“磨玻璃影”特征的早期肺腺癌中MPP成分的突变特征分析及ZNF469基因的探索

背景与目的目前,肺癌依然是我国发病率和死亡率最高的恶性肿瘤。而在早期肺腺癌(lung adenocarcinoma,LUAD)中,微乳头(micropapillary,MPP)成分尤其常见,且通常表现出高侵袭性,其与早期转移、淋巴浸润的风险以及患者的5年生存率显著相关。本研究旨在探究以磨玻璃影(ground-glass opacities,GGOs)为特征的早期LUAD中MPP成分和非MPP成分的异同,寻找MPP成分所特有的突变特征,并分析锌指蛋白家族的ZNF469基因与早期LUAD预后以及免疫浸润的关系。方法收集31例LUAD恶性肺结节,采用显微解剖法将其分为成对的MPP和非MPP成分。对早期恶性肺结节组分进行全外显子组测序(whole-exome sequencing,WES),利用maftools、非负矩阵分解(Nonnegative Matrix Factorization,NMF)法、Sigminer等方法进行突变特征分析,以揭示侵袭性LUAD中MPP组分相比于其他肿瘤组织所特有的基因组突变特征。利用癌症基因组图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)的LUAD数据库中ZNF469的表达情况,探讨其与肺癌预后的关系;利用GeneMANIA数据库以及基因本体(Gene Ontology,GO)、京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)富集分析探索LUAD中与ZNF469相关基因的互作网络及信号通路;利用TIMER和TISIDB数据库分析ZNF469表达与LUAD中免疫细胞浸润水平的相关性。结果MPP成分具有较多的基因组变异,相比于非MPP成分的肿瘤组织,癌症体细胞突变目录(Catalogue of Somatic Mutations in Cancer,COSMIC)的13号突变特征(胞苷脱氨酶家族,APOBEC)是MPP成分所特有的,这提示其参与了MPP成分对LUAD早期侵袭过程的促进作用;并且APOBEC特征高的MPP样本具有更高的肿瘤突变负荷(tumor mutational burden,TMB),提示这些患者更能从免疫治疗中获益。LUAD中突变ZNF469的表达高于正常组织,与LUAD患者的不良预后有关。基因互作网络分析以及GO和KEGG富集分析发现,COL6A1、COL1A1、COL1A2、TGFB2、MMP2、COL8A2、C2CD4C等与ZNF469具有相互作用,且主要与编码胶原蛋白、参与细胞外基质构成有关。ZNF469表达与肿瘤的免疫浸润呈正相关。结论本研究揭示了中国人群侵袭性LUAD中MPP成分的特有突变特征,并发现突变ZNF469的高表达影响LUAD预后与免疫浸润,推测ZNF469可作为LUAD潜在的诊断及预后生物标志物。

