骨髓间充质干细胞向急性肾损伤小鼠的肾脏归巢现象及功能探讨

目的:观察在缺血再灌注(ischemia/reperfusion,I/R)模拟急性肾损伤的小鼠模型中,骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)能否向损伤的肾小管迁移并促进其修复。方法:Percoll密度梯度离心结合贴壁培养法有效分离纯化出C57BL/6小鼠的骨髓间充质干细胞(mMSCs),5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)标记并采用免疫组化法鉴定。雄性C57BL/6小鼠45只,分为正常对照组(15只)、I/R组(15只、夹闭双侧肾蒂30 min开放)、I/R+BrdU-mMSCs组(15只、夹闭双侧肾蒂30 min开放的同时尾静脉注射经BrdU标记的mMSCs)。于建模后1d、2d、3d、7d、14d分别处死部分小鼠(每次每组均处死3只),留取动脉血及肾组织,检测血肌酐(SCr)及尿素氮(BUN)水平,观察肾组织病理变化,荧光组织化学及免疫组织化学观察MSCs在受体小鼠肾组织的分布并对其进行鉴定。结果:经免疫组化证实BrdU标记mMSCs的阳性率可达(98.71±0.32)%。I/R组、I/R+BrdU-mMSCs组小鼠的BUN及SCr均显著高于正常对照组,但I/R+BrdU-mMSCs组小鼠的BUN及SCr水平却较同一时间点的I/R组为低,肾小管损伤程度评分也有着显著降低。免疫组化检测显示I/R+BrdU-mMSCs组小鼠肾脏中可检测到BrdU+细胞的分布,以术后第3天最多[(19.36±6.94)%]。经荧光组织化学及激光共聚焦显微镜观察证实该BrdU+细胞定位于小鼠的肾小管上皮细胞(renal tubular epithelial cells,RTECs)处,且表达RTECs特异性的标志物角蛋白18(cytokertain-18,CK18)。结论:小鼠发生I/R诱导的急性肾损伤后可诱导MSCs向损伤的肾小管上皮迁移并转化,参与RTECs的更新,促进肾损伤的修复。

低钙透析液对腹膜透析患者颈动脉粥样硬化的影响

目的:观察低钙透析液配合口服碳酸钙及活性维生素D3对持续性不卧床腹膜透析(CAPD)患者颈动脉粥样硬化的影响。方法:30例伴有颈动脉粥样硬化行CAPD的患者,改用低钙透析液(钙1.25mmol/L),同时调整碳酸钙及1,25-(OH)2维生素D3(罗盖全胶丸)的剂量。在改用低钙透析液3、6、9、12月时,采用多普勒超声观察颈动脉内-中膜厚度(IMT)、颈动脉血流阻力指数(RI)、颈动脉粥样斑块数量和超声分型的变化;同时检测血清钙、磷、血清甲状旁腺素(iPTH,放免法),计算钙磷乘积。结果:随访过程中,1例患者死亡,2例患者自行退出。低钙透析液CAPD后,患者颈动脉IMT逐渐变薄,12个月时降至最低[(1.58±0.36)mm,P<0.01]。伴随着颈动脉RI降低,8例患者颈动脉内的扁平斑及软斑数量减少(P<0.05),颈动脉粥样硬化斑块总数量也由47块降至34块。与此同时,血钙、磷及钙磷乘积明显下降(P<0.01),血iPTH明显增加(P<0.01)。至12月时钙、磷、钙磷乘积、iPTH达标比例分别为83.33%、70%、96.67%、70%。碳酸钙的剂量也由(2.27±0.41)g/d增至(3.35±0.22)g/d(P<0.05),罗盖全剂量由(0.21±0.09)μg/d增至(0.33±0.14)μg/d(P<0.05)。患者均未发生低钙抽搐、低血压等。结论:低钙透析有助于尿毒症腹膜透析患者颈动脉粥样硬化的疾病转归,其机制可能与显著改善患者的钙磷代谢紊乱,减轻其对血管的损伤作用有关。

