利用噬菌体随机肽库筛选Rh(D)血型抗原的模拟表位

目的从纯化的人抗Rh(D)抗体阳性血清中筛选Rh(D)血型抗原模拟表位。方法用纯化的多克隆抗Rh(D)抗体血清对噬菌体随机十二肽库进行3轮"吸附-洗脱-扩增"过程筛选,随机挑取噬菌体克隆;用ELISA法检测其特异性及其与抗体的结合能力。提取阳性克隆DNA并进行测序,推导外源多肽的氨基酸序列。凝集抑制试验检测噬菌体展示的多肽对Rh(D)血型抗原结合的模拟作用。结果经过3轮筛选和相应鉴定后得到6个抗Rh(D)抗体的特异性噬菌体克隆,其中4个克隆展示相同的氨基酸序列为PSQGYVILLDEK,命名为C2,另外2个克隆展示相同的氨基酸序列为TMLNRAHDFSEC,命名为C21。凝集抑制试验结果表明这两个多肽的噬菌体可以抑制Rh(D)抗原阳性红细胞的凝集作用。结论多肽PSQGYVILLDEK和TMLNRAH-DFSEC可以模拟Rh(D)血型抗原表位。

某三级甲等医院2010年临床输血回顾性分析

目的回顾分析某三甲医院全年临床输血情况,为科学管理和调配血液资源以及血站的储采工作提供依据。方法采用输血科管理软件统计该院2010年输血总量、各科室用血情况及成分输血率,选择其中的内外科有关科室输血情况进行详细分析,最后分析输血量与季节的关系。结果 2010年该院输血总量为68 331单位,外科输血总量为39 471单位,内科输血总量为20 181单位,成分输血率达到99.89%。外科以心外科输血量最多,内科以血液科输血量最多。各种血液成分的使用总量与季节有关。结论定期对临床输血情况进行统计分析,对于制定储血计划、避免盲目采血和保护血液资源等具有重要意义。

白细胞单采术治疗高白细胞白血病的临床应用

高白细胞白血病（HLL）的外周血白细胞（WISC）〉100×109/L,可出现高白细胞综合征及白细胞溶解综合征,病情凶险,治疗效果差,病死率高[1]。本科2006年7月～2011年12月应用COBE spectra血细胞分离机对28例患者进行化疗前先行白细胞单采治疗,取得良好疗效,现报告如下。

应用TEG监测冠心病患者的凝血状态及评价抗血小板聚集效果的临床研究

目的:探讨应用血栓弹力图(thromboelastography,TEG)监测冠心病(CHD)患者服用抗血小板聚集药物后体内的凝血状态以及抗血小板聚集的效果。方法:选取71例冠心病患者为CHD组和380例TEG检测结果正常的健康体检者为对照组。所有冠心病患者入院后按常规治疗方案给予临床推荐剂量的抗血小板聚集药物后用血栓弹力图仪监测凝血的基础指标(包括R值、K值、α角、MA值、CI值)及一系列血小板抑制率相关指标。结果:CHD组中患者的TEG各凝血基础指标80%以上均在正常参考值范围之内;与对照组相比,CHD组R值、MA值、α角和CI值无显著性差异,但K值显著性增高(P <0.05)。与对照组相比CHD组男性患者比率明显增多,年龄显著增高(P <0.05)。CHD组血小板抑制率在50%以上的抗血小板聚集效果显著的患者占83.10%;且以MA_(ADP)、MAck和MA_A为参考依据的抗血小板聚集的相关指标中,提示有血栓形成风险的冠心病患者分别占9.86%、4.23%和12.68%。CHD组中所有的抗血小板聚集的相关指标中,与年龄相关性最强的指标为MAck(相关系数0.111),与体质量相关性最强的指标为ADP%(相关系数0.160)。结论:TEG结果能够为临床医师提供有价值的凝血信息,并且在冠心病患者的抗血小板临床诊治上有一定的指导意义,同时TEG检测的应用还可为下一步冠心病患者的个体化临床治疗提供预判的依据,从而更加精准地指导和保障临床抗栓治疗的安全性。

