急性白血病化疗药物体外细胞毒性与临床指标的关系

对39例急性白血病用MTT法检测4种化疗药物的细胞毒性(CT)。结果显示柔红霉素的CT强于阿霉素(P<0.05),阿糖胞苷与环胞苷的CT差别无显著性(P>0.05)。同类药物的CT呈直线正相关,不同类药物的CT无相关。ALL与ANLL以及不同性别患者的白血病细胞对化疗药物的敏感性差别无显著性(P>0.05)。年龄、化疗前外周血Hb,WBC,BPC和骨髓原+早(幼)细胞波(%)与药物的细胞毒性无相关性。

三氧化二砷联合康力隆治疗骨髓增生异常综合征疗效观察

目的:观察三氧化二砷(ATO)联合康力隆治疗骨髓增生异常综合征(MDS)的临床疗效。方法:25例原发性骨髓增生异常综合征-难治性贫血(MDS-RA)患者,其中男15例,女10例,中位年龄39.5岁。治疗方案为ATO10mg/d(儿童酌量),静脉滴注,连用30d,继以每月给药15d,总疗程4个月,同时服用康力隆4～6mg/d。结果:基本缓解8例(32%),部分缓解5例(20%),进步或稳定者5例(20%),无效者7例(28%)。结论:ATO联合康力隆治疗原发性MDS-RA是有效的,且不良反应轻微,总有效率达72%,值得进一步应用总结。

砷剂联合康力隆治疗MDS-RA

目的观察三氧化二砷（Arsenic trioxide ATO）联合康力隆治疗骨髓增生异常综合征（MDS）的临床疗效。方法25例原发性难治性贫血（MDS-RA）患者，其中男15例，女10例，中位年龄39．5岁。治疗方案为ATO10mg/d（儿童酌量），静脉点滴给药，连用30d，继以每月给药15d，总疗程4个月，同时服用康力隆4～6mg／d。结果基本缓解8例（32％），部分缓解5例（20％），进步或稳定者5例（20％），无效者7例（28％）。结论ATO联合康力隆治疗原发性MDS—RA是有效的，且副作用轻微，总有效率达72％，值得进一步应用总结。

c-myc反义寡核苷酸对HL-60细胞端粒酶活性影响及诱导凋亡作用

为了研究c-myc基因反义寡核苷酸(ASODN)对HL-60细胞端粒酶活性的影响及其诱导凋亡作用,探讨HL-60细胞端粒酶活性与c-myc基因表达的关系,应用反义寡核苷酸封闭HL-60细胞c-myc基因的表达,RT-PCR方法检测该基因表达抑制情况,采用流式细胞术进行细胞凋亡检测及细胞周期分析,琼脂糖凝胶电泳观察凋亡细胞的DNA断裂情况,应用TRAP-ELISA法测定HL-60细胞端粒酶的活性。结果表明:反义硫代寡核苷酸作用于HL-60细胞72小时后,c-myc基因表达明显受抑;S期细胞百分数由55.6%降至30%,并出现早期凋亡峰(凋亡细胞比例占25.2%);琼脂糖凝胶电泳显示DNA凋亡梯形带;端粒酶活性检测发现反义寡核苷酸3,4,5μmol/L作用组OD450-690分别为1.952±0.14,1.805±0.40,1.616±0.41,与未作用组(OD450-690为2.648±0.42)比较,差异有显著性(P<0.05);反义寡核苷酸1和2μmol/L作用组及正义寡核苷酸5μmol/L作用组OD450-690分别为2.324±0.36,2.162±0.38,2.466±0.29,与未作用组比较,差异无显著性(P>0.05)。结论:c-myc基因反义寡核苷酸能够通过封闭c-myc基因的表达而诱导HL-60细胞凋亡,阻止细胞由G1期进入S期,并具有下调端粒酶活性作用。

