马家柚叶绿体基因组特征及其密码子偏好性分析

【目的】为了明确马家柚叶绿体基因组结构特征及其与同属类群的系统发育关系,阐明马家柚在柑橘属中的分类地位,对马家柚叶绿体基因组的特征及其密码子的偏好性进行分析。【方法】采用DNBSEQ-T7测序平台对马家柚进行测序,采用Noveplastys、CAP3、GeSeq和tRNAscan-SE软件对马家柚叶绿体基因组进行组装、注释;采用CGViewServer、MISA、REPuter、CodonW、Gview、IRscope、NADnaSP6.0软件对马家柚叶绿体基因组特征进行分析;采用MAFFT 7.0和FastTree 2.1.10软件对马家柚及其85个同科种和山小橘属3个外群种叶绿体基因组进行序列比对和建树。【结果】马家柚叶绿体基因组全长160186 bp,包括1个大单拷贝(LSC)区、1个小单拷贝(SSC)区和2个反向重复(IR)区,为典型闭合环状双链结构。马家柚叶绿体基因组共注释到133个功能基因,包括88个编码蛋白(CDS)基因、8个核糖体RNA(rRNA)基因和37个转运RNA(tRNA)基因。马家柚叶绿体基因组共检测到79个简单序列重复(SSR)和34个长序列重复(Longrepeat)。马家柚叶绿体基因组非编码区的变异程度高于基因编码区,LSC区的变异性>SSC区>IR区,SC/IR边界较为保守。马家柚叶绿体基因组平均ENC值为48.02,密码子偏好性较弱。马家柚叶绿体基因组密码子使用偏好性主要受自然选择的影响,受内部突变的影响小。马家柚叶绿体基因有10个最优密码子(AAU、UGU、AAA、UUU、GCU、GGA、CCA、ACU、CGU、AGU),均以A、U结尾。马家柚与西双版纳东试早柚(KY055833,来源地:云南)、日本夏橙(ON193075,来源地:韩国)、福建六月早蜜柚(MT527726,来源地:福建)、福建琯溪蜜柚(MN782007,来源地:福建)有亲缘关系。【结论】马家柚是一个柑橘属中较为独特的品种,该研究结果为进一步研究马家柚的遗传资源、物种资源鉴定和系统发育分析提供了理论依据。

基于PSR模型分析襄阳市空气质量变化对社会经济发展的响应

2021年12月30日,襄阳市政府为应对生态环境与社会经济发展的突出矛盾,正式贯彻实施《襄阳市生态环境保护“十四五”规划》,其中明确提出加快生态文明建设,率先实现绿色高速发展。近些年,襄阳市经济发展走在省域前列,但是年际大气质量均位于湖北各市区末位。此研究立足于PSR模型,通过影响指标对大气环境质量与社会经济发展指标之间的相关性进行分析,构建“大小双循环”生态环境治理体系,致力于改善生态环境,打赢蓝天保卫战,助力襄阳乃至中部地区实现“绿色崛起”。

对海军舰艇军医职业教育的思考

党的十八届三中全会提出,要“深化军队院校改革,健全军队院校教育、部队训练实践、军事职业教育三位一体的新型军事人才培养体系”。原四总部提出了《关于加快发展军事职业教育的实施意见》,在《中央军委关于深化国防和军队改革的意见》中也明确提出,要“健全军事职业教育体系,构建全员全时全域军事职业教育平台”。