PCR-微流芯片检测HBV DNA在血液筛查中的初步应用

目的 探讨在血液筛查中检测HBVDNA的必要性及应用PCR 微流芯片检测献血者HBVDNA可运 行模式。方法用PCR 微流芯片检测已经过常规ELISA初、复检全项测定合格献血者的微量血清汇集池(5人 份×50μl)HBVDNA,再对阳性血清汇集池中的标本进行单份检测。用HBVDNA(-)的献血者血清系列稀释 HBVDNA标准质控血清,分别测定其含量,以确定该方法的灵敏度;分别检测37例HBeAg(+)、16例HCV RNA(+)、3例抗 HAVIgM(+)患者标本的HBVDNA,观察其特异性;再重复检测不同稀释度的HBVDNA标 准质控血清,以了解其批内、批间变异。结果 545份(分109个血清汇集池)无偿献血标本中有7份HBVDNA阳 性(1.28%)。PCR 微流芯片法检测HBVDNA敏感度为4.81×102拷贝/ml;HBeAg(+)患者的HBVDNA阳性 检出率为100%(37/37),而HCVRNA(+)、抗 HAVIgM(+)患者的HBVDNA全为阴性;批间、批内变异范围 分别为15.6%～40.2%、11.9%～30.6%。结论无偿献血者开展HBVDNA检测是必要的。PCR 微流芯片法 具有操作简便、快速、敏感度高、特异性强、重复性好等特点,把它应用于血液筛查中并利用混合标本检测HBV DNA是可行的,这将有助于进一步提高输血的安全性。

同种输血对食管癌患者围手术期细胞因子的影响

目的 探讨同种输血对食管癌患者细胞因子生成的影响及相互关系。方法 食管癌患者手术常规输血18例 ,去白细胞输血 14例 ,采用生物素 亲和素系统测定技术检测患者围手术期常规输血和去白细胞输血后血清中IL 10、IFN γ和TNF α的浓度。结果 常规输血后第 1天与输血前相比血清中IL 10、IFN γ和TNF α浓度升高 ,且以IL 10、IFN γ变化尤为显著 ;输血后第 5天IFN γ和TNF α降低接近输血前水平 ,并明显低于去白细胞输血组 ,IL 10仍明显高于输血前水平。去白细胞输血后不同时间IL 10无显著性改变。结论 食管癌患者围手术期同种输血后血清中IFN γ和TNF α的降低与IL 10升高有关 ,而IL 10升高可能是患者同种输血后免疫抑制的最重要原因 ,输注去白细胞血液可减轻或去除这一作用。

安徽蚌埠地区卡波氏肉瘤相关疱疹病毒的血清阳性率研究

目的研究安徽蚌埠地区卡波氏肉瘤相关疱疹病毒(KSHV)在普通人群中的感染情况,并初步分析KSHV感染的危险因子。方法选择KSHV ORF65、ORF73和K8.1编码的病毒蛋白为抗原,采用酶联免疫法对1 008份普通人群血清进行了KSHV抗体检测。结果在检测的1 008份血样中,KSHV抗体的总阳性率为4.3%,其中男为3.9%,女为4.6%。统计学分析结果显示,KSHV感染率没有性别差异,在年龄上也基本无差异。结论在中国安徽北部地区的普通人群KSHV的感染率较低,且KSHV的感染与年龄及性别之间无明显相关性。

人RHD基因的克隆和鉴定

目的克隆人RHD基因,并对其进行鉴定。方法以RhD阳性志愿者骨髓为材料,用TRIzol试剂提取总RNA;设计、合成人RHD基因扩增引物,RT-PCR方法扩增RHD基因片段;T/A克隆后将其亚克隆入pET28a(+)载体中,经酶切、PCR和测序对重组质粒进行鉴定。结果骨髓总RNA被成功提取;RT-PCR成功扩增出RHD基因片段,其大小与预期约509 bp基本一致;T/A克隆后再将其亚克隆,通过酶切和PCR证明RHD基因成功亚克隆入pET28a(+)载体中;基因测序结果比对显示,与已公布的RHD基因(GenBank登录号为NM016124)序列基本一致,同源性为98%。结论成功克隆了RHD基因,这将为进一步研究奠定基础。

