稻纵卷叶螟P450基因CYP6K1的克隆与序列分析

为探讨稻纵卷叶螟产生抗药性的机制,防止或延缓稻纵卷叶螟抗药性的产生,从稻纵卷叶螟(Cnaphalocrocis medinalis)4龄幼虫中肠提取总RNA,用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)扩增稻纵卷叶螟P450基因CYP6K1,将其克隆到pMD18-T载体上进行序列测定。结果表明,该基因的cDNA片段长度为1 005 bp,编码334个氨基酸残基,包含昆虫细胞色素P450的4个保守结构域。同源性分析表明,稻纵卷叶螟CYP6K1与已报道的印度跳蚁(Harpegnathos saltator)和佛罗里达弓背蚁(Camponotus floridanus)的CYP6K1氨基酸序列同源性分别为52%和51%。

掌叶半夏凝集素基因表达载体的构建与鉴定

从掌叶半夏(Pinellia pedatisecta Schott)块茎中提取总RNA,反转录合成cDNA。根据GenBank中已报道的天南星科凝集素基因序列,设计带有酶切位点的表达引物,用RT-PCR方法扩增出掌叶半夏凝集素(Pinellia pedatisecta agglutinin,PPA)基因。PPA经双酶切后与表达载体pGEX-6P-3连接,构建pGEX-PPA重组表达载体。通过PCR、双酶切及测序鉴定,结果表明,重组载体pGEX-PPA构建成功,为进一步进行PPA的原核表达及其功能研究奠定了基础。

补料策略优化促进乳酸乳球菌HB03发酵合成Nisin

为提高乳酸乳球菌HB03发酵合成Nisin的效率,本研究基于乳酸乳球菌发酵生长期间存在的氧化胁迫效应和胞外氨基酸消长规律,分析了肽水解酶系、UMP从头合成和肽聚糖合成代谢在转录组水平的表达差异,确定对数中后期Nisin合成限制因素为半胱氨酸(cysteine,Cys)和精氨酸(arginine,Arg)供应不足,并通过氨基酸单因素和碳氮源补加优化,确定10 L发酵罐水平优化的补料策略为:11、13.5、17、19.5 h分别加入0.15 mmol/L的Cys,12 h补入蛋白胨(15 g/L),10~24 h补入蔗糖(1.5 g/(L·h)),12~21 h流加Arg(0.25 g/(L·h))。在此条件下Nisin效价达到了8963 IU/mL,比只补加Cys发酵效价(6993 IU/mL)提高了28.2%,研究结果可为Nisin工业发酵提供重要参考。

民事公益诉讼与原告资格认定研究

近年来，伴随着我国经济的高速发展，社会矛盾问题日益凸显，尤其是在民事诉讼领域内，个人利益、集体利益和社会公共利益之间的矛盾冲突愈演愈烈。因社会公共利益在社会范围内具有举足轻重的重要意义．因此维护公共利益显得至关重要．但同时基于现代民主法治国家对人权的尊重和保障．个人利益的维护亦不可忽视。在此背景下，民事诉讼领域内的公益诉讼制度引起了学者们的广泛关注。本文试以民事公益诉讼的理论探讨为前提．着重解决民事公益诉讼的原告资格问题．特别是检察机关在民事公益诉讼中的特殊地位探讨，并提供相关的意见和建议。

我国非法证据排除规则的完善

作为刑事诉讼领域的重要制度，诞生于20世纪初的非法证据排除规则已存续近百年。尤其是在民主法治高度发达的今天，尊重和保障人权的理念早已在世界范围内达成了共识，而非法证据排除规则作为保障人权的有利武器，也已被世界各国接受．并且不同程度的运用到司法实践中。然而我国对于该制度的研究尚处于初始阶段．2010年两个证据制度的规定在我国正式确立了非法证据排除规则；2011年的公布的《刑事诉讼法修正案（草案）》，非法证据排除规则入律更具有里程碑式的意义。本文拟对草案相关条款进行分析，与发达国家的制度进行对比研究．以资有益于该舶来品在我国更好的实现本土化。

培养基与分割发酵优化促进Nisin生物合成

为了提高乳酸乳球菌(Lactococcus lactis)细胞生长和乳酸链球菌素(Nisin)的合成效率,以正交优化法研究培养基分批发酵和分割发酵方式对Nisin生物合成效率的影响。结果表明,优化发酵培养基配方为:5%蛋白胨,3%蔗糖,2%玉米浆,1%酵母浸粉。在此优化条件下,摇瓶培养(11 h)峰值生物量为4.9×10^(9) CFU/mL,较对照提高43%;10 L发酵罐分批发酵峰值生物量、Nisin效价及Nisin合成速率v_(q)分别为7.75×10^(9) CFU/mL、2573 IU/mL、151.4 IU/(mL·h),较优化前分别提升38.0%、56.6%、38.2%。分批发酵培养18 h Nisin达到峰值后[v_(q)为147 IU/(mL·h)],以不同比例分割发酵并继续培养7 h,第二次分割(25%)为Nisin合成最适发酵方式,其Nisin平均合成速率达到294 IU/(mL·h),较分批发酵提高了100%。

立井井筒通过积水老巷注浆堵水施工技术

随着煤矿开采向深部拓展,新建接替立井井筒在施工过程中不可避免地需要穿过一些废弃积水老巷,老巷内通常存在有毒、有害气体和大量积水,井筒在施工时强行揭开,会危及施工人员安全,降低施工质量。通过分析、论证,采用水下定点注浆堵水、壁后注浆加固、加强支护强度等方案顺利通过积水老巷,保证了井筒的正常掘进,实现了安全生产。

深部开拓巷道岩爆防治技术

岩爆是地下工程施工中常见的动力破坏现象,易造成掘进工作面严重破坏、设备损毁和人员伤亡。截至目前,平煤神马集团有2个矿井发生过岩爆。介绍了埋深达1 135m的平煤天安四矿三水平进风立井井底车场巷道施工中,岩爆发生的现象及成因、防治方法及效果。

立井井筒可缩层施工技术

平煤股份四矿三水平进风井为专用进风井筒,设计为抗变形结构,采用小煤柱进行保护。为解决因开采造成地层下沉对井筒支护的影响,在井筒施工期间增加19道可缩层。结合具体施工条件,对可缩层设计概况、施工工序、施工方法进行分析、论证,合理选择了施工方案,实现了安全、快速、优质施工。

建井期间排水系统的设计及实施

在建井期间及二期施工期间,排水系统的设计应用一直是矿井建设初期快速施工的重要前提和保证,特别是井筒施工落底转入二期平巷掘进施工期间,排水系统的转换是保证建井二期掘进工程顺利施工的关键。在中平能化集团二矿三水平回风井立井及二期掘进施工期间,优化排水系统设计,合理选择、分期安装排水设备,保证了矿井建设时期的正常排水,加快了矿井建设施工速度,取得了良好效果。

机械化配套装备在超千米井筒施工中的应用

平煤建工集团建井三处在平煤天安四矿超千米立井井筒施工中,采用大型凿井机械化配套装备,加强施工组织和管理,坚持正规循环作业,实现了安全、快速施工,对超千米立井施工具有参考价值.