不同剂量电离辐射对小鼠睾丸的损伤效应

目的探讨不同剂量电离辐射对小鼠睾丸的损伤效应。方法120只雄性昆明小鼠，随机分为对照组，2．5Gy、3．5Gy、4．5Gy和5．5Gy ^60C0γ射线照射组，每组24只。^60C0γ照射后3d、7d和14d测定睾丸指数、附睾指数、精子数和精子畸形率，苏木精一伊红染色法观察小鼠睾丸组织病理学变化。结果辐照后3d，照射组小鼠附睾指数上升，随后下降，其中辐照后14d，4．5Gy和5．5Gy组与对照组或同组3d时比较均差异明显（P〈0．01或P〈0．05）；各照射组睾丸指数在辐照后7d和14d均明显下降（P〈0．01或P〈0．05），与辐照后3d比较5．5Gy组下降明显（P〈0．01）。各照射组的精子畸形率在3d、7d和14d时均明显上升（P〈O．01或P〈0．05），其中5．5Gy组上升较快，精子数也下降明显（P〈0．01），5．5Gy组生精小管肌样细胞及基膜均模糊不清。2．5Gv组辐照后与对照组比较无明显差异。结论辐照对小鼠睾丸造成的损伤程度与辐照剂量呈正相关，其中3．5Gy和4．5Gy是较适合制作小鼠睾丸辐射损伤模型的剂量。

海军医学科研干部军事训练初探

军事训练作为军队和平时期最基本的实践活动,与提升部队战斗力、提高人才素质等方面具有广泛而深刻的联系。着眼于海军医学科研干部军事训练的基本内容与要求,对军事训练的意义进行了较为详细的阐述,并就军事训练的具体方法进行了探讨,对促进军队建设、提高海军医学科研干部素质、增强海上卫勤保障能力具有一定的指导意义。

2种驱鲨方式对海水水质及海水鱼类急性毒性影响

本研究采用模拟生态学的方法,选取化学驱鲨剂和电脉冲驱鲨装置2种驱鲨产品,以牙鲆(Paralichthy solivaceus)、许氏鲆鲉(Sebastes schlegelii)和斑石鲷(Oplegnathus punctatus)幼鱼鱼苗为测试对象,测定不同驱鲨方式使用后对海水水质和鱼苗生理及存活的影响。在不投放鱼苗的水槽中使用相关驱鲨产品测定水质指标的变化。结果显示,化学驱鲨剂的溶解和释放可显著降低水体的透明度和pH(P<0.05),而电脉冲驱鲨装置对水质指标无显著影响。在3种鱼类的养殖水槽中使用相应驱鲨产品,测定结果显示,对照组中幼鱼全部正常,而化学驱鲨剂组的幼鱼鳃和鱼鳍等器官迅速被染成蓝色,幼鱼在15 min内的死亡率达到100%;电脉冲驱鲨装置组的幼鱼除了在设备启动瞬间受到惊扰出现躲避行为外,很快就恢复到自然活动状态,没有出现死亡。由于化学驱鲨剂造成急性死亡,化学驱鲨剂组3种幼鱼的血常规指标无显著变化,而电脉冲驱鲨装置组幼鱼的红细胞和白细胞数量显著升高;化学驱鲨剂组实验幼鱼血液氯离子含量、血糖(GLU)和碱性磷酸酶(AKP)活力等指标显著升高,而血白蛋白(ALB)含量显著降低;电脉冲驱鲨装置组中,牙鲆的GLU和谷丙转氨酶(GPT)活力显著升高,其他幼鱼的血液生化指标无显著差异。组织病理学结果显示,化学驱鲨剂组3种幼鱼鳃、肝脏、脾脏和心脏的器官结构均受到组织损伤。研究表明,与化学驱鲨剂相比,电脉冲驱鲨装置对海水水质的影响较小,且对主要的海水鱼类的毒性作用较小,是一种更为环保的驱鲨方式,相关研究结果将为人类在海洋探索活动中驱鲨方式的选择提供科学依据。

