多变鱼腥藻半稳定状态连续培养的若干特征

分别使用恒化装置和全玻璃发酵罐连续培养多变鱼腥藻。在稳定条件下加以周期性的光照(L∶D=12∶12),经5—6d得到半稳定状态连续培养物。在光照阶段,培养物的生物量增长速度约等于稀释速度D的两倍,叶绿素的增长速度略小于D的两倍,糖原的累积速度几乎高出D^5的一个数量级。细胞内糖原和蛋白质含量变化的时间过程反映出培养物在光-暗条件下的碳氮物质合成与消耗相互联系的代谢特点。半稳定状态连续培养受培养物内在的生理活性支配,生长参数的变化符合方程X=X_(oe)^((μ-D)~t),但不同于恒浊培养和恒化培养。外界因素的强弱变化只改变生长参量变化的强度。本法适用于研究微藻的生态生理。

天然水体中痕量微囊藻毒素的高效液相色谱测定方法优化

以微囊藻毒素LR(MC-LR)和微囊藻毒素RR(MC-RR)为材料,主要通过调节杂质淋洗液和毒素洗脱液中甲醇、水和三氟乙酸(TFA)的配比来改变极性和PH值,对高效液相色谱(HPLC)法分析MC环境样品的方法进行了优化.结果表明,含0.1%TFA的40%～45%的甲醇水溶液可以取得较好的杂质淋洗效果;含0.1%TFA 的70%的甲醇水溶液可以将固相萃取柱(SPE)上的MC完全洗下.因此,建议在分析杂质较多的环境样品时,使用含0.1%TFA的40%～45%的甲醇水溶液对杂质进行淋洗,然后用含0.1%TFA的70%～100%甲醇水溶液对MC进行洗脱.

溶藻细菌DC-L5的分离、鉴定及其溶藻特性

从滇池蓝藻水华集聚区分离获得一株溶藻细菌DC-L5,通过形态及16S rDNA测序分析鉴定为短小芽孢杆菌。用小白鼠进行生物安全实验,小白鼠无中毒症状。研究表明当细菌处于对数生长期时溶藻效果最强,共培养5d使铜锈微囊藻的叶绿素a含量下降83.33%,使惠氏微囊藻、绿色微囊藻、水华束丝藻和水华鱼腥藻4种蓝藻叶绿素a下降率最高为67.6%,最低为58.5%,平均为62.25%。离心沉降后,发现沉淀菌体和无菌上清液对铜锈微囊藻都有溶藻效果,但溶藻效果不及原菌液,推测DC-L5可能是通过直接接触使藻细胞凝聚下沉及进一步的生物降解,同时存在抑制藻细胞生长的胞外分泌物。高温热处理后菌液溶藻作用不明显,推测高温可能使菌体或胞外分泌物质失活。

溶藻细菌DC-L14的分离、鉴定与溶藻特性

从滇池蓝藻水华集聚区分离获得一株溶藻细菌DC-L14,经16SrDNA序列分析鉴定为Lysinibacillus fusiformis;小白鼠毒性试验初步显示该菌株未产生小白鼠中毒毒素;该菌能使铜锈微囊藻905聚集成团,沉于瓶底,最终黄化;该菌作用4d,使惠氏微囊藻107、绿色微囊藻102、水华束丝藻和水华鱼腥藻的叶绿素a下降率最高为70.1%,最低为65.5%,平均为67.2%;当细菌处于稳定生长期时溶藻效果最强,共培养4d能使铜锈微囊藻905的叶绿素a含量下降82.1%;离心沉降后检测,发现菌体本身无溶藻效果,而无菌上清液与原菌液溶藻效果相同,高温处理后的菌液溶藻能力增强,推测该细菌是通过分泌溶藻物质溶藻,该物质可能为非蛋白质类,高温可能有利于溶藻物质的释放.