急性肾损伤微环境对培养骨髓间充质干细胞分化及分裂增殖的影响

目的:观察体外模拟急性肾损伤(acute kidney injury,AKI)的微环境下,小鼠骨髓间充质干细胞(mouse mesenchymal stem cells,mMSCs)分化及分裂增殖情况。方法:采用夹闭雄性C57BL/6小鼠双侧肾蒂30min再开放30min的方法制作缺血再灌注(I/R)性AKI鼠模型,即刻取双侧肾脏皮质制作I/R肾脏匀浆上清。抽取C57BL/6小鼠的骨髓,经Percoll密度梯度离心联合贴壁培养法分离纯化出mMSCs,以流式细胞仪鉴定。取扩增3代的mMSCs分组培养:(1)对照组:含10%胎牛血清的低糖DMEM培养基;(2)干预组:含10%胎牛血清的低糖DMEM培养基+I/R肾脏匀浆上清。诱导1d、3d、5d、7d后倒置显微镜下观察细胞形态学变化;透射电镜观察细胞超微结构;流式细胞仪检测角蛋白18(cytokeratin18,CK18);CCK-8法检测培养mMSCs的增生;TUNEL法检测mMSCs凋亡。结果:分离获得的P3-mMSCs高表达CD29和CD44,低表达CD34和CD45。与对照组长梭形细胞相比,干预组第3天可见部分细胞为椭圆形、短梭形,至第7天大部分细胞呈圆形、椭圆形、短胖梭形;透射电镜也观察到胞质内开始出现较多的粗面内质网、溶酶体、线粒体。流式细胞仪检测发现,对照组mMSCs内仅有极微量CK18表达,而干预组CK18阳性表达率显著增加。经I/R肾脏匀浆上清干预后,不同时间点mMSCs的增殖效应均显著减弱,而TUNEL检测显示胞核染色阳性的细胞百分比有显著升高(P<0.01)。结论:体外模拟的AKI微环境可诱导mMSCs部分分化为肾小管上皮样细胞,但同时也会导致培养的mMSCs凋亡,增殖能力减弱,进而减少了可肾向分化的mMSCs数量,推测这可能是MSCs体内移植促肾修复能力有限的原因之一。

金雀异黄素对糖尿病大鼠糖脂代谢及肾脏的影响

目的探讨金雀异黄素(又称染料木黄酮,genistein,Gen)对糖尿病(DM)大鼠血糖、胰岛素敏感性、血脂、肾功能等代谢指标以及肾脏病理的影响。方法雄性SD大鼠45只,分为正常对照组(10只,普通饲料自由饮食)、DM组(4周组,9只;8周组,8只;普通饲料自由饮食)、DM+Gen组(4周组,10只;8周组,8只;普通饲料自由饮食+Gen 30 mg.kg-1.d-1)。DM组及DM+Gen组均按60 mg/kg的剂量腹腔内注射STZ建立DM模型。于实验4周、8周末禁食12 h,处死部分大鼠取动脉血检测FBG、FIns、血脂及BUN、Cr;取肾脏制作组织切片行HE染色。结果DM 8周大鼠FBG、ISI、TC、TG、BUN、Cr分别为35.2±1.8 mmol/L、-5.83±0.20、2.50±0.61 mmol/L、1.26±0.30 mmol/L、18.4±0.7 mmol/L、70.2±7.8μmol/L,相应DM+Gen 8周组的结果分别为18.8±3.4 mmol/L、-5.27±0.47、1.43±0.19 mmol/L、1.11±0.34 mmol/L、10.0±1.7 mmol/L、51.7±4.5μmol/L。Gen可减轻肾小球肥大、肾小管扩张。结论Gen可改善DM大鼠的糖脂代谢紊乱,减轻肾脏组织病理变化,改善肾功能,延缓糖尿病肾病的进展。