不同年龄段成人急性淋巴细胞白血病免疫表型差异分析

本研究探讨不同年龄段成人急性淋巴细胞白血病(ALL)免疫表型特点。应用CD45/SSC设门的四色流式细胞术和一组系列相关单克隆抗体对260例不同年龄阶段的成人ALL进行免疫表型分析。结果显示:①82例成人T细胞急性淋巴细胞白血病(T-ALL)CD7的阳性率为100%,CD2的阳性率随年龄增长显著降低,14-18岁组CD2阳性率(91.67%)显著高于19-35岁组(65.71%)和35岁以上组(43.48%)(p<0.05);CD34和HLA-DR的阳性率随年龄增长而增高,35岁以上组HLA-DR阳性率(39.13%)显著高于14-18岁组(4.17%)和19-35岁组(11.43%)(p<0.05);35岁以上组髓系抗原(MyAg)和CD13阳性率分别为65.22%和52.17%,显著高于19-35岁组(34.29%和22.86%)(p<0.05)。②178例成人B细胞急性淋巴细胞白血病(B-ALL)CD19和HLA-DR阳性率为100%,除19-35岁组CD33阳性率(52.70%)显著高于14-18岁组(32.50%)外,其余各表面抗原在不同年龄阶段组表达的差异无统计学意义。结论:不同年龄段成人T-ALL免疫表型具有较强的异质性,年长成人T-ALL存在多种具有不良预后意义的表面标志异常表达;不同年龄段成人B-ALL的异质性似较成人T-ALL小。

外周血造血干细胞移植治疗恶性血液病53例

背景与目的:造血干细胞移植使恶性血液病的预后得到很大的改观,外周血造血干细胞移植(transplantation of peripheral blood stem cells,PBSCT)逐渐取代了骨髓移植(bone marrow transplantation,BMT)而成为造血干细胞移植的主要方式。本研究观察了自体或异基因外周血造血干细胞移植对53例恶性血液病患者的治疗效果。方法:53例恶性血液病患者于2003年7月～2006年5月在郑州大学第一附属医院血液科接受PBSCT治疗,中位年龄37岁。采用G-CSF或化疗联合G-CSF动员外周血干细胞。自体移植患者接受CD34+细胞的中位数为3.0×106/kg,异基因移植患者接受CD34+细胞的中位数为6.2×106/kg;自体移植采用MAC预处理方案,异基因移植采用改良的Bu/Cy预处理方案;移植物抗宿主病(graft versushost disease,GVHD)的预防采用MTX、环孢菌素A联合骁悉,1例1个点不合患者加用抗淋巴细胞球蛋白。结果:移植后中性粒细胞≥0.5×109/L、血小板≥20×109/L的天数在自体移植中分别为13天和19天,在异基因移植中分别为12天和15天;异基因移植中Ⅰ～Ⅲ度急性GVHD(aGVHD)的发生率为31.4%,慢性GVHD(cGVHD)的发生率为71.4%,复发率在自体移植和异基因移植患者中分别为38.9%和5.7%,700天无病生存率在自体移植和异基因移植患者中分别为57.9%和69.5%。结论:自体和异基因外周血造血干细胞移植均能很快地重建造血,是治疗恶性血液病的重要手段之一。

米托蒽醌、托泊替康联合阿糖胞苷治疗成人难治复发急性白血病的临床疗效观察

目的观察米托蒽醌、托泊替康联合阿糖胞苷（MTA）方案治疗难治复发急性白血病（AL）的临床疗效及毒副作用。方法20例难治复发急性白血病患者均采用米托蒽醌、托泊替康联合阿糖胞苷（MTA）方案诱导化疗，其中急性髓系白血病（AML）12例和急性淋巴细胞白血病（ALL）8例，包括难治6例及复发14例。结果①疗效：20例患者中11例（55．00％）获得完全缓解（CR），3例（15．00％）获得部分缓解（PR），6例无效（30．00％）；总有效率70．00％；②化疗不良反应：化疗后骨髓抑制期白细胞计数（wBc）耋1．0×10，／L的时间为6~23d，中位时间为10d；中性粒细胞（ANC）耋0．5X109^／L的时间为6-23d，中位时间为10d；血小板计数（PLT）s20×109^／L的时间为2～25d，中位时间为12d。所有患者均出现发热，2例（10．00％）于骨髓抑制期死于严重感染。结论MTA方案对于复发及难治AL均可取得良好的诱导缓解疗效，但其骨髓抑制较重而持久，应用该方案时应结合强力的支持、对症治疗及血液学监测。