胎猪BMSC体外构建软骨的实验研究

目的比较胎猪骨髓间充质干细胞(Bone Marrow Mesenchymal Stem Cells,BMSCs)和成年猪BMSCs构建软骨能力的差异,寻找合适的同种异体组织工程软骨种子细胞来源。方法通过剖腹产手术获得胎龄为70 d的胎猪,胎猪骨髓液贴壁培养获得胎猪BMSCs;抽取成年猪骨髓液,经贴壁培养法获得成年猪BMSCs。两种细胞体外扩增培养后,观察第3代细胞形态,并进行成骨、成脂和成软骨诱导。分别取两种细胞以1×108cells/mL的细胞终浓度,接种于聚乳酸包埋的聚羟基乙酸支架,体外诱导培养8周后取材。通过大体观察、糖胺聚糖(GAG)含量测定、总胶原含量测定、组织学,以及免疫组化等方法,对两种细胞构建的组织工程软骨的相关生物学特性进行比较。结果胎猪BMSCs比成年猪BMSCs具有更好的增殖和成骨、成脂和成软骨能力。胎猪BMSCs构建的软骨有良好的软骨外观,而且GAG含量和总胶原含量均高于成年猪BMSCs构建的软骨(P<0.01)。组织学和免疫组化显示,胎猪BMSCs构建的软骨组织结构致密,基质及Ⅱ型胶原显色程度均明显强于成年猪BMSCs构建的软骨。结论胎猪BMSCs是组织工程软骨较好的种子细胞来源。

羊栖菜多糖的提取及纯化

目的:分离纯化羊栖菜多糖。方法:采用水煮醇沉法、酸煮醇沉法及乙醇脱脂后水煮醇沉三种方法提取羊栖菜粗多糖。利用Sevag法结合胰酶消化去蛋白,SephadexG200分离纯化多糖。结果:三种方法提取获得粗多糖含量分别为:24.35%、23.87%和17.87%。分子筛层析分离得到两个在A620和A280重合的组分,其硫酸根的含量分别为8.95%和3.92%。结论:从羊栖菜粗多糖分离得到两个含有硫酸基的蛋白聚糖。

Corvis眼压测量及其与角膜生物力学特性的相关性

背景角膜生物力学特性是角膜屈光手术安全评估的重要指标。Corvis是测量角膜生物力学特性的新型设备。目的观察角膜厚度、Corvis眼压测量值与角膜生物力学特性的相关性。方法采用前瞻性观察研究，纳入2013年8月至2014年2月在第三军医大学大坪医院野战外科研究所眼科拟行准分子角膜屈光术患者75例150眼，根据患者角膜厚度分为3个组：低角膜厚度组：角膜厚度501～530μm；中角膜厚度组：角膜厚度531～560μm；高角膜厚度组：角膜厚度561～590μm；每组25例50眼。采用单因素方差分析比较3个组间眼压、角膜厚度和角膜变形幅度（DA）的差异性。采用多元线性回归分析各组内DA与角膜厚度、眼压的相关性。结果低角膜厚度组与中角膜厚度组DA显著高于高角膜厚度组，差异具有统计学意义（P〈0．05）。3个组间眼压总体比较差异具有统计学意义（F=9．98，P〈0．05）。DA与眼压呈高度负相关（r=-0．84，P〈0．01），与角膜厚度呈负相关（r=-0．33，P〈0．01）。线性回归方程：DA=1．69—0．04×眼压（F=366．19，P〈0．05；t=-19．14，P〈0．01）。结论角膜屈光手术安全性的评估不能单纯以角膜厚度代替角膜生物力学特性，需参考眼压等因素的影响。

溴芬酸钠滴眼液应用于高度近视散光眼SBK术后的临床疗效观察

目的评估高度近视散光眼患者行前弹力层下准分子激光原位角膜磨镶术(sub-bowman keratomileusis,SBK)后应用0.1%溴芬酸钠滴眼液的有效性、安全性和耐受性。方法采用随机对照临床研究方法。收集2012年4月至2013年5月在本科拟行SBK手术的高度近视散光眼(-6.00 D≤等效球镜≤-10.00 D,散光≤-4.00 D)患者,采用随机数字表法分为试验组(37例,72眼)和对照组(36例,72眼)。试验组:术后前3 d用妥布霉素地塞米松眼液,每天4次,第4天换成溴芬酸钠滴眼液,每天2次,至术后1个月;对照组:术后前3 d用妥布霉素地塞米松眼液,每天4次,第4天换成氯替泼诺混悬滴眼液,每天2次,至术后1个月。比较2组患者术前及术后1 d、1周、1个月、3个月、6个月的裸眼视力、屈光状态、眼压及眼部症状等。结果试验组和对照组术后1 d、1周、1个月、3个月、6个月裸眼视力达到术前最佳矫正视力的眼数差异无统计学意义(P>0.05)。术前及术后1 d、1周、1个月、3个月及6个月,试验组与对照组2组间屈光状态比较差异均无统计学意义(P>0.05)。术前及术后1周试验组与对照组眼压差异无统计学意义(P>0.05)。术后1、3、6个月平均眼压值试验组均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。试验组无停用溴芬酸钠,对照组中有6眼1个月随访时因激素性高眼压停用氯替泼诺混悬滴眼液并加用降眼压药物。结论高度近视散光眼患者SBK术后应用溴芬酸钠安全、有效、耐受性好,能有效减少激素性高眼压的发生。