血红素氧化酶1过表达对急性损伤肾脏中骨髓间充质干细胞的影响

目的:构建可高效表达血红素氧化酶1(HO-1)的大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs),观察HO-1过表达对移植BMSCs在缺血再灌注(I/R)诱导的急性肾损伤(AKI)肾脏中存活的影响,并探讨其机制。方法:基因转染技术获得HO-1-BMSCs和e GFP-BMSCs(空载体对照)。构建I/R诱导的AKI大鼠模型(I/R-AKI)并分别行BMSCs、e GFP-BMSCs和HO-1-BMSCs移植,移植3d后处死,检测大鼠肾功能及移植细胞在肾组织的分布。制作AKI的肾脏匀浆上清(AKI-KHS),体外干预培养的BMSCs、e GFP-BMSCs和HO-1-BMSCs,检测培养BMSCs的细胞凋亡、HO-1蛋白水平、氧化应激相关酶的活力及核因子κB(NF-κB)p65水平。结果:HO-1-BMSCs移植后,AKI大鼠肾脏中DAPI+细胞(BMSCs)比例最高,肾功能改善显著。经AKI-KHS干预后,培养BMSCs的TUNEL+细胞比例增加,HO-1过表达可显著逆转这一现象。AKI-KHS可诱导BMSCs细胞的HO-1表达增加,以HO-1-BMSCs/AKIKHS组升高最为显著,伴随着该组细胞内超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化酶(GSH-Px)水平显著升高,丙二醛(MDA)和黄嘌呤氧化酶(XOD)活力降低,细胞内NF-κB p65核移位细胞比例也显著降低。结论:HO-1过表达可增强BMSCs在AKI肾脏微环境中的存活,HO-1的抗氧化作用及其下游NF-κB活化抑制为其可能的机制,期待可以解决移植干细胞在损伤靶器官中存活率低下的问题。

促红细胞生成素对骨髓间充质干细胞移植修复小鼠急性肾损伤的作用机制

目的:构建缺血再灌注(I/R)诱导的急性肾损伤(AKI)小鼠模型,经尾静脉注射行骨髓间充质干细胞(BM-MSCs)移植,观察外源性促红细胞生成素(EPO)对BM-MSCs移植修复AKI效应的调控,并探讨基质细胞衍生因子1(SDF-1)/CXCR4轴在调控中的作用。方法:C57BL/6小鼠100只,随机分为正常对照组、模型组(AKI组)、BM-MSCs移植组、EPO干预组、EPO干预+BM-MSCs移植组,移植BM-MSCs采用5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)标记。建模后1d、3d、7d、14d处死部分小鼠,检测血清尿素氮(BUN)及肌酐(SCr)水平,观察肾组织病理变化,行急性肾小管损伤程度评分(ATN评分),免疫组织化学观察移植后其BM-MSCs在小鼠肾组织的分布,Western印迹法检测损伤肾组织中SDF-1水平。结果:与BM-MSCs移植组及EPO干预组比较,EPO干预+BM-MSCs移植组小鼠BUN、SCr及ATN评分降低幅度更大,至移植后第14d小鼠的BUN、SCr水平甚至接近正常对照组。免疫组化显示BM-MSCs移植组小鼠肾脏中可检出BrdU+细胞分布,以术后第7天最多(11.32%±1.38%),在此基础上联合EPO干预可增加肾组织中BrdU+阳性细胞比例。AKI建模后肾组织SDF-1水平升高,建模后7d达高峰,EPO干预可显著增加SDF-1的表达。结论:EPO干预可增加BM-MSCs移植后受损肾组织中移植细胞数量,增强AKI的修复作用,其中肾脏中促干细胞归巢因子SDF-1表达增加为其可能机制之一。