MA方案和TA方案治疗初治急性髓系白血病的临床疗效分析

急性髓系白血病（acute myeloidl eukemia,AML）的治疗目前仍然主要选用联合化疗。经典的AML标准诱导化疗方案是以柔红霉素（daunorubicin,DNR）联合阿糖胞苷（cytarabine,Ara-c）的DA（3＋7）方案,但是DA方案的诱导缓解率较低。米托蒽醌（mitoxantrone,MIT）联合阿糖胞苷的MA方案及吡柔比星（pirarubicin,THP）联合阿糖胞苷的TA方案用于AML的诱导缓解治疗已日益受到关注。

Survivin、Bcl-2和VEGF在骨髓增生异常综合征中的表达及其相关性

本研究探讨存活蛋白(survivin)在骨髓增生异常综合征(MDS)发病中的可能作用及寻找凋亡和血管新生两种不同的机制在MDS中可能存在的联系。采用免疫细胞化学的方法检测survivin、Bcl-2和VEGF在MDS低危、高危患者和AML患者及对照者骨髓中的单个核细胞的表达情况,并分析三者间的关系。结果表明:survivin、Bcl-2和VEGF在MDS低危组、高危组和AML组的表达率和积分均逐渐增高,除Bcl-2在MDS低危组和对照组的差异无统计学意义外(P>0.05),三者在各组间的表达差异均有统计学意义(P<0.05),且三者间的表达率均呈正相关关系。结论:survivin、Bcl-2和VEGF参与了MDS的发病并与疾病病程进展有关,凋亡异常和血管新生可能通过以上3种蛋白的相互作用在MDS的发病中存在着某种联系。

成人急性T淋巴细胞白血病患者髓系抗原的表达

目的:观察成人急性T淋巴细胞白血病(T-ALL)患者中髓系抗原(MyAg)的表达及意义。方法:采用CD45/SSC参数设门多色流式细胞术检测63例成人T-ALL患者骨髓细胞的免疫表型,分析MyAg+T-ALL患者的临床特征。结果:①49.2%的成人T-ALL患者表达MyAg,以CD13(33.3%)和CD33(25.4%)为主,CD117和CD64阳性率分别为12.7%和3.2%,未检测到CD14表达。②MyAg+T-ALL患者高白细胞性白血病和肝脾浸润发生率及CD2的表达均低于MyAg-T-ALL患者(χ2分别为6.232,5.769和4.872,P均<0.05),2组诱导死亡率(3/22vs3/29)及完全缓解率(14/19vs23/26)差异无统计学意义(χ2分别为0.006,1.640,P均>0.05)。MyAg单一表达或联合表达对成人T-ALL患者的临床特征无影响。结论:MyAg的表达在成人T-ALL中并不少见;MyAg表达与高白细胞性白血病、肝脾浸润、CD2表达有关,与诱导治疗反应无关。

三氧化二砷及干扰素对U266细胞TRAIL和其受体表达的影响

目的探讨三氧化二砷(As2O3)联合IFNα-2a治疗人多发性骨髓瘤(MM)的可行性。方法将人MM细胞系U266细胞株随机分为4组,空白对照组不行特殊处理,As2O3组加入As2O3,IFNα-2a组加入IFNα-2a,As2O3+IFNα-2a组同时加入As2O3及IFNα-2a。孵育48h后用双标记流式细胞术检测细胞凋亡率,用流式细胞仪检测细胞肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)及其受体表达。结果As2O3+IFNα-2a组细胞凋亡率、TRAIL及其受体表达均显著高于其他三组(P<0.05),空白对照组TRAIL及其受体表达均显著低于其他三组(P<0.05)。结论As2O3及IFNα-2a均可上调TRAIL及其受体表达,促进U266细胞凋亡,且两者有协同作用;此为临床治疗MM提供了新的思路。

