硒代蛋氨酸羟基类似物对H_(2)O_(2)诱导的鸡肝癌细胞氧化损伤的保护作用

旨在探索硒代蛋氨酸羟基类似物(SeOH)缓解鸡肝癌细胞(LMH)氧化损伤的作用及潜在机制。建立H_(2)O_(2)氧化应激模型,通过检测细胞活力和细胞氧化/抗氧化指标的变化以及核转录因子E2相关因子2(Nrf_(2))通路和内质网应激关键分子的表达情况,评价不同浓度SeOH(16、32和64μg/mL)的抗氧化应激和内质网应激作用。结果显示:120μmol/L的H_(2)O_(2)刺激细胞24 h时,细胞活力显著下降(P<0.001),活性氧(ROS)的荧光强度升高。不同剂量的SeOH(16、32和64μg/mL)均可显著提高H_(2)O_(2)处理后的LMH细胞活力(P<0.01);32和64μg/mL的SeOH均可极显著提高LMH细胞的超氧化物歧化酶(SOD)活性(P<0.01),显著降低丙二醛(MDA)含量(P<0.001)以及ROS的荧光强度。进一步研究显示32和64μg/mL的SeOH极显著上调Nrf_(2)蛋白(P<0.01)并显著上调谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)蛋白的表达水平(P<0.05),极显著下调Kelch样ECH相关蛋白1(Keap1)蛋白的表达水平(P<0.001),极显著增加Nrf_(2)的入核率(P<0.001);64μg/mL的SeOH可显著降低葡萄糖调节蛋白78(GRP78)(P<0.05)、蛋白激酶RNA样内质网激酶(PERK)(P<0.01)和转录激活因子4(ATF4)(P<0.001)的表达水平。提示:SeOH能通过激活Nrf_(2)通路并且抑制内质网应激缓解H_(2)O_(2)诱导的LMH细胞氧化应激,为畜禽养殖中SeOH作为抗氧化剂的应用提供理论基础。

大蒜辣素缓解CCl_(4)致小鼠急性肝损伤的作用研究

[目的]本研究旨在探讨大蒜辣素对四氯化碳(CCl_(4))诱导的小鼠急性肝损伤的缓解作用及其潜在作用机制。[方法]将42只小鼠随机分为7组,分别为对照组、大蒜辣素处理组、CCl_(4)处理组、复方甘草酸苷治疗组(80 mg·kg^(-1))及3个大蒜辣素(40、20和10 mg·kg^(-1))治疗组。小鼠腹腔注射1%CCl_(4)(10 mL·kg^(-1))8 h后灌胃给予不同剂量的大蒜辣素和复方甘草酸苷,于CCl_(4)处理48 h后采集小鼠血液和肝脏组织,测定血清生化指标、血清中炎性因子以及肝组织MDA及CAT含量,同时采用Western blot方法检测大蒜辣素对细胞凋亡相关蛋白表达的影响。[结果]单独使用大蒜辣素对小鼠肝脏无损伤作用(P>0.05)。40、20和10 mg·kg^(-1)大蒜辣素均可显著降低CCl_(4)处理小鼠的血清AST、ALT及ALP活性水平(P<0.05),显著提高肝脏CAT含量和降低MDA含量(P<0.05)。40 mg·kg^(-1)大蒜辣素还可显著降低CCl_(4)处理小鼠血清炎性因子TNF-α、IL-1β和IL-6水平(P<0.05)以及肝组织Bax、Cleaved-Caspase 3和Cleaved-Caspase 9蛋白表达水平(P<0.05),显著提高肝组织NQO_(1)和Nrf_(2)蛋白表达水平(P<0.05)。在降低小鼠血清生化指标、炎性因子和MDA水平方面,高、中剂量的大蒜辣素优于复方甘草酸苷(P<0.05)。[结论]大蒜辣素可通过抗氧化、抗炎作用以及减少肝细胞凋亡对CCl 4引起的急性肝损伤起到缓解作用,有望成为新型保肝药物在兽医临床中应用。

乳酸菌的益生功能及作用机制研究进展

乳酸菌类益生菌是功能性食品的主要生理活性成分之一,其益生作用已经成为食品科学和临床医学领域的研究热点。本文就近年来乳酸菌改善乳糖不耐症、防治腹泻和消化性溃疡、提高机体免疫力等益生功能和作用机制的研究进展做一综述,并对研究前景提出展望,以期为我国乳酸菌的开发应用奠定基础。

戊糖片球菌的益生功能及其在食品科学领域中的应用

介绍了戊糖片球菌的抑制食源性致病菌、调节肠道免疫功能、降低胆固醇、抗肿瘤等益生功能,综述了其微生物制剂在食品科学领域中的应用,主要包括发酵肉制品、乳制品和蔬菜,并对其研究前景进行了展望。

戊糖片球菌的益生功能及其在动物生产中的应用

戊糖片球菌作为乳酸菌的一种,其益生功能越来越受到关注和重视。对戊糖片球菌微生物制剂的功能及其在动物生产、青贮饲料加工领域中的应用进行了综述,并对其研究前景进行了展望,以期为戊糖片球菌的研发提供依据。