自体脂肪移植在面部轮廓改善与年轻化中的临床应用

目的探讨应用自体脂肪颗粒移植改善面部轮廓与面部老龄化的有效性。方法 2013年1月至2014年12月,共140例年龄19~65岁面部轮廓欠佳或面部老化的患者,采用肿胀吸脂术于大腿或下腹部进行脂肪抽吸,获取的脂肪进行过滤、纯化、漂洗等处理,用16~22 G钝头注射针将经处理的颗粒脂肪注射到额颞部、泪沟、颊区、鼻梁、鼻唇沟、颏部、唇部、耳垂及面部其他部位。结果随访3~18个月,130例一次手术即取得满意效果,10例行2次手术后达到满意效果。所有患者术后均无明显并发症,总体满意率为93.5%,1例出现术后面部局部硬结,5例术后泪沟处肿胀时间超过2个月,半年后基本恢复。所有患者术后均无蜂窝织炎或脂肪坏死发生。结论面部自体脂肪移植是一项简单、安全、有效的手术,能够自然地重塑面部轮廓、恢复面部容积和改善面部老龄化,绝大多数患者对术后的外观改善感到满意。

刺五加多糖对氧糖剥夺诱导神经元氧化损伤的保护作用

目的探讨刺五加多糖对氧糖剥夺诱导神经元氧化损伤的保护作用。方法培养PC12细胞,采用氧糖剥夺(OGD)及厌氧袋相结合法建立缺血诱导神经细胞继发损伤模型,电镜观察细胞形态,应用比色法测定细胞外液中乳酸脱氢酶(LDH)活力、MDA含量和SOD酶活力。结果与模型组比较,刺五加多糖干预后PC12细胞氧化损伤明显减轻,细胞SOD酶活力提高,细胞内MDA含量及LDH释放量降低。结论刺五加多糖对OGD引起的神经元样细胞的损伤具有保护作用,其作用机制可能与刺五加多糖具有抗氧化、清除自由基的作用有关。

半夏总生物碱对人肝癌细胞增殖的抑制作用研究

目的探讨半夏总生物碱(TATP)对人肝癌细胞株QJY-7703增殖的影响。方法采用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法及集落形成率实验,检测不同浓度的TATP对QJY-7703细胞株的生长抑制作用;应用单细胞凝胶电泳技术检测TATP导致QJY-7703细胞的DNA损伤情况。结果人肝癌细胞QJY-7703经TATP处理后,其体外增殖能力明显下降,且与药物的剂量、加药时间呈正相关,与对照组比较,差异均有统计学意义(24 h:对照组QJY-7703细胞增殖OD490=0.486±0.037,TATP组2.5、10.0、30.0、50.0 mg/L时的OD490分别为0.475±0.026、0.377±0.029、0.286±0.026、0.242±0.023;48 h:对照组OD490=0.793±0.046,TATP组2.5、10.0、30.0、50.0 mg/L时的OD490分别为0.747±0.028、0.497±0.025、0.287±0.021、0.207±0.020)(P<0.01或P<0.05)。单细胞凝胶电泳(SCGE)中,TATP组细胞尾DNA含量:对照组为(6.92±4.85)mg/L,TATP组10.0、40.0 mg/L时分别为(17.30±5.39)mg/L、(36.52±8.67)mg/L;尾长:对照组为(16.06±9.17)μm,TATP组10.0、40.0 mg/L时分别为(29.29±13.09)μm、(65.33±17.06)μm;尾动量:对照组为(0.97±0.34)μm,TATP组10.0、40.0mg/L时分别为(7.87±4.04)μm、(21.43±7.67)μm,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.01),且呈现浓度依赖性。结论在体外培养的条件下,一定剂量的TATP能明显抑制QJY-7703细胞增殖,其机制可能与DNA的损伤作用有关。