溶藻细菌DC21的分离、鉴定及其溶藻特性

从云南滇池中分离得到一株溶藻细菌DC21,经鉴定为葡萄球菌属的1种(Staphylococcussp.),可溶解铜绿微囊等9种藻.试验表明,经过滤、离心沉降及高温灭菌处理的滤液,均能强烈抑制铜绿微囊藻的生长,说明其溶藻作用的因子之一为该菌的胞外分泌物,且这种物质具有热稳定性.细菌DC21使藻的光合作用受到抑制;在试验的第1d,受试藻的超氧物歧化酶及过氧化氢酶活性显著增高,但在第7d,这两种抗氧化保护酶的活性显著下降;受试藻的丙二醛含量明显增高,说明该菌促使其发生了膜脂过氧化.

狐尾藻断枝上不定根与芽发生的初步研究

本文比较研究了不同节位和不同长度狐尾藻断枝的不定根和芽的发生时间及其形成幼苗的频率(本文中的幼苗指最终形成了不定根和芽的断枝)。结果表明:在狐尾藻顶芽以下叶已完全展开的茎段部分,不定根和芽的发生时间呈现出随着节位下降而逐渐缩短的趋势,而幼苗形成频率呈现出随着节位下降而增高的趋势;断枝的长度(用断枝所含的茎节数表示)对不定根和芽的发生时间及幼苗形成频率也有明显的影响。断枝长度增加,不定根和芽的发生时间缩短,形成幼苗的频率升高。另外与抛掷方式相比,扦插延长多节断枝的不定根和芽形成时间,但提高幼苗的形成频率。这些研究结果为制定水体生态系统中狐尾藻的恢复和管理措施提供了参考。

我国首株噬藻体(蓝藻病毒)的分离与鉴定

分离得到一株裂解织线藻和席藻的噬藻体。对该噬藻体的研究发现:光照条件是感染所必需的,但不依赖于金属离子(如镁离子);裂解织线藻的周期(27℃条件下)为4h,其中潜伏期为3h,最后的1h为裂解期,病毒释放量约200 PFU/细胞,感染过程中,织线藻的放氧速率急剧下降,此外还发现:40℃下处理10min,噬藻体保持100％活性;50℃下处理1min,失活率小于25％;50℃下处理10min,失活率为40％;60℃下处理1min,失活率为85％;60℃下处理10min,失活率大于99％,在电子显微镜下可以观察到此病毒为噬菌体形态,头部直径为52um,尾部很短,几乎不可见,该噬藻体的遗传物质为双链DNA,基因纽约36kb。

洱海鱼腥藻优势种的形态鉴定与16S rRNA基因序列分析

分别在2004年、2005年和2006年洱海鱼腥藻水华暴发时期,分离优势种,获得藻株EH-A、EH-B和EH-C,通过形态学特征和16S rRNA基因序列分析鉴定了藻株的种类。选用藻丝的形态、气囊的存在与否、异形胞和孢子的位置、各种细胞的形状以及营养细胞、异形胞和孢子的大小等传统的分类特征描述藻株的形态。依据形态特征,初步判断这3个藻株可能为卷曲鱼腥藻(Anabaena circinalis)或A.crassa株系成员。利用16S rRNA基因序列构建邻接树分析了藻株间的系统进化关系,分析表明:藻株EH-A、EH-B和EH-C序列的同源性达到100%,且与A.circicular和A.crassa藻株组成一个群(cluster),其藻株间的序列相似度高达100%,进一步说明藻株EH-A、EH-B和EH-C为相同的物种,且均为卷曲鱼腥藻(A.circinalis)或A.crassa。

全细胞PCR扩增用于鱼腥藻种类鉴定

传统鉴定藻种的方法主要是通过形态学观察的方法加以判断。蓝藻在自然条件和人工培养过程中 ,其形态、代谢能力等都可能发生变化 ,同时该过程需要的时间长 ,难以区分种或种以下的分类、单位 ,亦难以在水华暴发早期阶段准确鉴定。本文利用rDNA通用引物扩增 ,表明在 5 0 μL的反应体系中加入 2 0个鱼腥藻细胞能扩增出目的条带 ;对已知的鱼腥藻PC基因的分析设计引物 ,在BSA浓度为 0 2 %— 1% (w/v)下 ,全细胞扩增出实验室保存的四种鱼腥藻的部分PC以及PC IGS序列 ,序列分析结果表明PC