CXCR4基因修饰对骨髓间充质干细胞向急性肾损伤微环境定向迁移的放大效应及机制

目的:低氧/复氧预处理肾小管上皮细胞(HR-RTECs)体外模拟急性肾损伤(AKI),与CXCR4基因修饰的骨髓间充质干细胞(BMSCs)共培养,观察该共培养环境下CXCR4基因修饰对BMSCs定向迁移力的影响,探讨其可能机制,并以动物模型进一步验证。方法:Gateway技术构建含CXCR4目的基因的质粒[绿色荧光蛋白(eGFP)为示踪基因)],同时构建仅含eGFP的对照载体,以携带上述质粒的慢病毒为载体转染BMSCs合成CXCR4-BMSCs和null-BMSCs,检测转染细胞活力、分化潜能及CXCR4在转染细胞中的表达。RTECs于HR环境中各培养12h获得HR-RETCs。实验共分四组,将BMSCs、CXCR4-BMSCs、null-BMSCs分别与HR-RTECs共培养,BMSCs与RTECs共培养作为对照。培养48h后检测各组BMSCs的定向迁移能力,ELISA检测RTECs培养上清中基质细胞衍生因子1(SDF-1)浓度,Western印迹检测BMSCs内pAKT、pMAPK水平。构建AKI小鼠模型,随机分为BMSCs移植组、CXCR4-BMSCs移植组和null-BMSCs移植组,移植细胞均采用5溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)标记,移植7d后处死,免疫组化法检测移植细胞在肾组织的分布。结果:成功转染的BMSCs活力及分化潜能均无变化,CXCR4表达在CXCR4-BMSCs中明显增加。HR-RTECs模拟的AKI共培养环境可增强BMSCs的迁移能力,空载体转染对BMSCs的迁移能力并无额外影响,但CXCR4修饰的BMSCs向AKI微环境的迁移细胞数进一步显著增加。HR-RTECs培养上清中的SDF-1浓度增加,与其共培养的三种BMSCs内的pAKT、pMAPK水平也均增加,且以CXCR4-BMSCs的pAKT、pMAPK水平最强。CXCR4基因修饰可显著增加AKI肾组织中BrdU+细胞(BMSCs)的比例。结论:AKI微环境对BMSCs有明显趋化作用,CXCR4基因修饰可进一步增强BMSCs的定向迁移能力,SDF-1/CXCR4轴为发挥作用的主要趋化因子/受体,其下游的AKT和MAPK通路为发挥作用的可能信号机制。CXCR4-BMSCs移植有望成为修复AKI的一种新的有效方法。

骨髓间充质干细胞干预对缺血再灌注诱导肾小管上皮细胞凋亡的影响

目的:观察骨髓间充质干细胞(mesenchymal stemcells,MSCs)对缺血再灌注(ischemia/reperfusion,I/R)诱导的急性肾损伤模型小鼠肾小管上皮细胞(renal tubular epithelial cells,RTECs)凋亡的保护作用及机制。方法:Percoll密度梯度离心结合贴壁培养法有效分离出C57BL/6小鼠的骨髓间充质干细胞(mMSCs)。雄性C57BL/6小鼠45只,分为正常对照组(15只)、I/R组(15只、夹闭双侧肾蒂30min开放)、I/R+mMSCs组(15只、夹闭双侧肾蒂30min开放的同时尾静脉注射mMSCs)。造模并干预后,于1d、2d、3d、7d、14d分别处死部分小鼠,留取动脉血及肾组织,检测血尿素氮(BUN)及肌酐(Scr),制作肾组织切片行HE染色进行肾小管损伤程度评分,TUNEL法检测RTECs的凋亡,Western Blot法检测建模后第2天肾小管组织中Caspase-3、Bcl-2蛋白水平的表达。结果:I/R后小鼠的BUN及Scr均显著高于正常对照组,但同一时间点I/R+mMSCs组小鼠的BUN及Scr水平较I/R组为低,以术后第7天差异最为显著(P<0.01),肾小管损伤程度评分也有着显著降低。TUNEL检测表明I/R可诱导RTECs发生明显的凋亡,以术后第2天凋亡指数(apoptosis index,AI)最高(46.71±11.20)(P<0.01),而mMSCs干预可显著降低各时间点RTECs的凋亡水平(P<0.05或P<0.01),至14d时AI基本恢复至对照组水平。Western blot进一步显示:I/R+mMSCs组小鼠的肾组织中Caspase-3蛋白水平明显下降(1.16±0.33,P<0.01),而Bcl-2水平却有明显增高(0.94±0.27,P<0.01)。结论:移植的MSCs对I/R诱导的肾损害小鼠RTECs凋亡具有抑制作用,从而有利于肾小管损伤的早期恢复,其保护机制可能与抑制Caspase-3表达,上调Bcl-2表达有关,但其细胞学和分子机制还有待进一步研究。

