基于蔡氏混沌的隐性知识转移仿真研究

在知识经济时代,知识转移过程已成为管理学研究的热点问题。为分析隐性知识转移阻力变化对隐性知识转移过程及形态的影响,在梳理现有隐性知识转移文献的基础上,运用混沌理论构建蔡氏混沌隐性知识转移模型并进行仿真分析,研究隐性知识在主体间转移规律。研究结果表明:隐性知识转移具有初始状态敏感性等混沌特征,随着知识主体间合作与竞争平衡关系的变化,输出方转移意愿、输出方转移能力、接收方吸收动机、合作信任强度、互动交流程度也随之变化,隐性知识转移呈现出隐性知识转移全阻力类型、隐性知识转移高阻力类型、隐性知识转移中阻力类型、隐性知识转移低阻力类型以及隐性知识转移零阻力类型5种类型。基于仿真研究结果,提出隐性知识转移效果提升对策,同时,为隐性知识具有反馈机制的双向非线性转移过程研究提供新的量化方法和研究思路。

滋肾活血方对糖氧剥夺/再灌注诱导的海马神经元线粒体自噬的影响

目的探究滋肾活血方对糖氧剥夺/再灌注(oxygen-glucose deprivation/reoxygenation,OGD/R)诱导的原代海马神经元损伤的保护机制。方法分离的原代海马神经元经免疫荧光鉴定后,OGD/R诱导神经元损伤,激光共聚焦扫描显微镜观测不同再灌注时间自噬流的变化。OGD/R诱导的原代海马神经元再经滋肾活血方含药血清干预后,CCK-8检测细胞活力,流式细胞术检测细胞凋亡,透射电子显微镜观察自噬体,Western blot检测自噬相关蛋白表达。结果10%的滋肾活血方含药血清可以明显提升细胞活力及降低细胞凋亡比例,增加神经元中自噬体的数量,并上调自噬相关蛋白PINK1、Parkin、p-ATG16L1的表达。结论滋肾活血方能有效抵抗OGD/R诱导的原代海马神经元凋亡,其作用可能与调控PINK1-Parkin通路促进线粒体自噬有关。

何首乌苷对大脑中动脉栓塞再灌注模型大鼠皮层线粒体自噬的调控作用及神经保护机制

目的研究何首乌苷(2,3,5,4'-tetrahydroxyldiphenylethylene-2-O-glucoside,THSG)在脑缺血再灌注(cerebral ischemia/reperfusion,CI/R)中对大鼠皮层神经元的保护作用。方法采用线栓法建立大鼠短暂性大脑中动脉栓塞再灌注(transient middle cerebral artery occlusion/reperfusion,tMCAO/R)模型。雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组和THSG低、中、高剂量(10、20、40 mg/kg)组,每组10只。采用Longa 5分法评估神经功能缺损情况;TTC染色检测大鼠脑梗死体积百分比;苏木素-伊红(HE)染色检测神经元结构;Nissl染色检测Nissl小体数量;Western blotting检测半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(cystein-asparate protease-3,Caspase-3)、B淋巴细胞瘤-2基因(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2-associated X protein,Bax)、PTEN诱导的激酶1(PTEN induced putative kinase 1,PINK1)、Parkin、微管相关蛋白1轻链3(microtubule-associated protein 1 light chain 3,LC3)、p62的蛋白表达;透射电镜观察皮层神经元线粒体自噬情况;免疫荧光检测神经元Parkin、LC3的表达。结果THSG显著降低了MCAO/R大鼠脑梗死体积百分比和神经功能缺损评分(P<0.05、0.001),降低了MCAO/R大鼠皮层神经元结构损伤和Nissl小体丢失的现象,下调了皮层区cleaved Caspase-3、Bax、p62蛋白表达(P<0.05、0.01、0.001),上调了皮层区Bcl-2、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ蛋白表达(P<0.01),促进皮层神经元中自噬体的数量增加以及PINK1、Parkin蛋白表达(P<0.05、0.001)。结论THSG能显著改善MCAO/R大鼠皮层神经元损伤,其神经保护机制与促进PINK1/Parkin依赖性线粒体自噬途径有关。