有机磷细菌的分离鉴定及其对MC-RR的响应

从云南滇池水样中分离出具有解磷能力的有机磷细菌P-2,并利用现代分子生物学技术进行了初步鉴定.用0.01、5mg·L-1微囊藻毒素(MC-RR)处理有机磷细菌P-2,研究了MC-RR对其生长、细胞内酸碱磷酸酶活性(ACP和AKP)以及培养液中可溶性磷酸盐含量的影响.结果表明,高浓度MC-RR能显著抑制有机磷细菌的生长,延缓其细胞增殖,抑制细胞内酸碱磷酸酶活性以及培养液中可溶性磷酸盐含量的升高,因而可能改变或减缓生态系统中磷循环的进程,这表明微囊藻毒素在一定程度上可能调节水体细菌功能群落.

蓝藻Anabaena sp.PCC7120羧体碳酸酐酶的鉴定

在丝状蓝藻AnabaenaspPCC7120细胞租提液的碳酸酥酶（CA）分析中，发现了两种形式的CA活性．高CO2下生长的细胞，在35pmol／LEZ（Ethoxyzoamide，碳酸醉酶的抑制剂）存在的情况下，CA总活性的85％左右被抑制，其半抑制浓度I50为7.4μmol／L；随着EZ浓度的继续增加，CA活性在EZ浓度达到约150μmol／L处出现了第二个抑制峰，在250μmol／L处抑制程度达到最大，使CA总活性的15％被抑制，其半抑制浓度I50为190μmol／L．在空气条件下生长的细胞中也出现了CA的两个抑制峰：低I50为6μmol／L，高I50为120μmol／L．对核体的分离及体外测试表明，在波体制备物中的CA活性只有一个EZ的抑制峰，而且在EZ浓度达到35μmol／L，正如所期望的那样，该CA活性全部被抑制．其半抑制浓度150为5．2μmol／L左右．这个值跟空气或高CO2条件下生长的细胞粗提物中的低I50（6μmol／L或7．4μmol／L）十分相似．说明低浓度的EZ可以特异性地抑制定位于校体的CA活性．另外一种形式的CA，具有高I50（120－190μmol／L），约占CA总活性的15－20％，则有可能定位于细胞质膜．

母鸡输卵管子宫部初级感觉神经元的CB-HRP法定位研究

应用CB-HRP溶液注入母鸡输卵管子宫部浆膜下,四甲基联苯胺(TMB)组织化学呈色,以探察母鸡输卵管子宫部初级感觉神经元的定位。结果表明:母鸡输卵管子宫部的初级感觉神经元位于双侧T1-LS13脊神经节、颈静脉神经节和结状神经节。标记细胞数分布不均,在体左侧多于体右侧,在脊神经节多于颈静脉神经节和结状神经节。在脊神经节内标记细胞有T5-LS1和LS8-LS11前后两个相对集中区,峰值分别在T7和LS11。说明尽管母鸡输卵管子宫部是单侧发育成熟脏器,但其感觉沿双侧脊神经和迷走神经传入中枢,以体左侧传入为主;且感觉经脊神经传入较迷走神经传入中枢优势明显。

滇池不同湖区浮游动物群落稳定性及其驱动因子分析

为了揭示滇池不同湖区浮游动物群落稳定性及其驱动因子,于2020年对滇池草海、大泊口、外海3个具有一定空间分隔的区域,按季度进行4次采样调查。结果表明,大泊口区域的溶解氧、透明度指标显著高于外海,总氮、总磷、悬浮物、叶绿素a和化学需氧量等指标浓度显著低于外海,草海理化因子浓度介于大泊口与外海之间。研究期间3个区域共鉴定出浮游动物41属(枝角类12属、桡足类8属、轮虫21属),轮虫种类和密度均占较大比例。浮游动物年平均密度大泊口(7771.3 ind./L)>草海(2901.1 ind./L)>外海(634.8 ind./L);年平均生物量草海(3.72 mg/L)>大泊口(2.15 mg/L)>外海(2.09 mg/L)。非参数多元方差分析(PERMANOVA)与相似性百分比分析(SIMPER)结果表明,滇池3个区域间浮游动物群落结构差异极显著,导致大泊口与草海、外海群落结构呈极显著差异的属种为轮虫类群的种类,导致草海与外海群落结构呈极显著差异的属种为枝角类和轮虫类群的种类。此外,浮游动物群落稳定性与物种多样性呈显著的正相关关系,且经过生态修复后水质有所改善的湖区其浮游动物群落稳定性反而有所下降。Pearson相关性分析与冗余分析结果表明,影响浮游动物群落稳定性的主导环境因子为溶解氧、pH和叶绿素a。本研究结果发现滇池异质生境的浮游动物群落稳定性存在较大差异,生态修复后短期内水环境的变化会降低以耐污种为优势所形成的浮游动物群落稳定性。