骨髓间充质干细胞干预对急性肾损伤鼠肾脏中细胞因子的影响

目的:建立缺血再灌注(I/R)诱导的急性肾损伤小鼠模型,探讨外源性地给予骨髓间充质干细胞(MSCs)干预对模型小鼠肾损伤微环境中细胞因子水平的影响,并探讨其在肾损害修复中的作用。方法:采用Percoll密度梯度离心法分离出C57BL/6小鼠的骨髓间充质干细胞(mMSCs)。雄性C57BL/6小鼠45只,分为正常对照组(15只)、I/R组(15只、夹闭双侧肾蒂30min开放)、I/R+mMSCs组(15只、夹闭双侧肾蒂30min开放的同时尾静脉注射mMSCs)。于建模后1d、2d、3d、7d、14d分别处死部分小鼠(每次每组均处死3只),留取动脉血及肾组织,检测血尿素氮(BUN)及肌酐(Scr)水平,制作肾组织切片行HE染色,观察肾组织病理变化,行肾小管坏死程度评分(ATN评分)。ELISA法检测肾组织匀浆肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、白细胞介素-10(IL-10)、肝细胞生长因子(HGF)、骨形态发生蛋白-7(BMP-7)的水平。结果:I/R组小鼠的BUN及Scr均显著高于正常对照组,肾小管损伤严重;而I/R+mMSCs组小鼠的BUN及Scr水平较I/R组为低,以术后第7天差异最为显著(P<0.01),肾小管损伤病理明显减轻,ATN评分也有着显著降低。ELISA结果显示单纯I/R组各时间点肾组织匀浆中TNF-α、IL-1β、MCP-1的水平显著升高(P<0.01或P<0.05),而IL-10、HGF、BMP-7的水平却有着显著降低(P<0.01或P<0.05)。但同时给予MSCs干预的I/R小鼠肾组织匀浆中前述细胞因子的水平却向着相反方向改变。结论:MSCs对I/R肾组织中细胞因子的分泌具有调控作用,而这些调控了的细胞因子进而可通过旁分泌作用发挥促进肾损害的修复作用。

金雀异黄素对糖尿病大鼠代谢紊乱及肾脏病理的影响

目的探讨金雀异黄素(Genistein,Gen)对糖尿病(DM)大鼠血糖、胰岛素敏感性、血脂、肾功能等代谢指标以及肾脏病理的影响。方法健康雄性SD大鼠(150g左右)45只,分为正常对照组(10只;普通鼠饲料自由饮食)、DM组(4周组:9只;8周组:8只;普通鼠饲料自由饮食)、DM+GEN灌胃组(4周组:10只;8周组:8只;普通鼠饲料自由饮食+Gen30mgkgd)。DM组及DM+GEN灌胃组均按60mgkg的剂量腹腔内注射链脲佐菌素(STZ)建立DM模型。于实验4周、8周末将大鼠禁食12h,处死部分大鼠取动脉血检测空腹血糖、血清胰岛素、血脂及尿素氮、肌酐;取肾脏制作组织切片行HE染色病理观察。结果金雀异黄素灌胃能降低DM大鼠血糖、血清胆固醇,提高胰岛素敏感性;降低血尿素氮、肌酐水平,减轻肾小球肥大、肾小管扩张。结论金雀异黄素可以改善DM大鼠的糖脂代谢紊乱,减轻肾脏组织病理变化,改善肾功能,延缓糖尿病肾病的进展。

金雀异黄素对高糖培养肾小球系膜细胞SMemb表达及细胞外基质的影响

目的探讨金雀异黄素(Gen)对高糖培养下大鼠系膜细胞(MC)表型和细胞外基质(ECM)的影响。方法对照组:低糖DMEM培养液;实验组:高糖DMEM培养液(含0、5、10、50、100、200μmol/LGen),培养12、24、48h,分别检测SMemb mRNA、MMP-2 mRNA、TIMP-1 mRNA水平及上清液Fn的含量。结果Gen可抑制高糖刺激下SMemb的表达,减少Fn的分泌(P<0.01或0.05);并可增加MMP-2/TIMP-1 mRNA半定量比值,呈浓度、时间依赖性。结论在体外高糖条件下,Gen干预可降低MCSMemb表达,减轻ECM积聚。