肺腺癌中免疫微环境特征与EGFR突变状态的相关性研究

背景与目的在全球范围内肺癌发病率和死亡率一直居高不下,而肺腺癌是其中最主要的一个组织亚型,表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)突变是肺腺癌的一个重要驱动基因突变。近年来以程序性死亡受体1(programmed cell death 1,PD-1)及程序性死亡配体1(programmed cell death ligand 1,PD-L1)抑制剂为代表的免疫检查点抑制剂(immune checkpoint inhibitors,ICIs)治疗在部分肺癌患者中疗效显著。有研究表明EGFR突变的患者对免疫治疗的获益程度有限,本研究旨在讨论肺腺癌患者中EGFR突变状态与各类免疫细胞浸润数量、空间分布的关系。方法本研究纳入62例接受手术的肺腺癌患者。通过对手术切除的肿瘤组织进行不同区域多点采样,最终获取了223份肿瘤组织样本。通过基因检测获取了每份肿瘤组织的EGFR突变情况,包括突变丰度(variant allele frequency,VAF)以及突变亚型等信息。对肿瘤组织进行苏木精-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色、免疫组化染色、多重荧光免疫组化染色,并通过计算免疫组化评分获取各类免疫细胞在肿瘤组织中的浸润情况以及三级淋巴结构(tertiary lymphoid structure,TLS)的分布情况。结果与野生型患者相比,EGFR突变肺腺癌患者肿瘤组织中CD68^(+)巨噬细胞以及组织相容性复合物(major histocompatibility complex,MHC)II类抗原呈递细胞浸润更多,且MHC II类抗原呈递细胞空间分布的异质性较大,而CD56^(+)自然杀伤细胞以及CD8^(+)T细胞等浸润更低。EGFR VAF高的肿瘤组织与更低的CD3^(+)T细胞、CD20^(+)B细胞、CD56^(+)自然杀伤细胞、CD68^(+)巨噬细胞、CD8^(+)T细胞等细胞浸润相关,其中只有CD3^(+)T细胞分布的空间异质性较小。对于中国人群常见的两种EGFR突变亚型,EGFR外显子19缺失突变相较于EGFR外显子21 L858R突变肿瘤组织中有更低的免疫细胞浸润,但CD3^(+)T细胞、CD56^(+)自然杀伤细胞、CD68^(+)巨噬细胞以及CD8^(+)T细胞等免疫细胞分布的空间异质性更高。预后分析发现,CD3^(+)T细胞、CD20^(+)B细胞浸润程度高、TLS形成数量多以及CD8^(+)T细胞高分布异质性的EGFR突变患者拥有更长的无病生存期。结论EGFR突变肺腺癌具有独特的低免疫细胞浸润的“非炎性”肿瘤微环境,不同突变亚型以及VAF的肿瘤微环境之间也表现出异质性,这些差异不仅体现在免疫细胞的浸润数量上,也体现在免疫细胞的空间分布情况。因此对EGFR突变肺腺癌的免疫微环境进行进一步更深入的研究对未来提高EGFR突变肺腺癌患者的免疫治疗疗效具有重大意义。

思维导图在康复专业教学中的应用与探讨

思维导图作为一种新兴的学习工具,通过直观化及发散化的方式来帮助掌握学习内容。本文介绍思维导图的概念及制作方法,分析思维导图在提高学习效率方面的优势及其在康复学习中的应用,指出运用思维导图将有助于康复学生整合新旧知识,提高解决临床问题的能力,更能通过激发学生发散性思维来培养创新型人才。思维导图在中国的康复教育中有广阔的应用前景。

经皮胫神经电刺激治疗神经源性膀胱功能障碍的系统评价

目的:系统评价经皮胫神经电刺激治疗中枢神经系统损伤后神经源性膀胱的效果。方法:计算机检索Pubmed、Cochrane Library、Embase、中国知网(CNKI)、维普数据库、万方数据库,检索年限从建库到2017年7月。有两名评价员独立进行资料筛选,数据提取和文献质量评价。采用RevMan 5.3软件进行Meta分析。结果:共提取文献16篇,共589例。Meta分析结果显示:最大膀胱容量显著增加[MD=86.89,(95%CI:76.60,97.19),P<0.01];最大尿流率显著增加[MD=3.98,(95%CI:0.94,7.02),P=0.01];膀胱逼尿肌压力显著下降[MD=-11.11,(95%CI:-18.28,-3.95),P=0.002];最大尿流率时膀胱逼尿肌压力显著下降[MD=-9.32,(95%CI:-12.89,-5.74)。结论:经皮胫神经电刺激可在一定程度上改善神经源性膀胱状态,提升患者生存质量,但仍需高质量大样本的临床试验进一步证明。