CD20阳性成人急性B淋巴细胞白血病患者临床特点及生存分析

本研究分析成人CD20阳性急性B淋巴细胞白血病(B-lineage acute lymphoblastic leukemia,B-ALL)患者的临床特点和生存情况。回顾性总结分析郑州大学第一附属医院血液科2004年5月至2008年12月收治的119例成人B-ALL患者的临床特点和生存情况。结果表明:119例成人B-ALL中CD20阳性40例(33.61%),CD20阴性者79例(66.39%),CD20阳性组和CD20阴性组男性患者比例分别为72.50%和50.63%(p<0.05),CD20阳性组和CD20阴性组发病时外周血白细胞数分别为(27.35±30.29)×109/L和(50.11±81.72)×109/L(p<0.05)。两组患者在年龄分布、肝脾、淋巴结和中枢神经系统浸润、发病时血红蛋白和血小板水平、髓系抗原表达、Ph染色体、超二倍体和正常核型比例、4周内完全缓解率、诱导死亡率和复发率方面的差异无统计学意义(p>0.05);Kaplan-Meier曲线生存率分析显示,CD20阳性组和CD20阴性组成人B-Lin ALL的中位总体生存(OS)时间分别为11.0个月和12.0个月,3年总生存率分别为28%和20%,两组间差异无统计学意义(p=0.832)。结论:CD20在成人B-ALL中的表达与患者的性别分布、外周血白细胞数相关,与其它临床特点无显著相关性,对患者的预后无显著影响。

MMP-2和MMP-9在急性白血病骨髓细胞中的表达及与白血病髓外浸润的相关性

目的探讨基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)与急性白血病发生和髓外浸润的相关性。方法采用生物素化鼠抗地高辛标记的原位杂交法检测MMP-2和MMP-9在初治、复发、完全缓解的急性白血病患者和正常对照者的骨髓原代细胞中的表达。结果MMP-2和MMP-9在初治,特别是有髓外浸润表现者和复发急性白血病骨髓原代细胞中的表达显著高于完全缓解的急性白血病和正常对照者;关于亚型的研究发现,初治急性淋巴细胞白血病组和急性非淋巴细胞白血病(M4+M5)组中的表达显著高于急非淋(非M4+M5)组。结论MMP-2和MMP-9可能通过增强白血病细胞降解细胞外基质(ECM)等机制参与急性白血病的发生和髓外浸润过程,并在其中发挥重要作用。

神经钙粘素在多发性骨髓瘤患者中的表达及临床意义

目的:探讨神经钙粘素(N-Cadherin)在多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)患者骨髓瘤细胞中的表达及临床意义。方法:应用流式细胞术检测64例MM患者CD38+/CD138+细胞中N-Cadherin表达水平,分析其与临床特征及预后的相关性。结果:在64例MM患者中有17例(26.56%)骨髓瘤细胞神经钙粘素高表达(>20%),47例(73.44%)神经钙粘素低表达(≤20%)。神经钙粘素高表达与低表达患者在疾病的分期、分型、已知的多发性骨髓瘤预后因素、骨髓瘤细胞免疫分型、骨质破坏程度方面的差异均无统计学意义(P>0.05)。神经钙粘素高表达组1q21扩增阳性率明显增高(P<0.05),而两组间RB1缺失、D13S319缺失及IGH重排检出率均无统计学差异。神经钙粘素高表达和低表达患者中位总体生存时间(OS)分别为26.7月和55.5月,两组间差异有统计学意义(P<0.05)。结论:神经钙粘素高表达可能是多发性骨髓瘤预后不良的指标之一,这可能与1q21扩增有关。

N-cadherin在急性白血病患者骨髓白血病细胞中的表达及意义

目的:探讨神经钙粘蛋白(N-cadherin)在急性白血病患者骨髓白血病细胞中的表达及意义。方法:应用流式细胞术检测N-cadherin在113例急性白血病患者骨髓白血病细胞中的表达并分析其与临床特征及预后的相关性。结果:N-cadherin在急性白血病患者骨髓白血病细胞中的表达存在差异,表达水平波动在0%-99.7%;成人急性髓系白血病患者N-cadherin^+组CD34^+率较N-cadherin^-组显著升高(67.39%vs 33.33%)(P=0.013),两组间1疗程CR率、总CR率及复发率间的差异无统计学意义(P>0.05);急性淋巴细胞白血病患者N-cadherin^+组白细胞数(21.31±7.07 vs 51.10±23.69)(P=0.008)和外周血原始细胞比例〔(43.22±5.75)%vs(66.45±5.65)%(P=0.015)〕显著低于N-cadherin^-组,1疗程CR率和总CR率低于N-cadherin-组,复发率高于N-cadherin-组,但差异无统计学意义(P>0.05);儿童急性淋巴细胞白血病患者N-cadherin^+组CD33^+率较N-cadherin-组显著增高(47.62%vs 0%)(P=0.012),两组间1疗程CR率和总CR率无显著差异。N-cadherin^+组复发率高于N-cadherin^-组(30.00%vs 0%)(P=0.115)。成人AML、非M3-AML、ALL和儿童ALL患者N-cadherin^-组中位生存时间、3年总生存(OS)率和3年无复发生存率均好于N-cadherin^+组,但其差异无统计学意义。结论:N-cadherin在急性白血病患者骨髓白血病细胞中的表达水平与部分临床特征有关,对急性白血病患者的生存有一定影响。

