荧光法测定四种肾上腺素药物与牛血清白蛋白的相互作用

运用荧光光谱法研究生理pH条件下四种肾上腺素药物与牛血清白蛋白(BSA)在不同温度下的相互作用。固定BSA浓度,梯度变化药物浓度,混合溶液分别在25℃及37℃水浴中温浴2h后进行荧光强度测定,运用Stern-Volmer方程及改进的双对数方程求出不同温度下药物与BSA的结合常数(K)和结合位点数(n)。结果表明,四种肾上腺素药物均与BSA形成结合物,对BSA荧光猝灭机制均为静态猝灭;不同温度下与BSA的K值顺序为硫酸沙丁胺醇>重酒石酸去甲肾上腺素>酒石酸美托洛尔>盐酸肾上腺素,37℃时的结合常数(K)和结合位点数(n)均大于25℃时的结果;热力学参数表明四种肾上腺素药物与BSA之间的结合均为自发过程,与BSA分子间主要作用力类型为疏水作用力。分子对接结果和实验结果符合较好。

白芸豆中α-淀粉酶抑制剂活性的测定

根据碘试液与淀粉溶液呈蓝色这一特性,采用可见分光光度法,通过添加α-淀粉酶抑制剂(α-AI)前、后淀粉酶对淀粉水解促进作用的变化确定其抑制活性。结果表明,碘与淀粉络合后,在580 nm处产生特征吸收,ρ(α-AI)=0.003~0.018 mg/L,对α-淀粉酶活性抑制率与其质量浓度线性关系良好(r2=0.9905)。该实验方法条件易于控制、操作简单,为α-AI活性的研究提供参考。

4-巯基苯硼酸-纳米金粒子-纸芯片体系检测唾液酸

本研究旨在建立一种基于纸芯片的唾液酸检测体系。合成4-巯基苯硼酸修饰纳米金粒子(4-MPBA-AuNPS)并对其进行表征。4-MPBA-AuNPS与唾液酸可发生选择性相互作用而逐渐团聚,颜色由红变蓝,在纸芯片上进行显色,手机拍照记录结果,Photoshop软件分析颜色强度。在0.9mmol·L^(-1)~2.9mmol·L^(-1)范围内,红蓝通道色度比值(ΔBlue/Red)与唾液酸浓度呈良好线性关系,检测限为1.9μmol·L^(-1),加样回收率为98.96%~101.1%。样品检测结果误差为-0.58%,准确度良好。该方法具有样品用量少、检测快速、准确性高等特点,有望用于人血清中唾液酸含量的检测。

基于微流控纸芯片-显色法快速测定全血中尿酸的含量

提出了基于微流控纸芯片-显色法快速测定全血中尿酸含量的方法。使用喷蜡打印机将设计的微通道网格打印在色谱纸上,经过加热处理得到微流控纸芯片。在微流控纸芯片I区(样品预处理区)滴加3.2μL 0.10 g·mL^(-1)乙二胺四乙酸(EDTA)溶液和4.8μL 0.015 g·mL^(-1)壳聚糖溶液,干燥,得到微流控纸芯片检测平台。全血样品与磷酸盐缓冲液(pH 7.4)按体积比1∶4混合,分取混合溶液13μL滴加至I区,红细胞与血浆在壳聚糖和EDTA的凝集作用下发生分离,血浆流动至II区(显色区);待血浆完全铺满II区后,滴加3μL三氯化铁和邻二氮菲的混合溶液,静置反应2 min,用手机拍照,采用Photoshop CS2软件分析显色区的颜色强度,得到RGB值(红、绿、蓝三色叠加值),根据标准曲线计算尿酸含量。结果表明:全血中葡萄糖等常见还原性物质均不影响尿酸含量的测定;尿酸浓度在0.05~0.85 mmol·L^(-1)内与RGB值呈线性关系,检出限(3.3s/k)为0.03 mmol·L^(-1)。方法用于实际全血样品分析,并与某医院检验科的测定结果进行比对,结果显示该方法所测结果与医院检测结果无显著性差异;按照标准加入法对实际样品进行回收试验,回收率为103%~110%。