有氧运动对慢性缺血性认知障碍模型大鼠海马组织pCREB、PICK1及GluR2蛋白表达的影响

目的:观察有氧运动对慢性缺血性认知障碍模型大鼠学习记忆能力及海马组织中磷酸化环磷腺苷反应元件结合蛋白(pCREB)、蛋白激酶C相互作用蛋白1(PICK1)及谷氨酸受体2(GluR2)表达的影响,探讨其部分作用机制。方法:56只SD雄性大鼠按照随机数字表法分成4组,假手术组、模型组、药物组及有氧运动组,每组14只。模型组、药物组及有氧运动组按照双侧颈总动脉永久结扎法制备模型,所有大鼠于造模前、造模后及治疗后进行3次Morris水迷宫评估,运用尼氏染色法观察海马CA1区病理形态学改变、Western Blot法测定大鼠海马组织pCREB、PICK1及GluR2蛋白的表达情况。结果:(1)Morris水迷宫评估结果显示:与假手术组比较,模型组的平均逃逸潜伏期时间明显延长、平台搜索次数显著减少(P<0.01);与模型组比较,有氧运动组及药物组大鼠找到平台所需时间减少(P<0.01),平台搜索次数增加(P<0.05,P<0.01);而有氧运动组和药物组比较,无显著性意义(P>0.05)。(2)尼氏染色光镜下,模型组、有氧运动组及药物组尼氏小体数量减少,排列紊乱疏松,细胞结构出现不同程度的损害,而有氧运动组及药物组损害较模型组轻。(3)Western Blot法测定结果显示:模型组大鼠海马组织pCREB、GluR2蛋白表达含量与假手术组相比明显减少(P<0.01),PICK1蛋白表达量明显增加,差异均有显著性意义(P<0.01);与模型组相比,有氧运动组和药物组大鼠海马组织pCREB(P<0.01,P<0.05)、GluR2蛋白表达量均增加(P<0.05,P<0.01),PICK1蛋白表达量均明显减少(P<0.01);而有氧运动组和药物组在以上蛋白表达上无差异(P>0.05)。结论:有氧运动能有效提高慢性缺血性认知障碍大鼠的学习、记忆能力,其治疗效果与单唾液酸四己糖神经节苷脂钠注射液相当。上调海马组织内pCREB、GluR2蛋白,下调PICK1蛋白的表达可能是其治疗慢性缺血性认知障碍的部分机制之一。

肺腺癌中LncRNA LINC00525通过mRNA衰减和三联体介导的染色质结构改变抑制p21表达

背景与目的长非编码RNAs(long noncoding RNAs,lncRNAs)在各种癌症中发挥至关重要的作用。在本研究中,我们旨在研究肺腺癌(lung adenocarcinoma,LUAD)中上调以及和生存相关的lncRNA LINC00525的功能和分子机制。方法采用定量逆转录聚合酶链式反应(quantitative reverse transcription polymerase chain reaction,RT-qPCR)和原位杂交(in situ hybridization,ISH)测定组织中LINC00525的表达水平。在体内外实验中,采用功能获得和功能丧失的方法研究LINC00525在LUAD中的功能作用。RNA pulldown,RNA免疫沉淀(RNA immunoprecipitation,RIP)、染色质免疫沉淀(chromatin immunoprecipitation,ChIP)、三联体捕获试验、双荧光素酶检测试验、基因表达芯片和生物信息学等手段用于研究潜在机制。结果LINC00525在LUAD细胞和组织中高表达。生存分析表明,LINC00525的上调与LUAD患者的不良预后相关。体外敲低LINC00525可抑制细胞增殖和细胞周期进程。在异种移植模型中,LINC00525的敲低抑制了荷瘤小鼠的肿瘤生长和肿瘤发生。其机制为LINC00525通过与p21启动子形成RNA-DNA三联体,引导Zeste增强子多聚梳抑制复合物2亚基(zeste 2 polycomb repressive complex 2 subunit,EZH2)至p21启动子,导致p21启动子的组蛋白3(trimethylation of lysine 27 on histone 3,H3K27me3)Lys27三甲基化增加,从表观遗传水平抑制p21表达。另外,LINC00525还通过与RNA结合基序单链相互作用蛋白2(RNA binding motif single stranded interacting protein 2,RBMS2)竞争性结合,促进p21 mRNA的衰变,从而在转录后水平抑制p21的表达。结论我们的研究结果表明,LINC00525与EZH2和RBMS2协同降低p21 mRNA的转录和稳定性,从而促进LUAD的进展,表明LINC00525可能是LUAD临床干预的潜在治疗靶点。

