万寿菊类胡萝卜素裂解双加氧酶基因CCD1克隆与表达分析

【目的】克隆万寿菊(Tagetes erecta L.‘Scarletade’)类胡萝卜素裂解双加氧酶基因CCD1(TeCCD1),分析其序列特征和表达特性,为阐明其在类胡萝卜素降解途径中生物学功能及进一步探讨万寿菊花色形成机理提供理论基础。【方法】依据万寿菊花蕾转录组数据,利用同源序列比对结果设计引物,结合RT-PCR技术克隆获得万寿菊CCD1 cDNA全长,分析其序列特征;利用Real-time PCR分析舌状花未开花蕾、半开花蕾、开放的头状花序和完全开放的头状花序4个不同发育时期的基因表达特性。【结果】克隆获得万寿菊CCD1(Gen Bank登录号:KX557488)的cDNA全长序列为1 746 bp,编码区长度1 626 bp,编码541个氨基酸。蛋白质分析表明TeCCD1为不稳定蛋白,不含信号肽,属RPE65超家族(登录号:PF03055),包含CCD家族保守结构域,主要定位于细胞质。万寿菊CCD1核酸序列与除虫菊CCD1同源性最高,为89%;氨基酸序列分析表明万寿菊CCD1与除虫菊CCD1同源性高达93%,与其他19个不同种属的CCD1同源性在75%—83%,说明TeCCD1是高度保守的基因;系统进化树分析显示TeCCD1的进化基本符合植物分类学的进化规律,并具有明显的种属特征,万寿菊与菊科同源基因亲缘关系最近。Real-time PCR分析表明TeCCD1在舌状花发育过程中均有表达,随舌状花的开放逐渐升高,S4期达到最大值。【结论】克隆获得万寿菊舌状花的CCD1,是典型的CCD家族成员,为高度保守的基因,主要定位于细胞质,万寿菊舌状花颜色变浅可能与CCD1表达量增加导致类胡萝卜素降解有关。

万寿菊类胡萝卜素裂解双加氧酶基因CCD4b的克隆与表达分析

为探讨万寿菊类胡萝卜素降解过程中CCD4b的功能,以万寿菊(Tagetes erecta L.)‘Scarletade’品种舌状花为试材,利用同源基因克隆获得CCD4b,命名为TeCCD4b (GenBank:KY450708)。序列分析表明TeCCD4b cDNA全长为1 725bp,编码区长度1 392bp,所编码的产物含463个氨基酸,主要定位于质体膜,属RPE65超家族,包含CCD家族保守的结构域;同源分析表明TeCCD4b与向日葵HaCCD4-L、案头菊CmCCD4b同源性最高;系统进化树分析显示TeCCD4b与HaCCD4-L和CmCCD4b亲缘关系最近,与其他物种的CCD4和CCD4a存在差异,表明TeCCD4b在进化过程中保守性不强,不同种属之间具有明显差异,基本符合植物的进化规律;荧光定量PCR结果显示TeCCD4b在舌状花发育过程中均有表达,且与万寿菊花色变化基本一致,表明万寿菊舌状花颜色变化可能与TeCCD4b表达量高低相关。

万寿菊研究现状及发展趋势

万寿菊是提取叶黄素的优质材料,是重要的经济花卉,具有巨大的开发利用价值。本文从形态结构、栽培技术、育种方法和叶黄素提取及应用等方面综述了万寿菊国内外的研究现状,并展望了万寿菊发展前景。

万寿菊营养器官及舌状花解剖结构的研究

利用徒手切片、石蜡切片和半薄切片技术,使用光学显微镜观察了万寿菊营养器官(根、茎、叶)的显微结构和不同颜色舌状花发育过程中显微结构的变化情况。结果表明:(1)万寿菊营养器官结构表现出双子叶植物结构特点,根由表皮、皮层和维管柱组成,木质部为多原型,木质部与韧皮部相间排列;茎由表皮、皮层、木质部、韧皮部和髓组成;叶由上表皮、下表皮、栅栏组织和海绵组织组成。(2)万寿菊舌状花的结构由上表皮、下表皮和中层组织三部分组成,表皮细胞无气孔,上表皮细胞呈圆锥型凸起,中层组织无栅栏组织和海绵组织之分,与成熟叶片比较差异显著。(3)深橙色万寿菊品种‘猩红色’舌状花的上表皮、下表皮和中层组织均有明显的橙色色素分布,淡黄色品种‘非洲菊’舌状花上、下表皮细胞没有发现明显的色素积累,中层组织有颜色很浅的色素分布,表明花色色素可以分布于万寿菊舌状花的全部组织细胞中。同一品种不同发育时期舌状花上表皮及中层细胞形状发生了改变,推测此变化可能是花色变浅的原因之一。

矮牵牛叶肉原生质体分离条件的优化

以幼嫩叶片为试材,探讨了渗透压(甘露醇浓度)、水解酶浓度、酶解时间等关键因素对矮牵牛叶肉原生质体分离效果的影响。研究结果表明,以2%纤维素酶R-10+0.2%果胶酶Y-23+0.4%离析酶R-10+20 mmol/L 2-(N-吗啡啉)乙磺酸(MES)+0.1%牛血清白蛋白(BSA)+0.11%无水氯化钙(CaCl_2)为酶解液,在0.5mol/L甘露醇浓度下静置酶解5h,1 100r/min离心2min沉淀原生质体,原生质体产量及活性分别为2.90×106个/g和88.1%,可为后续原生质体培养及融合提供材料。