HBsAg、抗-HCV、抗-TP混合室内质控物的制备和应用

目的 试制HBsAg、抗 HCV、抗 TP混合室内质控物 ,对其应用效果进行评价。方法 分别以复检阳性的报废全血作为原料 ,以一定的比例混合 ,用 10 %小牛血清PBS缓冲液稀释 ,使用同一批号、不同品牌和同一品牌不同批号的诊断试剂盒进行检测 ,比较其结果差异。结果 试制的室内质控物保存于不同的温度下 ,其检测结果差异无显著性 (P >0 0 5 )。使用不同品牌和同一品牌不同批号的诊断试剂盒 ,HBsAg、抗 HCV、抗 TP批间变异范围分别为 10 7%～14 5 %、11 7%～ 14 9%。结论 混合室内质控物制备容易 ,测定结果稳定 ,在血站系统有一定的推广价值。

同种输血对食管癌患者一氧化氮生成的影响

目的 探讨同种输血对食管癌手术患者一氧化氮 (NO)生成的影响。方法 食管癌手术患者 18名 ,以输注去白细胞血液的食管癌手术患者为实验对照 ,以 2 0名健康志愿者为正常对照 ,采用硝酸还原酶法检测血清中NO3 -/NO2 -来反映NO生成水平。结果 ①食管癌患者的血清中NO3 -/NO2 -浓度与正常人相比无差异。②实验组输血后第 1天与输血前相比血清中NO明显降低 (P <0 .0 1) ,并显著低于实验对照组 (P <0 .0 1)。结论 食管癌患者围手术期同种输血可导致血清中NO浓度降低 ,而输注去白细胞血液患者血清中NO浓度下降不明显。因此 。

血浆置换治疗血栓性血小板减少性紫癜临床疗效的观察

目的观察血浆置换治疗血栓性血小板减少性紫癜的临床疗效。方法回顾分析2013年1月—2018年6月本院14例确诊为血栓性血小板减少性紫癜患者的临床特征及进行血浆置换治疗后的疾病转归情况,分析血浆置换治疗过程中不良反应发生情况。结果 14例血栓性血小板减少性紫癜患者共进行了47次血浆置换,经过血浆置换治疗后10例患者病情好转恢复出院,血浆置换治疗血栓性血小板减少性紫癜患者的总有效率为71.4%。47次血浆置换术中共发生了3次不良反应,其不良反应发生率为6.4%。结论血浆置换是治疗血栓性血小板减少性紫癜的有效方法,患者一旦确诊或高度怀疑为血栓性血小板减少性紫癜时需尽早开始血浆置换治疗。

多克隆抗RhD抗体的纯化和鉴定

目的纯化人血清中多克隆抗RhD抗体,并对其进行鉴定。方法收集5例RhD阴性者血清,经不规则抗体筛查和确认后,按等比例混合,分别用RhD(-)A型红细胞和RhD(-)B型红细胞对血清中的抗A、抗B抗体于4℃过夜吸收处理;用RhD(+)O型红细胞制备血影细胞,以血影细胞作为抗原,吸附血清中抗RhD抗体,再用低pH值缓冲液洗脱、分离纯化抗RhD抗体,用DEAE-Sephadex A-50层析法提取其中IgG组分;分别用western blot、微柱法鉴定。结果 5名研究对象血清中均含抗RhD抗体;血清中的抗A和抗B血型抗体被完全吸收,纯化后抗RhD抗体IgG组分效价达到1∶32。结论本实验获得了高效价的抗RhD多克隆抗体,为进一步利用噬菌体肽库获得RhD血型抗原表位研究等奠定基础。

多重聚合酶链反应用于人血小板抗原-2、-4、-5系统基因分型的研究

目的建立用于检测人血小板抗原(HPA)-2、-4、-5系统基因型的多重聚合酶链反应(PCR)。方法在一个反应体系中同时扩增HPA-2、-4、-5系统特异性目的基因片段。用琼脂糖凝胶电泳确定HPA-2、-4、-5系统基因型;再用多重PCR对75名健康的单采血小板者进行HPA-2、-4-、5系统基因分型,分型结果与PCR-序列特异性引物(PCR-SSP)获得的结果进行比较。结果HPA-2、-4、-5系统分型的结果为:70名为2 a/2 a型,5名为2 a/2b型;73名为4 a/4 a型,2名为4 a/4b型;66名为5 a/5 a型,9名为5 a/5b型。未发现2b/2b、4b/4b及5b/5b纯合子个体。多重PCR结果与PCR-SSP方法获得的结果一致。结论多重PCR具有操作简便、快速、准确等特点,可以用于血小板血型抗原基因分型。