POEMS综合征相关肾损害患者的临床及肾脏病理特征

目的:分析POEMS综合征相关肾损害患者的临床及肾脏病理特征。方法:回顾性分析我院收治的5例合并肾损害且进行肾脏病理检测的POEMS综合征患者临床表现、实验室检查及肾脏病理等资料,5例患者中,男性3例,女性2例,诊断时中位年龄50(28-71)岁,发病到确诊时间为13.0±7.2个月。结果:所有患者均显示出周围神经病变、内分泌病变、单克隆浆细胞增殖、皮肤改变、水负荷增加,4例患者有脏器肿大。5例患者24 h尿蛋白升高,4例患者镜下血尿。4例患者尿素升高,2例患者肌酐升高。1例患者处于慢性肾脏病(CKD)-G1期,2例患者处于CKD-G2期,1例患者处于CKD-G3b期,1例患者处于CKD-G5期。肾脏病理以内皮损伤和系膜病变为主。3例患者病理诊断为血栓性微血管病肾损害,2例患者为肾轻链型淀粉样变。结论:POEMS综合征累及多系统,临床表现复杂,可合并不同程度肾损害。肾脏病理以内皮损伤和系膜病变为主。

急性白血病错配修复基因hMSH2的检测及临床意义

目的:探讨错配修复基因hMSH2与急性白血病(AL)的关系及临床意义。方法:分别对急性淋巴细胞白血病(ALL)组和急性非淋巴细胞白血病(ANLL)组及相应对照组进行DNA斑点印迹杂交;应用岛津薄层扫描仪对上述实验结果进行扫描;扫描值采用SPSS10.0系统软件进行统计学分析。结果:ALL组与相应对照组hMSH2斑点印迹扫描结果比较,P<0.05有显著性差异;ANLL组与相应对照组比较,P>0.05无明显相关性;ALL组与ANLL组比较,P<0.05有显著性差异。结论:错配修复基因hMSH2异常可能与ALL的发病有关,而在ANLL发病过程中不起关键作用。

足叶乙甙与其他化疗药物对急性白血病细胞毒性相关性的体外研究

目的：研究ＶＰ１６和其他化疗药物对白血病细胞毒性的相关性，揭示其交叉耐药性。方法：将白血病细胞与化疗药物微孔液体培养，ＭＴＴ法检测细胞毒性。结果：ＶＰ１６与柔红霉素、三尖杉酯碱、长春新碱、氮芥和氢化可的松对白血病细胞的细胞毒性无相关性，与阿糖胞苷细胞毒性呈直线正相关（ｒ＝０．４２２５，Ｐ＜０．０１）。结论：ＶＰ１６与治疗急性白血病的多数一线化疗药物无交叉耐药性。

急性白血病ATM基因和BRCA2基因的杂合性缺失

目的 :探讨急性淋巴细胞白血病 (ALL)与急性非淋巴细胞白血病 (ANLL)ATM基因和BRCA2基因杂合性缺失及其相互关系。方法 :应用PCR 变性聚丙烯酰胺凝胶电泳 银染技术检测ATM基因D11S2 179位点和BRCA2基因D13S2 6 0位点的杂合性缺失 (LOH)。结果 :6 4例ALL患者中两位点LOH发生率为 18.7% ;D11S2 179和D11S2 6 0两位点LOH的发生频率分别为 12 .5 %和 14.0 % ;两位点同时发生LOH的频率为 7.8%。38例ANLL患者中两位点LOH的发生率为 7.9% ,D11S2 179和D13S2 6 0两位点的LOH发生频率分别为 2 .6 %和 5 .2 %。两组总发生率比较差异有显著性意义 (P <0 .0 5 )。结论 :ATM基因和BRCA2基因的LOH可能参与ALL的病理发生 。