基于P2P网贷的中小企业融资问题研究

互联网结合于金融业,持续改造金融业的成长模式,并继续发扬新品,最先是网上银行、然后是第三方支付、再到先进的P2P,这冲击出的一幅幅景象令人赏心悦目。在P2P大热之后,一些公司又接着开启新颖模式,对准常规金融涵盖较低的中小企业一类,尽量开发互联网信息对称和透明的特点,为其给予借贷服务。

中国法律的刑罚对人们心灵的教化作用

通过一劫持犯被劝说,人质被当场解救所引发的关于中国的法律对人们心灵的教化作用的思考。法律的作用不只是惩罚,惩罚只是一种手段,立法者希望能通过这种手段使人们得到教化,让人们从心灵深处认识到自己的罪过,改过自新,以此来减少甚至杜绝犯罪的发生。

微型月季低温处理后生理指标变化及其耐寒性评价

以6个微型月季品种带叶枝条为实验材料,置于-10、0、5、20℃温度条件下处理24h,测定不同品种叶片相对电导率、含水量、脯氨酸含量、丙二醛含量和可溶性糖含量等不同生理指标,并结合露地生长形态观察综合判断植物耐寒性的强弱。综合比较结果表明,‘白珂斯特’抗性较强,‘紫微星’、‘金太阳’、‘冬梅’次之,‘小女孩’和‘矮仙女’较差,可为上海乃至长三角地区筛选耐寒性强、观赏性高的优质微型月季品种和合理栽培提供参考。

药用矿物及其在河北省分布概况

药用矿物在中医药上的应用,不仅历史悠久,而且占有重要的地位。同时,也是重要的矿产资源。根据记载的药用矿物,参考有关文献,本文对药用矿物尤其是河北省有产出的药用矿物的名称、地质产状、产地等方面作了初步探讨,以期通过地质勘查对河北省矿物药的发展提供资源保障。

低年龄阶段体育课中生活化内容情境教学的设计

低年龄组体育教学以模仿和游戏为主的形式,为了有效提高学生的对体育课堂的兴趣,不断让学生在日常生活中的"五味"融入课堂,让体育课堂生活化、游戏化、形象化,从而达到教学目的。

师范类实习生体育课堂教学能力培养的实效、问题与策略研究

教育实习是师范类大学生一门重要的实践课堂,是奠定学生向教师角色转变的重要环节和桥梁,是师范生和在校教师交流提高的平台,同时也是教师能力提高的重要途径。但由于教育实习过程中实习生容易出现多种表达能力方式欠缺、动作示范能力欠缺、个人知识积累不够足和管理组织能力有待进一步提高等问题,因此,通过对教育实习生实施转变角色,建立教学自信心,组织开展总结,创造教学条件等内容,从而使体育教育实习生的教学能力不断提高,以达到在体育教师岗位上能力素质。

矿产资源勘查工程的要点及合理布置探讨

在时代进步的同时,我国面临着巨大的能源消耗,成为我国工业发展需要解决的重要问题之一。对此,我国开始加大了对于矿产资源的开发力度,以期为社会工业发展提供不竭的动力。但是,在矿产资源的开发过程中,需要很多环节的操作才能实现矿产资源得到最大程度的开发,这意味着矿产资源的勘查工程具有较高的难度。需要高水平的专业勘查人员熟悉基本的勘查知识,具有丰富的勘查经验,才能将相关的勘查技术应用得当,从而保障矿产资源勘查工作的顺利进行。本文就勘查工作的实际情况展开了论述,分析了矿产资源勘测工程的要点环节,为矿产资源勘查工程提供一定参考。

我国土壤污染研究现状及发达国家土壤污染修复经验对我国的启示

土壤重金属污染日益严重,已成为一个世界性问题。针对我国土壤污染状况,为切实加强土壤污染防治,逐步改善土壤环境质量,通过吸收国外土壤污染修复先进经验,开展适用于我国的土壤污染调查、评估、风险管控、检测、修复、效果评价、监测等方面的研究,建立健全我国土壤修复标准和政策法规体系,对国家土壤安全建设具有重大意义。

国家科技基础条件平台下河北省基础地质数据库的构建初探

国家科技基础条件平台是国家科技创新体系的重要组成部分,其充分运用信息、网络等现代技术,对科技基础条件资源进行战略重组、系统优化和资源整合,促进全社会科技资源高效配置和综合利用,提高科技创新能力和科技共享能力。通过分析研究,在此平台上可以建设面向公众、适于网站发布的基础性、公益性基础地质数据库系统为目的河北省基础地质数据库.构建七大基础地质数据库,从而提高基础地质数据服务服务社会的水平和能力。

新形势下对河北省地质勘查工作的思考

地质勘查工作是保障国家资源安全、服务生态文明建设的基础性、先行性工作,在推动经济社会发展、满足人民日益增长的美好生活需要方面发挥着越来越重要的作用。本文收集2009-2018年共十年的全国《地质勘查行业通报》和《河北省地质勘查成果通报》数据,从河北省从业人员数量、地质勘查市场变化、地质勘查资金投入金额、勘查结构、服务区域变化等情况进行分析,总结出三方面的河北省地质勘查趋势+结合目前的新形势,提出了河北省地质勘查工作六方面的发展方向.