LINC00152通过PI_(3)K/Akt/NF-κB信号通路调控LPS诱导小胶质细胞炎性反应的机制研究

目的探讨lncRNA LINC00152对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的HMC3小胶质细胞炎性反应的作用机制。方法将体外培养的HMC3随机分成4组,即空白组(以完全培养基培养)、LPS组(在空白组基础上加入1μg/ml LPS干预)、阴性对照组[即LPS+反义寡聚核苷酸(ASO)-NC组,在LSP干预基础上转染ASO]和LPS+ASO-LINC00152组(在LSP干预基础上转染ASO-LINC00152)。流式检测CD86^(+)(M1型)、CD206^(+)(M2型)细胞比例,酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测细胞培养上清液中TNF-α、IL-1β、IL-6水平,以及细胞中iNOS活性,实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)检测PI_(3)K、Akt、p65基因表达水平,Western blot法检测PI_(3)K、Akt、p-Akt、p65、p-p65蛋白表达。结果与空白组比较,LPS组、LPS+ASO-NC组和LPS+ASO-LINC00152组CD86^(+)比例、TNF-α、IL-1β、IL-6、iNOS表达升高(P<0.05),p-Akt、p-p65表达增加(P<0.05),而LPS组和LPS+ASO-NC组CD206^(+)比例下降(P<0.05)。与LPS组比较,LPS+ASO-NC组CD86^(+)比例升高(P<0.05),iNOS活性增强(P<0.05),而LPS+ASO-LINC00152组CD86^(+)比例下降(P<0.05),CD206^(+)比例升高(P<0.05),IL-6水平下降(P<0.05),iNOS活性减弱(P<0.05),p-Akt、p-p65表达减少(P<0.05)。与LPS+ASO-NC组比较,LPS+ASO-LINC00152组CD86^(+)比例下降(P<0.05),CD206^(+)比例升高(P<0.05),iNOS活性减弱(P<0.05),p-Akt、p-p65表达减少(P<0.05);各组间PI_(3)K、Akt、p65基因及蛋白水平比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论ASO-lncRNA LINC00152可通过调控PI_(3)K/Akt/NF-κB信号通路,使LPS诱导的小胶质细胞表型发生改变,减少炎性细胞因子释放,从而发挥抑制炎性反应的作用。

液相沉积法制备蛋白质印迹聚合物及吸附性能表征

本文采用液相沉积法制备蛋白质印迹聚合物,并对其形貌、吸附性能、特异性、选择性吸附进行表征。实验结果表明:用液相沉积法制备的蛋白质印迹聚合物具有规则球形形貌;通过与非印迹聚合物吸附性能的对比,结果表明蛋白质印迹聚合物具有较好的特异性、选择性吸附能力。以上实验结果说明液相沉积法是一种制备蛋白质印迹聚合物的良好方法。