不同钙浓度腹透液对尿毒症患者颈动脉粥样硬化影响的超声评价及相关因素分析

目的:观察使用不同钙浓度腹透液行持续性不卧床腹膜透析(CAPD)的尿毒症患者颈动脉粥样硬化的超声学改变,并行相关因素分析。方法:将40例初行CAPD的尿毒症患者随机分为2组:标准钙腹透液治疗组(A组,20例)和低钙腹透液治疗组(B组,20例),行正规CAPD治疗并配合碳酸钙口服。观察治疗12个月前后患者颈动脉内-中膜厚度(IMT)、颈动脉粥样斑块数量和超声分型的变化,以及血清钙、磷、钙磷乘积、甲状旁腺素(iPTH)的改变。结果:两组患者初行CAPD治疗前颈动脉IMT、粥样斑块的数量、检出率和超声分型无差异。经过12个月的治疗随访后,B组患者颈动脉IMT、斑块发生率及溃疡斑的检出率显著低于A组(P<0.05)。与此同时,B组患者的血清钙、磷及钙磷乘积也有着显著意义地降低(P<0.05或P<0.01),且均低于治疗后的同期A组患者(P<0.05或P<0.01),iPTH则有显著意义地上升(P<0.01)。整个治疗过程中,两组患者均未有明显低钙抽搐、低血压等情况发生。结论:钙磷代谢紊乱可加重尿毒症CAPD患者的血管损伤,低钙透析液有助于减轻患者的钙磷代谢紊乱,减轻其对血管损伤,延缓颈动脉粥样硬化的进展。

间充质干细胞免疫学特点及在肾脏疾病中的应用

间充质干细胞的多向分化潜能尤其是可分化为肾脏实质细胞的发现让肾脏移植提到了新的高度--自体肾脏移植。间充质干细胞仅低水平表达人类主要组织相容性Ⅰ类分子,而不表达人类主要组织相容性Ⅱ类分子,故而免疫原性较低。此外,间充质干细胞还可阻断树突状细胞的成熟,降低T细胞的免疫应答,并可通过分泌一些可溶性因子来介导免疫抑制。间充质干细胞上述独特的免疫调节功能使其在人和动物体内可以避免异种移植排斥反应的发生。已有较多报道利用啮齿类动物胚胎移植人的间充质干细胞异生培育出新的肾脏及输尿管,且可从成长后的输尿管收集的液体中检测到尿素氮和肌酐明显高于该动物的血清水平,这说明新的肾脏已经产生尿液,而且自体肾脏免疫原性小,植入后不良反应较少,来源供给方便,从而为自体肾脏移植的发展开辟了广阔空间。

低钙腹膜透析液对尿毒症患者颈动脉粥样硬化的影响

目的探讨低钙腹膜透析（PD）液对尿毒症患者颈动脉粥样硬化的影响及机制。方法将60例行连续性非卧床腹膜透析（CAPD）且合并颈动脉粥样硬化的患者随机分为A组（标准钙PD液治疗组，30例）和B组（低钙PD液治疗组，30例），均继续行正规CAPD治疗。观察治疗12周前后患者颈动脉内-中膜厚度（IMT）及颈动脉粥样硬化斑块发生率的变化，同时生化法检测血清钙浓度，ELISA法测定血清基质金属蛋白酶-9（MMP-9）水平。结果经过12周的分组透析后，B组患者的血清钙、MMP-9[（2．25±0．24）mmol／L、（564．72±124．69）μg／L]较A组患者[（2．40±0．37）mmol／L、（718．56±111．83）μg／L]明显下降（P〈0．05），颈动脉IMT[（1．17±0．28）mm]亦显著低于A组[（1．25±0．19）mm]（P〈0．05）。结论低钙PD液可延缓尿毒症患者颈动脉粥样硬化的进展，其对血清MMP-9的影响可能是其机制之一。

基因功能研究方法浅介

随着人类基因组计划的进展 ,数据库中积累了越来越多未知功能的基因序列 ,分析这些基因的功能将成为基因组计划的主要任务。

骨髓间充质干细胞免疫学特性研究及在急性肾小管坏死中的应用(英文)