瘢痕内注射脂肪来源干细胞对兔耳增生性瘢痕的抑制作用研究

目的研究瘢痕内注射脂肪来源干细胞(ADSC)对兔耳增生性瘢痕的抑制作用及可能机制。方法选取12只新西兰大白兔,制作兔耳增生性瘢痕模型,随机平均分成3组,2周后各组右耳瘢痕内注射DMEM作为自身对照,左耳分别注射ADSCs、脂肪来源干细胞条件培养基(ADSCs-CM)及不作处理。注射前及注射后1、2、3周检测瘢痕增生情况,并于注射后3周取材,行组织化学及基因学检测。结果造模2周后,伤口均完全上皮化;DMEM注射及未处理组的伤口逐渐出现增厚、变红、变硬等增生表现,注射后3周时最为明显;ADSCs及ADSCs-CM注射组均未出现明显增生反应。取材后HE、Masson染色示,ADSCs及ADSCs-CM注射组瘢痕的胶原密度适中、排列整齐;对照及未处理组瘢痕可见大量致密、杂乱的胶原组织。基因检测发现,ADSCs及ADSCs-CM注射组瘢痕的α-SMA、CollagenⅠ表达显著低于对照及未处理组。ADSCs注射组瘢痕冰冻切片Dil荧光染色可见大量存活脂肪来源干细胞。结论瘢痕内注射脂肪来源干细胞可以降低α-SMA、CollagenⅠ基因表达,从而改善瘢痕内胶原堆积,并最终改善瘢痕增生情况。

种植骨髓间充质干细胞脑血管支架的性能评价

背景:一般认为对支架表面进行修饰,尤其是种植细胞,可能会加速或导致其内皮化,避免支架内血栓形成而引起再狭窄的发生。目的:寻找骨髓间充质干细胞种植血管支架的最佳条件。方法:将1×106,1×107,1×108,1×109 L-1的第3代大鼠骨髓间充质干细胞分别接种至不锈钢血管支架制备细胞-支架复合物,接种48 h后电镜观察细胞形态变化。取SD大鼠160只,20只为正常对照组,其余140只制作缺血性脑卒中模型,造模8周后随机分为7组,分别植入不锈钢支架、高分子材料支架及不同浓度细胞-支架复合物,以不植入任何材料的为模型对照。植入后8周,蛋白免疫印迹技术检测植入支架上细胞的血管内皮生长因子表达,流式细胞仪检测各组大鼠血小板活化。结果与结论:种植的干细胞均能在不锈钢支架上贴壁生长,当细胞浓度为1×107 L-1时,上皮样细胞完整覆盖支架,细胞及细胞器形态正常。缺血性脑卒中模型实验中,1×107 L-1细胞-支架组细胞生长良好,在血管内环境诱导下具有良好的内皮化趋势,并且可显著抑制血小板活化。表明当细胞种植浓度为1×107 L-1时制备的血管支架通畅,具有良好的生物学效应。

不孕症合并甲状腺功能减退中医辨治思路

不孕症的病因复杂,其中由甲状腺功能减退所引起的排卵功能障碍是不容忽视的病因。基于不孕症合并甲状腺功能减退主要临床表现总结出甲状腺功能减退导致不孕症以脾肾两虚、肝郁气滞、血瘀水阻、浊邪内停为主要病机,属于本虚标实、虚实夹杂之证。该病的治疗以补肾健脾、疏肝理气、化痰祛瘀为重要方法。