硫醇类生物标记物检测用香豆素衍生物的合成与应用

以4-(二乙氨基)水杨醛为原料,无水氟化钾为催化剂,通过克脑文格尔反应制备化合物1,并对化合物1的合成条件进行优化,再通过尔斯迈尔-哈克-阿诺德反应和亲核加成-消除反应分别合成化合物2和化合物3[7-(二乙氨基)香豆素衍生物],以化合物3为显色剂,采用微流控纸芯片技术,实现对硫醇类生物标记物同型半胱氨酸(Hcy)、半胱氨酸(Cys)、谷胱甘肽(GSH)含量的特异性分析。结果表明,无水氟化钾可替代哌啶作为催化剂用于合成化合物1,m(无水氟化钾)∶m(反应物)=12%,n[4-(二乙氨基)水杨醛]∶n(乙酰乙酸乙酯)=1∶2,产率可达40.35%;化合物3分别与Cys、Hcy和GSH发生不同显色反应,可以实现对3种生物硫醇的特异性检测。

酶的固定化方法在微流控芯片技术中的应用

对微流控芯片上酶的固定化方法进行了综述,系统总结了酶的常见固定化方法及微流控芯片体系中酶的固定化方法,如常见的包埋法、物理吸附法、化学交联法、共价键合法等。为微流控芯片体系酶的固定化研究提供参考,对药物筛选新方法的建立指出新思路。

毛细管电泳法研究牛血清白蛋白与盐酸异丙肾上腺素的相互作用

本研究分别采用区段-区段动力学毛细管电泳法(Plug-Plug Kinetic Capillary Electrophoresis,ppKCE),及以药物为添加剂的亲和毛细管电泳法(Affinity Capillary Electrophoresis,ACE)对盐酸异丙肾上腺素(Hydrochloric Acid Isoproterenol,HAI)与牛血清白蛋白(Bovine Serum Albumin,BSA)的结合作用进行研究。实验结果显示,ppKCE法可同时测得HAI与BSA相互作用体系的结合速率常数kon和离解速率常数koff分别为163.60L·mol-1·s-1、3.50×10-2±0.95×10-2s-1(n=3)。ppKCE法和ACE法测得HAI与BSA的结合常数Kb分别为4.67×103 L·mol-1、6.02×103 L·mol-1,两种方法所得结果能够较好吻合。证明毛细管电泳法在药物-蛋白相互作用研究领域的可靠性,可用于测定药物与蛋白的相互作用,从而用于新药筛选研究。

生姜中姜黄素的高效液相色谱-质谱法检测

目的建立一种测定生姜中姜黄素含量的简便、准确、抗干扰能力强的高效液相色谱法(HPLC),同时用液相色谱-质谱联用法(HPLC-MS)确定其存在。方法用乙醇对生姜中姜黄素进行提取,用HPLC法测定含量。色谱条件:Kro-masil C18柱(150 mm×4.6 mm,5μm);流动相:乙腈∶水(含8%冰醋酸)=49∶51;流速为1.0 ml.min-1;检测波长430nm;柱温:室温。结果姜黄素线性范围为1 020.00～40 800.00 ng.ml-1(r=0.999 5),检测下限为785 ng.ml-1,日内精密度的RSD小于3%,加样回收率在96.00%～105.00%,RSD=3.35%。结论在1 020.00～40 800.00 ng.ml-1浓度范围内,峰面积积分值和浓度呈良好的线性关系。HPLC-MS法表明生姜提取液中存在姜黄素。方法学实验表明此方法具有操作简便、设备要求低、准确的特点,是一种生姜中姜黄素的比较完善的分析方法。

花椒籽油的提取及GC-MS分析

[目的]研究花椒籽油的最佳提取工艺,并对其脂肪酸种类及含量进行测定。[方法]分别采用索氏法和超声波法提取花椒籽油,采用单因素试验和正交试验确定2种方法的最佳提取工艺。采用气相色谱-质谱联用仪(GC-MS)对提取的花椒籽油成分进行分析。[结果]索氏法提取的最佳工艺条件为以石油醚为溶剂,料液比1∶13,提取温度75℃,提取时间2.0 h;超声波提取的最佳工艺条件为以石油醚为溶剂,料液比1∶13,提取时间90 min。花椒籽油含有9种主要脂肪酸,不饱和脂肪酸含量较高。[结论]该研究为花椒籽油的开发和利用提供了理论依据。