骨髓间充质干细胞因其具有强大的增殖能力、多向分化潜能及向损伤组织器官归巢的特点,使得各国学者都试着将其作为"种子细胞",用于修复损伤的器官组织。在这些"种子细胞"的同种异体甚至异种移植过程中,人们不可避免地考虑到移植排斥问题。但大量资料显示,骨髓间充质干细胞具有独特的免疫学特性,其不表达组织相容性复合物Ⅱ类分子,可阻断树突状细胞的成熟,降低T细胞的免疫应答,并可通过分泌一些可溶性因子来介导免疫抑制。骨髓间充质干细胞这种独特的低免疫原特性使其在人和动物体内可以避免异种移植排斥反应的发生,更加显示出在移植治疗中的优势,也期待成为构建肾脏修复的种子细胞。

金雀异黄素对高糖培养下大鼠系膜细胞TIMP-1表达的影响

目的探讨金雀异黄素对高糖培养下大鼠系膜细胞表达基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)的影响。方法实验分组：对照组，低糖DMEM培养液(不含金雀异黄素)；实验组，高糖DMEM培养液+不同浓度金雀异黄素(含0、5、10、50、100、200μmol／L金雀异黄素)。各组分别培养12、24、48h。ELISA法检测细胞培养上清液TIMP-1含量；半定量RT—PCR法检测TIMP-1 mRNA表达。结果在实验48h内，金雀异黄素浓度和时间依赖性地抑制系膜细胞外TIMP-1的蛋白水平。对照组及高糖+不同浓度金雀异黄素作用24h后TIMP-1 mRNA表达量分别为0．797、1．286、1．186、1．013、0．954、0．939、0．823；对照组、高糖组及高糖+50μmol／L金雀异黄素组作用不同时间(12、24、48h)后TIMP-1 mRNA表达量分别为0．801、1．084、0．970、0．865、0．820。结论在体外高糖条件下，一定浓度的金雀异黄素可降低大鼠肾小球系膜细胞TIMP-1的蛋白水平及其mRNA的表达，提示金雀异黄素可能通过促进细胞外基质(ECM)的降解而减少ECM的积聚，延缓糖尿病肾病进展。

调整腹透液钙浓度对尿毒症患者颈动脉粥样硬化的影响

目的观察调整腹透液钙浓度对持续性不卧床腹膜透析（㈣）患者颈动脉粥样硬化的影响。方法在规律性腹膜透析随访的患者中选择30例伴有颈动脉粥样硬化的患者，先予患者继续使用标准钙腹透液6个月后改用低钙腹透液（Baxter PD4：Ca^2＋1．25mmol／L，其余成分不变），同时增加碳酸钙用量，继续观察12个月，回顾分析患者的血清钙、磷、钙磷乘积及甲状旁腺素（iPTH）水平，颈动脉内-中膜厚度（IMT）、颈动脉血流阻力指数（R1）、颈动脉粥样斑块数量和超声分型的变化。同时观察使用低钙腹透液的不适症状。结果在继续使用标准钙腹透液的6个月中，患者血钙水平逐渐增加，颈动脉IMT增厚，RI增加，差异均有统计学意义。换用低钙腹透液治疗3个月后，颈动脉IMT变薄，RI较前明显下降（P〈0．05），血钙、磷及钙磷乘积明显下降（P〈0．01），iPTH明显增加（P〈0．01）。患者碳酸钙的每日口服剂量也由（2．27±0．41）g增加至（3．35±0．22）g（P（0．05）。在随后的9个月中，血钙、钙磷乘积均稳定在正常范围，血磷降至正常，iPTH 150ng／L左右；颈动脉IMT变薄（P〈0．01）、RI下降（P〈0．01），颈动脉粥样硬化斑块的超声分型及数量变化有统计学意义。治疗过程中，1例死亡，2例自行退出，其余患者均未有明显低钙抽搐、低血压等发生。结论低钙透析能显著减轻腹膜透析患者钙磷代谢紊乱对血管的毒性作用，有助于尿毒症患者颈动脉粥样硬化的转归。