本文旨在研究慢性皮质酮处理后肉鸡生长性能及肝脏铁稳态的变化。[方法]选取30只49日龄如皋黄羽雄性肉鸡,随机均分为对照组和皮质酮组。肉鸡均饲喂玉米豆粕型日粮,对照组肉鸡注射15%(体积分数)乙醇4.0 mg·kg^-1,皮质酮组肉鸡注射4.0 mg·kg^-1皮质酮,连续注射7 d。记录试验起始及结束时肉鸡体质量,检测肉鸡血清及组织铁代谢指标、十二指肠和肝脏铁代谢相关基因及蛋白的表达。[结果]与对照组相比,皮质酮暴露极显著抑制肉鸡生长(P<0.01),且极显著增加肉鸡血清铁含量,提高总铁结合力、不饱和铁结合力和转铁蛋白饱和度(P<0.01)及上调肝脏转铁蛋白(TF)表达(P<0.01),但降低肝脏铁含量(P<0.01)及肝脏转铁蛋白受体1(TFR1)蛋白的表达(P=0.06)。[结论]慢性皮质酮暴露可降低肉鸡生长性能,增加血清铁水平和总铁结合力,减少肝脏铁沉积,并且此暴露对肝脏铁稳态的调节与TF高表达和TFR1低表达密切相关。

慢性束缚应激对小鼠攻击行为的影响及机制探讨

[目的]研究慢性束缚应激对小鼠攻击行为的影响及其机制。[方法]选取52只7周龄C57BL/6J雄性小鼠,随机分为对照组(control group,Con)和慢性束缚应激组(chronic restraint stress group,RS)。另选取7周龄24只小鼠(公母各半),配对饲养,同样分为2组(对照组和慢性束缚应激组),其中雄性小鼠作为驻留者用于攻击行为评测,雌性小鼠仅用作陪伴。再选取6周龄雄性小鼠12只作为入侵者用于攻击行为评测。慢性束缚应激组小鼠每天束缚6 h(09:00—15:00),连续处理7 d,应激小鼠处理期间对照组小鼠禁食禁水,而雌性小鼠和入侵者小鼠未做任何处理。记录试验起始及结束时小鼠体重,检测小鼠攻击行为、血浆和下丘脑神经递质水平、下丘脑攻击行为相关基因及蛋白表达量。[结果]与对照组相比,慢性束缚应激极显著抑制小鼠生长(P<0.01),显著降低小鼠攻击潜伏期时间(P<0.05),显著增加小鼠总攻击次数(P<0.05),显著上调小鼠下丘脑囊泡单胺类转运体2、5-羟色胺受体1b、乙醛脱氢酶1a1、多巴胺脱羧酶、多巴胺受体2及多巴胺转运体mRNA水平(P<0.05或P<0.01),极显著下调小鼠下丘脑DAT蛋白表达量(P<0.01)。[结论]慢性束缚应激可降低小鼠生长性能,增加小鼠攻击行为,攻击行为的改变可能与下丘脑DAT蛋白低表达密切相关。