产肠毒素大肠杆菌K88ac-STa-LTB嵌合抗原多克隆抗体制备及植物乳杆菌表面表达研究

为了研究植物乳杆菌(Lactobacillus,plantarum,L.plantarum)表面表达黏附素-肠毒素(K88ac—STa—LTB)嵌合抗原的可行性,试验利用原核表达载体pET28a表达纯化此嵌合抗原,蛋白复性后免疫Babl/c小鼠制备多克隆抗体,以制备的多克隆抗体作为一抗,采用Westem-blot、流式细胞术及间接免疫荧光试验研究此嵌合抗原在植物乳杆菌表面表达情况。结果表明:K88ac—STa—LTB嵌合抗原在大肠杆菌中以包涵体形式表达,纯化并复性的重组蛋白大小约为32.5 ku,制备的抗体效价为121b。重组菌株NC8-pLP1261-8576表达的K88ac-STa-LTB嵌合抗原经Western-blot分析,能被鼠抗LTB单克隆抗体及自制的鼠抗K88ac-STa-LTB多克隆抗体识别,流式细胞术及荧光显微镜观察证明此嵌合抗原在菌体表面表达。

锚定表达猪IFN-λ3重组植物乳杆菌的构建及其抗PEDV效果的检测

为构建锚定表达猪IFN-λ3的重组植物乳杆菌(L.plantarum),并验证其抗病毒活性,本研究将猪IFN-λ3基因插入大肠杆菌-乳酸菌穿梭锚定表达载体pSIP-409-pgsA'中构建重组质粒pSIP-409-pgsA'-IFN-λ3,将其电转化至植物乳杆菌NC8中获得重组pSIP-409-pgsA'-IFN-λ3/L.plantarum。经清酒乳杆菌素(SPPIP)诱导后用His标签单克隆抗体经westernblot、间接免疫荧光检测目的蛋白的锚定表达情况。结果显示,猪IFN-λ3在重组植物乳杆菌表面锚定表达。利用重组菌刺激细胞后通过荧光定量PCR测定IPEC-J2/PEDV系统中猪流行性腹泻病毒(PEDV)载量,并检测该重组菌刺激细胞后干扰素刺激基因(ISGs)的相对转录水平。结果显示,该重组菌能够显著抑制PEDV在IPEC-J2中的复制,并能诱导细胞中ISGs(OASL、IFITMs)的高转录水平,具有抗病毒作用。本研究为PEDV的预防和治疗提供可行方案。

屠宰场鸡源碳青霉烯耐药大肠埃希菌的耐药特征分析

[目的]本文旨在分析鸡源碳青霉烯耐药大肠埃希菌的流行及其相关耐药基因的水平转移情况,了解鸡源碳青霉烯耐药大肠埃希菌的耐药特征,为临床抗菌药物的合理使用提供参考。[方法]从江苏省某屠宰场鸡盲肠样品中分离美罗培南耐药大肠埃希菌,用微量肉汤稀释法测定分离菌株对8种抗生素的最小抑菌浓度(MIC),采用普通PCR法检测碳青霉烯类耐药基因bla_(NDM)、bla_(KPC)、bla_(VIM)、bla_(OXA)、bla_(IMPM),再通过接合试验分析bla_(NDM)基因在菌株间的转移情况,最后采用多位点序列分型(MLST)方法对bla_(NDM)阳性菌株进行序列分型(ST),使用MEGA 6.06软件构建系统发育树并进行分析。[结果]分离的37株碳青霉烯耐药大肠埃希菌全部表现为多重耐药,其中,所有菌株对阿莫西林、氨苄西林、美罗培南和头孢噻呋耐药,对恩诺沙星、环丙沙星、庆大霉素的耐药也较严重,但对替加环素均敏感。PCR检测结果显示,37株分离菌株全部携带bla_(NDM),测序比对发现均为bla_(NDM-5)亚型。接合转移试验表明bla_(NDM-5)位于可接合型质粒中,可在不同菌株间进行水平转移,体外竞争试验显示接合子存在一定的适应性代价,但其与受体菌在相同生长环境下仍具有相似的体外相对竞争力。携带bla_(NDM)的质粒在无抗菌药物压力下仍能在受体菌中稳定存在。MLST结果显示37株大肠埃希菌可分为12个ST型,其中ST101为主要流行株,占40.5%(15/37),其次为ST156型,占13.5%(5/37),其余ST型占比都低于10%。系统发育树分析表明,在进化上,ST101与ST7593可能为同一起源,ST354、ST362、ST2895为同一起源,其他几种ST型无近缘关系。[结论]bla_(NDM)基因是导致江苏省鸡源大肠埃希菌对碳青霉烯类药物耐药的主要原因,且携带NDM的质粒易通过接合作用在菌株间水平转移,需要进一步加强对碳青霉烯耐药大肠埃希菌的监测。