三棱莪术汤对骨关节炎大鼠免疫功能和血液循环的影响

目的探讨三棱莪术汤对骨关节炎大鼠免疫功能和血液循环的影响。方法50只清洁级成年SD雌性大鼠随机分为空白对照组、模型组、塞来昔布组、三棱莪术汤7 d组、三棱莪术汤14 d组,每组10只。除空白对照组之外,其余4组采用冷-固联合诱导法结合物理刺激制备骨关节炎大鼠模型,造模后灌胃给药。观察大鼠膝关节肿胀程度并测定脏器指数;苏木素-伊红(HE)染色观察膝关节组织病理改变;酶联免疫吸附试验测定血清白细胞介素(IL)-1β、肿瘤坏死因子(TNF)-α及血浆前列腺素E2、血栓素B2、6-酮-前列腺素F1α水平;生化法检测血清超氧化物歧化酶(SOD)吸光度值,计算血清SOD活力。结果造模后模型组、塞来昔布组、三棱莪术汤7 d组、三棱莪术汤14 d组关节肿胀程度均明显高于空白对照组(P<0.01),疗程结束后塞来昔布组、三棱莪术汤7 d组、三棱莪术汤14 d组低于模型组,但仍高于空白对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。模型组胸腺出现一定程度萎缩,与空白对照组相比差异有统计学意义(P<0.05)。塞来昔布组、三棱莪术汤7 d组、三棱莪术汤14 d组胸腺脏器指数与空白对照组相比差异无统计学意义(P>0.05),三棱莪术汤7 d、14 d组脾脏器指数均明显高于空白对照组(P<0.05)。模型组IL-1β、TNF-α、SOD水平明显低于空白对照组,前列腺素E2明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.01);塞来昔布组、三棱莪术汤7 d组、三棱莪术汤14 d组IL-1β、TNF-α、SOD水平明显高于模型组,前列腺素E2明显低于模型组(P<0.01)。模型组血栓素B2明显高于空白对照组,6-酮-前列腺素F1α明显低于对照组(P<0.01);塞来昔布组、三棱莪术汤7 d组、三棱莪术汤14 d组血栓素B2明显低于模型组,6-酮-前列腺素F1α明显高于模型组(P<0.01)。结论三棱莪术汤对骨关节炎大鼠的疗效确切,作用机制与改善免疫功能和血液循环有关,可能通过抗炎细胞因子的调节作用来改善血液循环。

肿瘤相关性成纤维细胞高表达LncRNA ZEB1-AS1促进肺腺癌血管生成的功能机制

目的当前关于ZEB1-AS1对肺腺癌血管生成的作用机制尚未明确。文中研究肿瘤相关性成纤维细胞中长链非编码RNALncRNA ZEB1-AS1的表达及其对肺腺癌细胞和血管内皮细胞功能的影响。方法采取RT-PCR检测ZEB1-AS1在肺腺癌组织与配对癌旁正常组织以及肺腺癌细胞系,肿瘤相关性成纤维细胞(CAFs)以及配对的正常成纤维细胞中的表达情况。利用特异性小干扰RNA(siRNA)构建ZEB1-AS1低表达CAF细胞系。通过血管生成实验和A549细胞侵袭迁移实验研究CAFs中的ZEB1-AS1对HUVEC血管形成的影响和对肺腺癌浸润的影响。通过酶联免疫吸附反应实验(ELISA)测定沉默ZEB1-AS1CAFs中可能的血管相关性细胞因子,并通过双荧光素酶报告基因实验探究ZEB1-AS1在血管生成调节方面的机制。结果LncRNAZEB1-AS1在肿瘤组织和CAFs中高表达(24.89±19.11),在正常组织和肺腺癌细胞系中低表达(7.09±6.95)。在CAFs中沉默ZEB1-AS1能够抑制HUVEC的血管形成,进而抑制肺腺癌细胞A549的侵袭迁移;并且沉默ZEB1-AS1 CAFs上清中血管内皮生长因子A(VEGFA)分泌减少。双荧光素酶报告基因实验以及统计学分析显示,ZEB1-AS1可能通过竞争性结合miR-505-3p从而促进VEGFA的分泌。结论LncRNA ZEB1-AS1是CAFs高表达的肿瘤血管形成相关的lncRNA,抑制ZEB1-AS1能够抑制HUVEC的血管形成和A549的侵袭转移。ZEB1-AS1可能是肺腺癌潜在的预后标志和治疗靶点。

