猪源产肠毒素大肠杆菌菌毛基因多重PCR检测方法的建立及初步应用

为建立一种可同时快速准确检测5种菌毛类型的产肠毒素大肠杆菌(ETEC)的多重PCR方法,本研究首先通过大肠杆菌特异性基因uidA的PCR方法鉴定大肠杆菌;选取国内外流行的携带K88、K99、F18ab、F18ac和F41菌毛基因的ETEC菌株,根据这5种菌毛基因的保守序列设计5对特异性引物,通过对反应条件的优化,建立了能同时检测上述5种菌毛ETEC的多重PCR方法。uidA基因的PCR结果显示,除了大肠杆菌有特异性扩增外,其他细菌均不能扩增,可以用于大肠杆菌的鉴定。菌毛多重PCR优化后的反应条件为:各混合菌毛基因引物终浓度为3.2μmol/L,各大肠杆菌混合DNA模板浓度为2.5×107拷贝/μL,退火温度为58℃;特异性试验结果显示,该多重PCR方法能够特异性扩增5种ETEC的菌毛基因,而猪源沙门氏菌、猪源链球菌和大肠杆菌DH5α未见扩增,特异性强;敏感性试验结果显示,该方法对携带5种菌毛的大肠杆菌基因组DNA的最低检测量均为2.5×104拷贝/μL,敏感性较高。采用uidA基因的PCR方法检测了河北省腹泻致死仔猪脏器分离的101株细菌,结果均为大肠杆菌。采用该多重PCR方法和单一PCR方法分别检测这101株大肠杆菌的菌毛类型,结果显示二者的符合率为100%;检测结果还显示,河北省仔猪腹泻大多数为携带3种及3种以上菌毛的ETEC混合感染所致,且ETEC携带的优势菌毛类型为K88、K99、F18ab和F41。综上所述,本研究为猪源ETEC菌毛分型及该病的临床诊断、流行病学调查提供了快速准确的鉴定方法。

基于阈值法的数字集成电路测试仪的研制

研制了一种基于阈值法的数字集成电路测试仪,用于检测74LS10、74LS138等74LS系列芯片的性能。该测试仪采用两片STM8型微控制器作为核心单元,通过测试向量集来判断芯片的性能,测试结果输出到LCD显示屏中。实际测试结果表明:该测试仪操作灵活,测试速度快,能准确检测芯片的状态,满足芯片诊断的需求。

产肠毒素大肠杆菌F41感染猪小肠上皮细胞初期lncRNA的表达谱分析

本研究旨在分析产肠毒素大肠杆菌(enterotoxigenic Escherichia coli,ETEC)感染猪小肠上皮细胞(IPEC-J2)后,在感染初期细胞内长链非编码RNA(long non coding RNA,lncRNA)的表达谱变化,探究lncRNA在ETEC感染初期所起到的调控作用。使用ETEC F41感染IPEC-J2,在感染前和感染初期(感染后4 h)收集细胞,通过Illumina Hiseq Xten平台进行高通量测序,共发现lncRNA 9975条。感染初期与感染前相比,共发现100条差异表达lncRNA,其中40条表达上调,60条表达下调。通过miRanda-3.3a和psRobot_v1.2软件共同预测差异表达lncRNA的靶基因,并对差异表达lncRNA的靶基因进行GO功能和KEGG通路富集分析。结果显示,感染初期差异表达lncRNA的靶基因显著富集于细胞核、核仁、代谢过程调控及发育过程等GO功能条目中。KEGG分析表明,感染初期差异表达lncRNA的靶基因主要富集在PI3K-Akt信号通路、肌动蛋白细胞骨架调节、黏附斑及细胞周期等信号通路。利用实时荧光定量PCR随机验证了5条差异表达lncRNA,结果与测序分析中表达变化趋势一致。本研究对ETEC感染IPEC-J2细胞初期的lncRNA表达谱进行了差异分析,为深入探究lncRNA在ETEC感染初期中的作用机制提供了参考依据。

H大学汉语国际教育硕士培养方案变化初探

本文主要以H大学文学院2019级汉语国际教育硕士和2020级汉语国际教育硕士的培养方案为研究对象,通过对比分 析法和数据统计法,主要从培养单位、培养规模、培养年限、课程设置等角度,分析H大学汉语国际教育专业硕士人才培养 方案的变化,期望对未来H大学汉语国际教育专业发展提供些许帮助。

一位研究生的求职之路

我目睹了一位研究生求职的艰难之路,这位研究生就是我爸爸。我爸爸原先在罗山县重点高中当英语老师。后来爸爸凭着自己的努力,考取了河南大学哲学系逻辑学硕士研究生。这期间,爸爸边读书边做助教或家教,挣钱以补贴家用,我看到了他读研的不容易。

“后疫时代”:信息技术在汉语国际教育中的应用

本文以黑龙江大学文学院 2019 级汉语国际教育硕士 2019-2020 学年第二学期研究生专业课程线上教学情况为例,主要从课程性质、课时安排、授课形式、授课平台以及线上授课相关配套办法及措施角度,分析“后疫时代”信息技术在汉语国际教育中的应用。

新时期谚语的传播与保护研究

谚语是通俗易懂的群众语言,是大白话,更是大实话,是民众的丰富智慧和普遍经验的规律性总结.在新时期的国家外交话语体系中,谚语发挥了重要的作用.疫情之下的谚语传递关爱,传递温暖,传递情谊,传递力量.作为中国文化的瑰宝,应该在文献查考和田野调查的基础上建立谚语电子资源库,进行系统的、全面的理论研究,并在进行细致、深入分析的基础上,重点关注其语用特点,挖掘了谚语传承社会文化的教化功能.