“温和”差异裂解法在性侵积案检验中的应用

本文通过分享一起性侵积案的检验过程及成功经验,总结出一种独特的“温和”差异裂解法,为处理陈旧混合斑检材提供一种新的解决方案。生物检材为案发时受害人穿的秋裤,前期PSA确证实验的结果为阳性,并通过一步裂解法获得了比较完整的男女混合DNA分型,随后通过常规的差异裂解法仅能获得上清女性分型,沉淀部分未获得有效分型结果。经过多次摸索,尝试将第一步女性成分裂解条件变为:裂解液1 mL,蛋白酶K(protease K,PK)工作浓度50μg/mL,37℃裂解20 min;女性成分消化结束后,沉淀洗涤次数调整为1 mL超纯水洗涤1次,最终成功获得了单一女性及单一男性的DNA分型。后续利用模拟的男女混合斑样本对该方法进行进一步测试,发现当混合斑中男女成分的比例不超过1∶40时,该方法具有良好的效果。

痘苗病毒天坛株J6R启动子的克隆及其功能研究

本文利用DNA多聚酶链反应(Polymerase chain reaction,PCR)技术克隆了天坛株痘苗病毒J6R启动子(F_(12)启动子),表明PCR技术可以一次性地对需克隆的痘苗病毒启动子进行扩增与修饰。对J6R启动子的功能研究结果显示,J6R启动子能有效启始lacZ基因在大肠杆菌中的表达。该启动子为早期启动子,但有部分晚期活性,在哺乳动物细胞中的功能较报道的WR株F12启动子弱。对此进行了分析和讨论。

人D6S1043-1型STR质粒DNA标准物质的研制

短串联重复序列(short tandem repeat,STR)是存在于人类基因组中的一类具有长度多态性的DNA序列,由含2~6个碱基对的重复单位串联构成。DNA STR分型检验是当前法庭科学进行个体识别和亲缘鉴定的主要依据。STR分型标准物质是DNA STR检验量值溯源的基础和关键物质,对其进行研究将极大推动我国法庭科学DNA STR检验的标准化进程。以STR基因座D6S1043为例,介绍人类基因组中STR序列的质粒DNA标准物质的制备过程。首先,合成包含13个重复单元([ATCT]13)的D6S1043序列(定义为D6S1043-1)并将其与pUC57载体连接构建重组质粒,制备质粒溶液。其次,通过酶切鉴定、Sanger测序、多种STR分型试剂盒的分型鉴定等方法检验DNA序列的准确性。再次,采用微滴式数字PCR方法(droplet digital PCR,ddPCR)检测质粒浓度,评估质粒溶液的均匀性和稳定性。最后,由8家实验室协作,测定浓度标准值,综合分析均匀性检验、稳定性检验、定值过程等引入的不确定度,得到总不确定度;由6家实验室协作,测定D6S1043-1的分型值。结果表明:该标准物质的均匀性、稳定性良好,在-20℃可保存6个月,在4℃可保存14 d;核酸拷贝数为(7.7±1.2)×10^3 copies·μL^-1;在D6S1043基因座上的分型值为13。人D6S1043-1型STR质粒DNA标准物质[编号:GBW(E)091072]是我国法庭科学DNA检验领域首批有证标准物质之一,其研制过程为其他STR基因座的质粒DNA标准物质的研制提供了一定的借鉴。

4D移动教室

“大漠孤火烟直，长河落日圆……”语文老师声情并茂地朗诵等唐代诗人王维的五言律诗《使至塞上》。这首诗描绘了塞外簧昏雄奇壮观的景象，然而很多没有到过沙漠的同学很难想象出诗人所描绘的壮美景象。不要着急，只见老师轻轻摁下讲台上的一个按钮，教室四周的墙壁慢慢变得透明，浩瀚无垠的大沙漠上，但见孤零零的一股浓烟拔地而起，笔直地冲上云霄；地平线上，横贯千里的黄河上空，一轮孤悬欲坠的红日显得格外浑圆。