基于NMDAR调控线粒体自噬探讨滋肾活血方对血管性痴呆大鼠海马氧化应激损伤的保护作用

目的探讨滋肾活血方通过调节N-甲基-D-天冬氨酸受体(NMDAR)促进线粒体自噬,从而减轻血管性痴呆(VD)大鼠海马氧化应激损伤的分子机制。方法采用双侧颈总动脉结扎法建立大鼠VD模型。60只雄性SD大鼠根据随机数字表法分为假手术组、模型组、盐酸多奈哌齐组(0.45 mg/kg)、滋肾活血方低剂量组(8.9 g/kg)、滋肾活血方中剂量组(17.8 g/kg)、滋肾活血方高剂量组(35.6 g/kg),每组10只。灌胃给药14 d。通过水迷宫实验对各组大鼠的学习记忆能力进行评估。50只雄性SD大鼠根据随机数字表法分为假手术组、模型组、马来酸氢盐(MK-801)组(1 mg/kg)、滋肾活血方高剂量组(35.6 g/kg)、滋肾活血方高剂量联合MK-801组(35.6 g/kg+1 mg/kg),每组10只。MK-801组在造模后连续7 d腹腔注射MK-801,滋肾活血方高剂量联合MK-801组灌胃高剂量滋肾活血方联合腹腔注射MK-801。灌胃给药14 d。蛋白质印迹法检测PTEN诱导假定激酶1(PINK1)/帕金森病相关蛋白(Parkin)信号通路相关蛋白[PINK1、Parkin、抗增殖蛋白2(PHB2)、微管相关蛋白1轻链3B(LC3B)、泛素结合蛋白p62]表达,免疫荧光法检测海马PINK1、神经元特异性烯醇化酶(NSE)平均荧光强度,酶联免疫吸附测定检测海马丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)含量,实时荧光PCR及蛋白质印迹法检测大鼠海马NMDAR2A(NR2A)、NMDAR2B(NR2B)mRNA及NR2B蛋白表达。结果水迷宫实验结果表明,与假手术组相比,模型组逃避潜伏期延长(P<0.05),穿越平台次数减少(P<0.05);与模型组相比,盐酸多奈哌齐组与滋肾活血方低、中、高剂量组大鼠逃避潜伏期缩短(P<0.05,P<0.01),盐酸多奈哌齐组与滋肾活血方中、高剂量组穿越平台次数增加(P<0.05,P<0.01)。进一步研究表明,与模型组相比,滋肾活血方高剂量组大鼠海马Parkin、PINK1、PHB2、LC3Ⅱ/Ⅰ蛋白表达增加(P<0.01),p62蛋白表达减少(P<0.01),PINK1、NSE平均荧光强度增强(P<0.05,P<0.01),SOD含量增加(P<0.01),MDA含量减少(P<0.01);MK-801组大鼠海马Parkin、PINK1、PHB2及LC3Ⅱ/Ⅰ蛋白表达减少(P<0.01),p62蛋白表达增加(P<0.01),PINK1、NSE平均荧光强度减弱(P<0.05,P<0.01),SOD含量减少(P<0.05),MDA含量增加(P<0.01)。与MK-801组相比,滋肾活血方高剂量联合MK-801组大鼠海马Parkin、PINK1、PHB2、LC3Ⅱ/Ⅰ蛋白表达增加(P<0.01),p62蛋白表达减少(P<0.01),PINK1、NSE平均荧光强度增强(P<0.05,P<0.01),SOD含量增加(P<0.01),MDA含量减少(P<0.01),NR2B mRNA及蛋白表达增加(P<0.01)。结论滋肾活血方可能通过NR2B介导的PINK1/Parkin信号通路调节线粒体自噬,从而改善VD大鼠海马神经元氧化应激损伤。

滋肾活血方对2-VO模型大鼠海马CA1区线粒体自噬的调节及神经元再生的影响

目的:探讨滋肾活血方通过调节线粒体自噬促进双侧颈总动脉永久性结扎(2-VO)模型大鼠海马CA1区神经元新生的作用机制。方法:2-VO法建立血管性痴呆大鼠模型,随机将60只SD大鼠分为假手术组、2-VO模型组、盐酸多奈哌齐组、滋肾活血方低、中、高剂量组(8.9、17.8、35.6 g·kg^(-1))。Morris水迷宫实验检测各组逃避潜伏期、跨越平台次数;透射电镜观察海马CA1区线粒体自噬情况;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测海马CA1区PTEN诱导激酶1(Pink1)、帕金蛋白(Parkin)mRNA的表达;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测海马CA1区线粒体自噬信号通路相关蛋白Parkin、抗增殖蛋白2(PHB2)、线粒体融合蛋白2(Mfn2)、动力学相关蛋白1(Drp1)蛋白的表达;Brdu法检测CA1区神经元再生情况。结果:与假手术组比较,2-VO模型组大鼠学习、空间记忆能力明显下降(P<0.05),海马CA1区见线粒体结构受损,自噬溶酶体形成,Parkin、Pink1 mRNA及Parkin、PHB2、Drp1蛋白明显上调(P<0.05),Mfn2蛋白表达量明显降低(P<0.05),海马CA1区神经元新生明显减少(P<0.05)。与模型组比较,滋肾活血方干预后可明显提高2-VO模型大鼠的学习、空间记忆能力(P<0.05),增加海马CA1区自噬小体数量并改善线粒体结构,进一步上调海马CA1区Parkin、Pink1 mRNA及Parkin、PHB2、Drp1蛋白表达(P<0.05,P<0.01),下调Mfn2蛋白表达(P<0.05,P<0.01),增加海马CA1区神经元新生数量(P<0.05,P<0.01)。结论:滋肾活血方对血管性痴呆大鼠海马CA1区神经元新生的促进作用与Pink1/Parkin信号通路介导的线粒体自噬有关。