随机扩增多态性DNA检测技术分析

目的:探讨随机扩增多态性DNA(RAPD)检测技术的特点。方法:分析影响RAPD标记的各种因素,总结该技术的优点和不足。结果:RAPD标记方法已经广泛用于遗传育种、基因诊断、生物系统学的研究,并显出独特的优点。DNA模板质量与浓度、TaqDNA聚合酶、引物设计及浓度、缓冲体系、MgCl2、dNTP浓度、PCR反应体积等均为该技术的影响因素。结论:对于每一种物种都应先进行体系优化,确保RAPD实验结果稳定准确。

冬虫夏草及其常见伪品的鉴别分析

冬虫夏草，为麦角菌科真菌冬虫夏草菌[Cordyceps sinensis（Berk．）Sacc．]寄生在鳞翅目蝙蝠蛾科蝙蝠蛾昆虫幼子座及幼虫尸体的复合体。始载于《本草从新》，吴仪洛谓：“冬在土中，身活如老蚕，有毛能动，至夏则毛出土上，连身俱化为草”、“保肺益肾。止血化痰，已劳嗽”。冬虫夏草具有补肺益肾，止血化痰的功效，由于野生资源的匮乏，价格一路攀升。虫草的高额利润，驱使不法药商以伪充真，掺伪造假，导致伪品冬虫夏草充斥市场，几达以假乱真。因此能够准确的鉴别冬虫夏草的真伪就显得尤为重要.

本科生眼科见习模式的探讨

目的:探讨本科生眼科见习模式的效果。方法:对本校同一专业、不同学年的学生,在同一教员带教的情况下,采用不同的见习方式,A组采用PBL等多种教学手段为主导的改进教学模式,B组采用传统的眼科学见习方法。见习结束通过相关考试及问卷调查。结果:A组学员学习兴趣、发现问题等能力有明显提高,诊断能力、临床思维意识有不同改进。结论:眼科学临床见习有自身特点,在传统的教学模式基础上引入PBL等先进教学方法可明显提高教学效果,并为临床实习打下坚实基础。

Pentacam与SL-OCT测量对原发性闭角型青光眼患者激光周边虹膜切开手术前后中央前房深度的相关性分析

目的 评估Pentacam与SL-OCT测量原发性闭角型青光眼（primary angle-closure glaucoma，PACG）应用激光周边虹膜切开术（laser peripheral iridoplasty，LPI）手术前后中央前房深度（center anterior chamber depth, CACD）的差异性、相关性和一致性。方法 在我院眼科门诊筛查PACG患者中符合行LPI术的病例共58例（58眼），应用眼前节分析系统Pentacam和裂隙灯光学相干断层成像术（slit-lamp-adapted optical coherence tomography, SL-OCT）分别对PACG患者进行CACD测量，分别记录LPI术前，术后1 d、1周、1个月参数。结果 Pentacam测得PACG患者LPI术前，术后1 d、1周及1个月的CACD分别为（1.60±0.31）、（1.65±0.28）、（1.62±0.30）、（1.61±0.31）mm。SL-OCT测量LPI术前，术后1 d、1周及1个月的CACD分别为（1.70±0.30）、（1.73±0.30）、（1.71±0.31）、（1.72±0.31）mm。2种测量方式LPI术前与术后各时间比较，差异均无统计学意义（P〉0.05）；而2种测量方式之间相比较，术前及术后相同时间点差异均具有统计学意义（P〈0.01）。Pentacam与SL-OCT测量PACG患者LPI术前，术后1 d、1周及1个月的CACD值均存在显著相关关系（r=0.929，P〈0.001；r=0.962，P〈0.001；r=0.961，P〈0.001；r=0.951，P〈0.001）。通过Bland-Altman分析方法，Pentacam与SL-OCT测量LPI术前，术后1 d、1周及1个月CACD差异的95%置信界限分别为-0.33～0.12、-0.29～0.08、-0.25～0.08、-0.26～0.07 mm。结论 Pentacam与SL-OCT测量PACG患者LPI术后CACD具有高度一致性和相关性，二者均可作为青光眼临床筛查的辅助检查方式，为患者提供了有效的无创且可量化的便捷检查。