松香在包囊材料中的应用

评述了松香在包囊材料中的应用,着重讨论了松香在化肥、药物、农药、染料和其它产品中作为包囊材料的应用进展和技术特点,如松香用在化肥、药物、农药的包囊材料中可提高其缓释效果;用在染料颗粒的包囊材料中可增强其光泽和着色性。

盐酸异丙肾上腺素与牛血清蛋白相互作用的光谱研究

本研究采用紫外和荧光光谱分析法研究了生理pH条件下盐酸异丙肾上腺素(HAI)与牛血清白蛋白(BSA)在不同温度(25℃和37℃)下的相互作用。实验结果表明,HAI使BSA紫外吸收峰增强,并使BSA的特征荧光峰猝灭,表明HAI与BSA形成结合物。HAI对BSA荧光猝灭机制为静态猝灭,属于单位点结合。25℃时两者之间的结合常数为7.41×103L·mol-1,ΔG为-22.10 kJ·mol-1,ΔH为25.86 kJ·mol-1,ΔS为940 J·mol-1。37℃时的结合常数为4.26×105L·mol-1,ΔH和ΔS与25℃时相同,ΔG为-33.41 kJ·mol-1。以上热力学参数表明HAI与BSA之间的结合属自发过程,两者之间的作用力以疏水作用为主。根据Fster非辐射能量转移理论计算出HAI与BSA间的结合距离为2.503nm。

附子在炮制中主要生物碱含量变化的研究

目的比较两种不同炮制方法对附子中生物碱含量的影响,并对陕西省周至人处理附子的科学性进行证明。方法采用酸碱滴定法测定总生物碱量,并采用一阶导数光谱法测定附子中3种主要生物碱的含量。结果煎煮可以减小附子中生物碱的含量,但变化很小;但与甘草合煎后生物碱总量及乌头碱、次乌头碱及新乌头碱等3种主要生物碱含量均显著降低,其中主要毒性物质乌头碱的含量减小了约64%。结论该研究对周至人大量食用附子而不中毒的现象进行了理论解释,并为附子的临床应用提供科学依据。

呋塞米-羟丙基-β-环糊精包合物的制备及增溶效果评价

采用包合法制备呋塞米与羟丙基-β-环糊精(HP-β-CD)包合物并对其包合常数等进行测定。配制HP-β-CD溶液,加入过量呋塞米制备包合物,使用红外光谱法和薄层色谱法对包合物进行鉴定,通过相溶解度法对HP-β-CD与呋塞米的相互作用进行考察。结果表明,相溶解度曲线为线性关系,表明两者之间为AL型包合,包合比例1∶1。包合常数随温度升高而增大。37℃、HP-β-CD浓度为0.486 5 mol/L时,呋塞米的增溶倍数可高达32.10倍。采用HP-β-CD包合法,可显著改善呋塞米的溶解性,为呋塞米新剂型的开发提供依据。

医学院校基础化学实验课程思政教学的探索

将思想政治教育融入专业课堂是实现立德树人教育、培养新时代社会主义接班人的重要渠道。本文阐述了在医学院校基础化学实验课程中开展课程思政的意义,并结合课程的特点,深入挖掘课程所蕴含的思政元素,从教学任务与目标、教学现状、思政案例设计、教学模式设计、形成性评价增加、线上实验教学平台建设、师德师风建设等多方面入手,为医学专业基础化学实验课程开展思政教育提供了方向,建立了一个相对完备的在高校非思政类课程中全程、全方位开展课程思政的教育教学体系,培养学生严谨的科学精神、实事求是的科学态度、良好的实验习惯、真诚协作的团队精神、自觉的环保意识,将社会主义核心价值观教育贯穿于课程始终,润物无声地立德树人。