冠状动脉介入治疗后应用氯吡格雷治疗的患者血小板活化情况

目的探讨冠状动脉介入治疗(PCI)后,患者应用氯吡格雷作为抗血小板药物口服治疗,观察血小板活化的变化情况。方法采用流式细胞术(FCM)分别对PCI患者和健康体检人群血小板GPⅡb/Ⅲa进行检测,同时观察PCI患者应用氯吡格雷治疗前、后血小板GPⅡb/Ⅲa水平的变化。结果实验组入选时与健康对照组进行比较,实验组入选时GPⅡb/Ⅲa的水平较健康对照组明显升高,两组血小板GPⅡb/Ⅲa水平差异有统计学意义(P<0.05)。用药7d后其GPⅡb/Ⅲa水平较入选时明显下降,两组血小板GPⅡb/Ⅲa水平差异有统计学意义(P<0.05)。而健康对照组与实验组用药7d后进行比较,两组血小板GPⅡb/Ⅲa水平差异无统计学意义(P>0.05)。结论 PCI后应用氯吡格雷治疗患者血小板活化水平大部分都有明显下降,但仍有少部分患者没有明显下降,推测可能与血小板抵抗有关。

豫剧元素在河南“桐柏玉叶”包装设计中的应用研究

中国茶文化背景深厚,茶叶的生产活动已有数千年的历史,如今已然形成了本民族独有的茶文化特色。河南南阳桐柏的种茶、制茶技艺源远流长,在茶神陆羽的《茶经》也曾有记载,是中原茶文化中不可缺少的茶叶品种。豫剧是河南省的传统戏剧,也是国家级非物质文化遗产,具有极其浓郁的河南地方文化特征。桐柏玉叶作为桐柏茶的精品之一,在推介和包装中需要河南本土的特色文化元素的渗入。而豫剧元素是国人尽知的文化品牌,将其融入桐柏玉叶的包装设计中,对推进桐柏玉叶的市场宣传和文化品质都意义深远。

MND1通过与KLF6结合形成MND1-KLF6-E2F1正反馈环加速细胞周期进程促进肺腺癌进展

背景与目的在全球范围内,肺腺癌(lung adenocarcinoma,LUAD)在肺癌患者中所占比例不断升高,肺腺癌在癌症相关死亡中所占比例很高。本研究旨在筛选出新的癌基因,为肺腺癌治疗提供潜在靶点,探究肺腺癌发生发展的机制。方法我们通过分析基因表达综合数据库(Gene Expression Omnibus,GEO)和癌症基因组图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)的数据,并进行转录组筛选和生存分析,获得了一个潜在的肺腺癌风险生物标志物——减数分裂核分裂1(meiotic nuclear divisions 1,MND1)。我们通过细胞活力检测和皮下异种移植瘤模型验证MND1在肺腺癌细胞增殖和肿瘤生长中的致癌作用。通过质谱、免疫共沉淀(co-immunoprecipitation,Co-IP)和染色质免疫共沉淀(chromatin immunoprecipitation,ChIP)等实验探讨其潜在分子机制。结果通过组织芯片染色和第三方数据分析评估,MND1高表达是肺腺癌患者总生存期的独立风险因素。体内和体外试验结果表明,MND1通过加速细胞周期进程促进肺腺癌细胞增殖。Co-IP、ChIP和双荧光素酶报告基因实验结果显示,MND1竞争性地与肿瘤抑制基因KLF6(kruppel-like factor 6,KLF6)结合,从而保护E2F转录因子1(E2F transcription factor 1,E2F1)免受KLF6诱导的转录抑制。荧光素酶报告基因和ChIP分析发现,E2F1通过反馈方式与MND1启动子结合,进而激活MND1转录。结论在肺腺癌中,MND1、KLF6和E2F1形成正反馈环调控细胞周期,导致肺腺癌顺铂耐药。MND1对肿瘤恶性进展至关重要,可能是肺腺癌潜在的治疗靶点。