黄河中游土壤藻类的种类组成与土壤肥力的关系

在中国科学院封丘农业实验站研究了粘土、沙壤上、轻壤上等土壤中的藻类组成、分布和营养需求．结果表明共有56个种，其中分离纯化了33个种．藻类物种多样性随土壤中有机肥料或无机N．P．K肥的增多而增加．相同的种类在不同时间有不同的营养需求，可以据此阐明土壤藻类群落组成变化与土壤肥力的关系．

使用机器学习算法分类P2P流量的方法

P2P应用的快速增长,带来网络拥塞等诸多问题,而传统的基于端口与有效载荷的P2P流量分类方法存在着很多缺陷。以抽取独立于端口、协议和有效载荷的P2P流的信息作为特征,用提出的基于ReliefF-CFS的方法选择流的特征子集,研究使用机器学习算法对P2P流量进行分类的方法,也研究了利用流的前向N个报文的统计信息作为特征,分类P2P流量的方法。实验结果显示提出的方法取得了较好的分类准确率。

土壤藻类及其生理生态

人类对土壤藻类的认识至少可以追溯到三千多年前的我国诗经时代。Prescott引用Porterfield的研究并阐述说:尽管藻类学作为一门科学是由西方文化中诞生的,但最早的文字记载出现在中国的古典著作中,在诗经中人们可以发现采集和食用念珠藻(Nostoc)的文献记录……。他们还提到,古希腊的贤哲对念珠藻也有过观察。但是,尽管十七、十八世纪前后在我国和欧洲对土壤藻类都有了较细微的描述性记录。

空间环境中水生生物二元生命封闭系统结构与功能的研究

利用返回式卫星搭载的“空间通用生物培养箱”进行了2种二元微生态系统（螺-自养藻及异养藻-自养藻）共3个组合的空间结构与功能的实验研究，第1种组合因生保条件不足，螺未能存活；第2种组合运行良好，其中的气体组份与大气中的组份相近；第3种组合基本运行正常，其中的异养藻仍具有捕食性．

藻类蛋白生产基地的平菇高产轮作研究

迄今尚未见将藻类生产与食用菌生产结合研究的报导。1983年以来,我们在研究发展藻类生物技术,进行藻类蛋白工厂化生产试验的同时,利用生产藻类蛋白的塑料大棚冬闲时间生产食用菌,连续五年获得平菇大面积高产丰收,取得显著效益。1987年平菇培养面积1680平方米,产菇42.1吨,产值5.31万元。同时,我们还发现藻类提取物与菌块提取物在分别促进菌、藻生长中的一些生物学作用。这里,将大棚生产平菇阶段的结果报导如下。材料与方法生产基地位于湖北省黄梅县境内,地处长江中游江汉平原东部。采用菌株系由平菇(Pleurotus ostrea-tus)中经选育得到的品系。菌种经二级扩大,

空间生物学研究最新进展(1996—1997)Ⅰ.当前热点和对重力感受传导的研究

通过1996－1997年间涉及空间生物学领域的最新文献综述研究，可以看出该领域的主要研究方向包括空间飞行或微重力条件下生物体的生长发育、代谢、行为、细胞和组织、遗传和分子生物学、神经和免疫、重力感受传导、种群和系统、方法、应用等10个方面．在此基础上，侧重说明空间生物学领域中微重力生物学、空间生理学、空间细胞和组织工程、空间探索几个热点的最近研究状况。