一株禽多杀性巴氏杆菌的分离鉴定

为弄清湖南省某鸡场发病病因,对送检的病死鸡进行了解剖、组织细菌的分离,并对分离菌株进行了生化鉴定、16SrDNA扩增测序分析,且进一步测序分析了其荚膜和脂多糖PCR分型。解剖结果发现,6只鸡均有心包积液、肺脏实变、肝脏表面有许多针尖状灰白色的坏死点,脾脏和肠无明显症状。对采集组织脏器肝脏、肺脏、脾脏,接种TSA平皿后,均有长出卵圆形菌落。纯化后革兰氏染色为G-短小杆菌,经细菌鉴定仪鉴定为多杀性巴氏杆菌。16SrDNA测序结果显示其与巴氏杆菌美国株CCUG17978的同源性为100%;通过荚膜和脂多糖PCR分型鉴定为荚膜A型和脂多糖L1型。经使用巴氏杆菌较为敏感的磺胺类药物对应性治疗后,鸡群恢复健康。该鸡场发病系荚膜A型和脂多糖L1型巴氏杆菌感染。

一株猪丹毒杆菌的分离鉴定及其对小鼠的致病性研究

为确定湖南省某猪场猪只发病死亡的病原,从送检猪组织中分离纯化获得1株革兰阳性菌,通过生化鉴定及16S rDNA测序对分离菌进行了鉴定,药敏试验验证分离菌的耐药性,并进一步测序分析了其毒力因子基因的遗传变异;最后通过动物试验研究了分离菌对小鼠的致病性。结果显示,分离菌呈针尖大小、半透明,生化鉴定为猪丹毒杆菌。药敏试验结果显示该分离株对青霉素、苯唑西林、氨苄西林等15种抗生素敏感。分离株16S rDNA序列与猪丹毒疫苗株G4T10的同源性为100%;与G4T10株相比,spaA基因高突变区存在4个突变位点,分别是A509C、C510A、A924C和C925T,相对应的氨基酸有3个突变位点,包括P170H、D308E和F309L,而其他毒力因子基因包括神经氨酸酶基因、荚膜多糖A、B和C基因序列则无变化。小鼠攻毒试验显示,当剂量为1.466×10^(3)CFU或更高时,小鼠呈全身败血症病理变化,死亡率100%,说明该菌株毒力较强;从死亡小鼠各脏器组织中可分离到与分离株形态特征一致的菌株。本研究成功分离鉴定了1株毒力较强的猪丹毒杆菌,为湖南省猪丹毒的流行病学及致病性提供了参考。

红斑丹毒丝菌对猪脐静脉内皮细胞的感染及细胞增殖凋亡的影响

猪感染红斑丹毒丝菌后会表现出明显的皮肤和血管病变,为了解红斑丹毒丝菌感染后对血管内皮细胞的影响,本研究建立了红斑丹毒丝菌体外感染猪脐静脉内皮细胞模型;利用革兰染色、菌落平板培养法等检测红斑丹毒丝菌对猪脐静脉内皮细胞的黏附能力;采用CCK-8、Ed U、Annexin V-PE等试剂盒分别检测红斑丹毒丝菌对血管内皮细胞的活力、增殖及凋亡的影响。结果显示,红斑丹毒丝菌易黏附和侵入猪脐静脉内皮细胞,损伤细胞活力,抑制其细胞增殖并显著诱导其凋亡。本文揭示了红斑丹毒丝菌感染可能会通过抑制猪血管内皮细胞增殖并诱导其凋亡而导致机体血管系统病变的机制,为猪丹毒的预防及治疗提供了参考。