舌三针配合颞三针治疗脑卒中后吞咽障碍的临床观察

目的观察针刺舌三针结合颞三针治疗脑卒中后吞咽障碍的临床疗效。方法选取在深圳市南山区人民医院康复医学科住院的脑卒中后吞咽障碍患者60例,随机分为治疗组和对照组各30例。治疗组予以针刺舌三针配合颞三针治疗,对照组予以传统针刺治疗,两组均给予基本药物治疗和吞咽功能训练,疗程2周,观察治疗前后洼田饮水试验及功能性经口摄食量表的等级变化,对比临床疗效。结果治疗后两组间洼田饮水试验、功能性经口摄食量表分级比较,差异均有统计学意义(P<0.05);治疗组有效率93.33%,优于对照组73.34%(P<0.05)。结论在基本药物治疗和吞咽功能训练治疗基础上,综合运用舌三针结合颞三针治疗脑卒中后吞咽障碍患者,能提高疗效,值得推广应用。

脊髓横断后艾灸足三里对胃黏膜损伤大鼠Nrf2/HO-1信号通路的影响

目的:观察艾灸足三里通过调节Nrf2/HO-1信号通路对应激性胃黏膜损伤大鼠的治疗作用,并探讨其胃黏膜保护作用与脊髓的关系。方法:SPF级SD大鼠50只,按体质量随机分为5组:空白组、模型组、药物组、艾灸组及手术+艾灸组。采用无水乙醇结合阿司匹林混悬液灌胃建立大鼠胃黏膜损伤模型,艾灸组艾灸大鼠双侧“足三里”穴;药物组给予奥美拉唑肠溶片溶液(0.2 mg/kg)灌胃,连续治疗8 d;手术+艾灸组予以脊髓横断手术,术后进行胃黏膜损伤造模及艾灸治疗。治疗结束后,应用Guth法计算大鼠胃黏膜损伤指数(UI),HE染色观察大鼠胃黏膜形态学变化,ELISA实验检测血清中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)水平的变化。Western-blot和RT-PCR检测胃黏膜组织中一氧化氮合酶(iNOS)、环氧合酶-2(COX-2)、核转录因子E2相关因子2(Nrf2)和血红素加氧酶-1(HO-1)的蛋白及mRNA表达。结果:与模型组相比,艾灸组大鼠UI值显著降低,差异具有统计学意义(P<0.01);胃黏膜组织损伤明显改善,明显降低了血清中MDA、NO水平,升高了SOD、GSH-Px水平,差异具有统计学意义(P<0.01);显著下调了胃黏膜组织中iNOS和COX-2的蛋白及mRNA表达水平,上调了Nrf2和HO-1的表达水平,差异具有统计学意义(P<0.01)。手术+艾灸组大鼠UI值、血清中MDA、NO水平及胃黏膜组织中iNOS和COX-2的表达较艾灸组升高,血清SOD、GSH-Px的水平及黏膜组织Nrf2和HO-1的表达水平明显降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:艾灸足三里可通过Nrf2/HO-1信号通路有效改善大鼠应激性胃黏膜损伤,脊髓参与了其修复作用及信号传导的过程。