肾移植细胞毒交叉配型实验的临床分析及其意义

目的总结分析微量淋巴毒交叉配型实验结果,探讨供受者基本情况分布及其临床意义。方法回顾性344例患者结果,分析供受者年龄、性别、血型分布以及供受者关系对微量淋巴细胞毒交叉配型实验结果的影响等。结果受者方面:受者中男性数量多于女性;受者年龄主要分布在21~50岁,其中低风险组中31~40岁受者死淋巴细胞百分比(PDL)最低(3.85±2.08);受者血型主要是A型和O型,供受者血型一致约占85.17%。供者方面:72.67%的供者是心脏死亡器官捐献(DCD),低风险组中DCD组受者PDL为(5.30±2.24),高于活体亲属捐献(LDR)组受者PDL,差异有统计学意义(P<0.05);在LDR组中,女性供者多于男性,年龄>50岁的供者最多,O型供者最多,93.02%的供者是父母亲。结论虽然DCD例数多于LDR,但是LDR受者PDL阳性率更低,且能够更快地提供肾源,有效解决肾衰竭患者的病痛。

人类血小板抗原-1系统基因分型方法的建立及初步应用

目的建立人类血小板抗原-1系统的基因分型方法,并对本地区献血小板者进行血小板抗原-1基因分型。方法以人类基因组DNA为模板,设计特异性引物,扩增目的基因,用琼脂糖凝胶电泳观察;同时将PCR产物纯化后进行测序,将其结果进行同源性比较;再用已建立的方法对本地区的献血小板者进行人类血小板抗原-1基因分型。结果成功建立了人类血小板抗原-1基因分型方法;本地区的HPA-1a、HPA-1b基因频率分别为97.7%、2.3%。结论构建的人类血小板抗原系统-1基因分型方法结果准确,操作简单,为建立血小板血型库奠定基础。

安徽省安庆地区卡波肉瘤相关疱疹病毒感染的危险因素分析

目的探讨安徽省安庆地区卡波肉瘤相关疱疹病毒(KSHV)在普通人群中的感染情况,并初步分析KSHV感染的危险因子。方法选择KSHV ORF65、ORF73和K8.1编码的病毒蛋白为抗原,采用酶联免疫法对1 006份普通健康人群血清进行KSHV抗体检测。结果在检测的1 006份血样中,KSHV抗体的总阳性率为5.3%,其中男性为5.6%,女性为5.5%。KSHV感染率与梅毒感染有显著相关性,但是其与年龄、性别、血型及乙肝五项间无明显相关性。结论中国安徽安庆地区的普通健康人群KSHV的感染率较低,其中KSHV的感染率与性病梅毒感染具有显著相关性。

互联网环境下商标合理使用制度的新发展

网络改变了经济活动和商业行为模式,也使得传统的商标法适用受到新的挑战。我国尚未对商标的合理使用做出系统而详尽的法律规定,但各行政机关和人民法院已经在实践中运用它解决相关纠纷,网络环境下又产生了新的商标权利限制问题。允许合理使用他人商标是对商标权利加以限制的重要制度内容,其目的在于平衡社会公众与权利人之间的利益。在传统领域认定商标合理使用并非易事,而当商品和服务进入互联网时代,商标使用的情形更加多样和复杂,对商标合理使用的认定也更加困难。通过分析我国的立法现状与世界各国的实践经验可以看出:进一步阐明商标合理使用的概念并细化其判断标准,进而将其制度化,具有现实性与必然性,可为我国尽快完善商标合理使用制度提供参考。

以心理健康教育大力促进高校思想政治工作

思想政治工作对学生的发展至关重要。针对目前高校大学生发展的新特点,提升思想政治工作效能,高校辅导员需要将心理健康教育与思想政治教育相结合,以此促进学生更好地全面发展。

浅析关联公司基于字号侵权的诉权问题——由“采埃孚”案引发的思考

最高人民法院2014年审判的“采埃孚”商标侵权及不正当竞争纠纷一案中,明确了母公司与关联公司基于同一知名(指为公众所熟知,下同)字号(商号,下同),两者之间因投资关系而形成了许可与被许可的关系。而根据字号权自身的地域性的属性,其没有许可的正当性基础。此外,母公司与关联公司之间的许可关系,也会导致实践中的母公司与关联公司诉权问题产生争议。本文结合相关判例、法律规定以及理论研究提出知名字号可许可的正当性基础以及基于字号的双重性身份,母公司与关联公司均可获得独立诉权。