酶的固定化及化学修饰

综述了酶的固定化与化学修饰方法 ,对改善酶在工业应用时的各种性质 ,使酶制剂实现大规模工业应用具有积极的意义。

毛细管无胶筛分电泳中一种DNA定量分离模型的优化讨论

对已建立的交缠聚合物溶液中DNA定量分离模型的影响因素,如DNA尺寸、电场强度、聚合物性质及聚合物质量浓度等进行了讨论,并就该模型对聚合物介质选择的指导性进行评价。实验证明,DNA链越长,电泳迁移的时间越长;聚合物相对分子质量越高,越利于长链DNA的分离;筛分聚合物质量浓度越高,DNA分离时所需的迁移时间越长;快速分离要求使用较大的场强,而基于对大片段DNA的有效分离则应限制高场强的使用。该模型还可用于计算DNA分离的最佳聚合物质量浓度,结果表明高质量浓度聚合物有利于DNA的筛分。以上实验结果和模型预测的结论一致,对DNA电泳分离模型的研究有较大的促进作用,对毛细管无胶筛分电泳实验参数的选择和优化具有一定的指导意义。

脱氧核糖核酸的毛细管无胶筛分电泳迁移规律研究

本文研究了不同因素对脱氧核糖核酸(DNA)毛细管电泳迁移行为的影响。采用毛细管无胶筛分电泳法,对不同片段长度DNA进行分离检测,考察DNA片度长度、电场强度、聚合物浓度及分子量等因素对DNA迁移行为的影响。实验结果显示,DNA迁移时间随其长度的增加而延长;电场强度越高,DNA迁移时间越短,分离效果变差;DNA在高浓度聚合物介质中的迁移时间较低浓度中延长;聚合物分子量越高,DNA迁移时间越长。基于对大片段DNA的分离效果考虑,毛细管无胶筛分实验中应限制高场强的使用;为了实现较小DNA片段的满意分离,应使用分子量较小的筛分介质,反之亦然。

盐酸异丙肾上腺素与牛血清白蛋白相互作用

采用荧光猝灭法和毛细管区带电泳法研究了盐酸异丙肾上腺素(IH)与牛血清白蛋白(BSA)的相互作用。荧光猝灭法研究表明:IH对BSA有较强的荧光猝灭作用,根据Stern-Volmer方程得到猝灭速率常数(K_q)为2.53×10^(13) L·mol^(-1)·s^(-1),该荧光猝灭属于静态猝灭。采用位点结合模型公式计算得结合常数为1.72×10~4 L·mol^(-1),结合位点数n为1;毛细管区带电泳法研究表明:IH与BSA的结合常数为4.07×10~4 L·mol^(-1),结合位点数n为1。

毛细管电泳柱及微流控芯片通道涂层的发展

综述了用于毛细管电泳柱和微流控芯片通道的涂层材料和涂层技术的发展状况,以及涂层对分离效果和分离结果重现性的影响。将涂层材料按照动态和静态分类,静态涂层又分别按照均聚物、共聚物、杂环类等进行讨论;综述了交联反应法、溶胶 凝胶法、辐照法、化学沉积法等涂层的制备方法。对毛细管电泳柱和微流控芯片通道的改良具有一定的参考价值。

PDMS微芯片吸附牛血清白蛋白的研究

The adsorption of protein on poly dimethylsiloxane(PDMS) which often used to make microchip was studied in this paper.Effects of the pH and concentration of buffer solution,three surfactant concentration,and time on the adsorption of bovine serum albumin(BSA) were investigated in detail.The absorbency of BSA was measured with the ultraviolet spectrophotometer.The results showed that the adsorption of BSA reached minimum when buffer solution pH was 7.0 and concentration was 40 mmol/L.The suppression of protein adsorption was best when concentration of surfactant Brij35,sodium dodecalkyl sulfate(SDS),and methyl cellulose(MC) was 0.04%,0.04%,and 0.06%,respectively.The absorbency of BSA showed fluctuation with time.All results would be useful to the surface modification of PDMS microchip and the reducing of protein adsorption.