三棱莪术汤对膝骨关节炎大鼠的影响及作用机制

目的探讨三棱莪术汤对膝骨关节炎大鼠模型的影响及作用机制。方法将72只SD大鼠随机分为对照组、模型组、塞来昔布组及三棱莪术汤20、40、80 mg/kg剂量组。除对照组,另外5组建立膝骨关节炎软骨损伤模型,造模成功后塞来昔布组及三棱莪术汤各剂量组给予相对应的药物干预,对照组和模型组给予相同体积的生理盐水。连续灌胃3个月后测定大鼠机械痛阈和热刺激潜伏期,进行关节炎症积分和光镜软骨检测(Mankin)评分;测定膝关节软骨组织中含半胱氨酶的天冬氨酸蛋白水解酶(Caspase)1、核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白(NLRP)3 mRNA和蛋白表达水平;组织匀浆后检测肿瘤坏死因子(TNF)-α、干扰素(INF)-γ、白细胞介素(IL)-17表达水平。结果塞来昔布组、三棱莪术汤不同剂量组大鼠机械痛阈、热刺激潜伏期明显高于模型组,关节炎症积分、Mankin评分明显低于模型组(P<0.05);随着三棱莪术汤剂量的增加大鼠机械痛阈、热刺激潜伏期逐渐提升,关节炎症积分、Mankin评分逐渐降低。塞来昔布组、三棱莪术汤不同剂量组Caspase1、NLRP3 mRNA和蛋白表达水平明显低于模型组,差异有统计学意义(P<0.05);随着三棱莪术汤剂量的增加Caspase1、NLRP3 mRNA和蛋白表达水平逐渐降低,其中80 mg/kg组与塞来昔布组差异无统计学意义(P>0.05)。塞来昔布组、三棱莪术汤不同剂量组TNF-α、INF-γ、IL-17表达水平明显低于模型组(P<0.05);随着三棱莪术汤剂量的增加TNF-α、INF-γ、IL-17表达水平逐渐降低,其中80 mg/kg组与塞来昔布组差异无统计学意义(P>0.05)。结论三棱莪术汤能够有效减轻膝骨关节炎大鼠软骨损伤程度,以80 mg/kg剂量效果最明显;其作用机制可能与降低NLRP3/Caspase1炎症信号通路表达,下调炎症因子TNF-α、INF-γ、IL-17表达有关。

增材制造铝合金接头构件静力试验方案的设计与验证

为了验证增材制造的铝合金接头是否满足使用工况载荷要求,分析了影响试验精度的因素并确定试验夹具设计指标,设计了铝合金接头的静力试验方案并进行试验验证,获得了可靠的试验数据;通过试验结果与有限元仿真结果的比较,验证了试验方案的可行性和有限元分析结果的精度,为类似增材制造构件的静力试验提供了可参考的方法,具有工程应用价值和现实意义。

针刺对中风急性期疗效的Meta分析

目的:系统评价针刺对于急性中风患者功能的影响。方法:检索Pubmed、Embase、Cochrane Library、中国知网(CNKI)、维普、万方等数据库,检索年限从建库至2018年2月。由2名评价员独立进行资料筛选、数据提取和文献质量评价。采用Stata 12.1软件进行Meta分析,结局指标进行GRADE证据等级评分。结果:最终纳入文献11篇,包括8篇英文,3篇中文,1087例受试者。Meta分析结果显示,NIHSS评分无统计学意义[MD=-0.18,(95%CI:-0.41,0.04),P=0.129];改良Barthel指数有统计学意义,针刺组显著高于对照组[SMD=0.52,(95%CI:0.28,0.76),P<0.01]。GRADE证据等级评分NIHSS评分为高质量证据,MBI为中等质量证据。结论:针刺能在一定程度上改善急性中风患者的功能状态和日常生活能力,但仍需要多中心大样本的临床随机对照实验进一步证明。

针刺中魁穴结合开郁降逆汤对郁证型嗳气的疗效观察

目的:探讨针刺中魁穴结合开郁降逆汤对郁证型嗳气的疗效。 方法:招募 30 例符合郁证型嗳气标准的志愿者并随机分为三组,A 组采用针刺中魁穴,B 组采用开郁降逆汤,C 组采用针刺中魁穴结合开郁降逆汤,每组 10 例进行治疗。 结果:针刺中魁穴结合开郁降逆汤相比单一使用治疗有效率以及满意度更高,且三组的中医症状积分治疗前后有显著性差异(P<0.05)。 结论:针刺中魁穴结合开郁降逆汤对郁证型嗳气具有一定疗效,且副作用小。

穴位埋线对慢性缺血性认知障碍模型大鼠空间学习记忆能力及海马兴奋性氨基酸毒性相关蛋白的影响

目的:观察穴位埋线对慢性缺血性认知障碍大鼠空间学习记忆能力及海马蛋白激酶C相互作用蛋白1(PICK 1)、谷氨酸受体2(GluR 2)及Ca^(2+)水平的影响,探讨穴位埋线改善缺血性认知障碍的可能途径。方法:雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、埋线组、药物组,每组14只。采用双侧颈总动脉永久性结扎法复制慢性缺血性认知障碍模型。埋线组取"百会""大椎"、双侧"肾俞""悬钟"穴埋线,每周1次,共埋线4次;药物组予以单唾液酸四己糖神经节苷脂钠注射液腹腔注射(0.33mg/kg),每天1次,共4周。采用Morris水迷宫进行学习记忆能力测试,尼氏染色法观察大鼠海马组织内尼氏小体病理变化,蛋白免疫印迹法检测大鼠海马组织内PICK 1、GluR 2蛋白相对表达量,BCA浓度测定法检测大鼠海马组织内Ca^(2+)浓度。结果:与假手术组比较,模型组大鼠定位航行实验逃避潜伏期延长,空间探索实验穿越原平台次数减少(P<0.01);海马组织尼氏染色仅显示少量尼氏小体,排列分散,胞核呈深染固缩、体积变小,细胞大量丢失,结构不清晰;海马组织内PICK 1蛋白相对表达量增加,GluR 2蛋白相对表达量显著减少,Ca^(2+)浓度明显增高(均P<0.01)。与模型组比较,埋线组、药物组大鼠逃避潜伏期明显缩短(P<0.01),穿越原平台次数增加(P<0.05),尼氏体较丰富,仅见少量细胞核深染固缩,细胞丢失少;海马组织内PICK 1蛋白相对表达量减少(P<0.01,P<0.05),GluR 2蛋白相对表达量增加(P<0.05,P<0.01),Ca^(2+)浓度降低(P<0.01)。结论:穴位埋线疗法能抑制大鼠海马内PICK 1蛋白与A-氨基-3-羟基-5-甲基-4-异恶唑丙酸(AMPA)受体的相互作用,使AMPA受体亚基GluR 2含量增加,Ca^(2+)浓度降低,从而降低兴奋性氨基酸毒性,这可能是其改善大脑学习记忆等认知功能障碍的机制之一。

肿瘤相关成纤维细胞自噬促进肺腺癌细胞侵袭迁移

目的肿瘤细胞自噬与肿瘤发生、发展密切相关,但肿瘤微环境细胞自噬与肿瘤的关系尚不清楚.肿瘤相关成纤维细胞(CAFs)是肿瘤微环境的重要组成部分,可分泌细胞因子促进肿瘤侵袭转移.本研究旨在探讨CAFs自噬对肺腺癌侵袭迁移的影响.方法以肺腺癌细胞株A549和CAFs进行非接触共培养为实验组,单独培养的A549为对照组,观察CAFs过表达自噬核心基因自噬相关基因5(ATG5)及CAFs对照组对A549侵袭迁移的影响.酶联免疫吸附试验检测培养上清白细胞介素-6、及白细胞介素-8表达水平.应用SPSS 23.0统计软件分析,计量资料采用均值±标准差(Mean±SD),两组间样本均数比较采用t检验;多组间两两样本均数比较采用方差分析.结果与单独培养的A549比较,CAFs共培养后A549侵袭[(54.6±8.6)个/cm^2比(124.3±19.6)个/cm^2]迁移能力[(57.0±10.5)个/cm^2比(122.7±17.6)个/cm^2]增强,而与过表达ATG5的CAFs共培养后,A549侵袭[(124.3±19.6)个/cm^2比(280.0±32.1)个/cm^2]迁移能力[(122.7±17.6)个/cm^2比(269.3±72.7)个/cm^2]进一步增强,差异有统计学意义(F=18.640、80.630,P<0.05).过表达ATG5后CAFs分泌的IL-6[(545.5±28.2)ng/L比(865.4±70.9)ng/L]和IL-8[(374.2±62.2)ng/L比(672.4±24.2)ng/L]明显增高,差异有统计学意义(t=7.261、7.738,P<0.05).结论CAFs自噬可通过分泌IL-6/IL-8促进肺腺癌细胞侵袭迁移.