泛素蛋白酶系统在四氧嘧啶诱导的糖尿病大鼠视网膜中的表达

目的:建立泛素蛋白酶系统(UPS)在正常和8周糖尿病大鼠视网膜的表达图谱,探讨其在糖尿病视网膜病变(DR)发生发展中可能的分子机制。方法:在限制片段差异显示PCR(RFDD-PCR)技术建立正常和8周糖尿病大鼠视网膜基因表达谱的基础上,对差异片段进行生物信息学分析,筛选UPS DR相关基因,并以免疫组织化学、半定量RT-PCR技术进行验证。结果:RFDD-PCR结果显示,泛素蛋白酶系统DR相关基因UBS3A、PSMD8和PSMD11在糖尿病组表达上调。RT-PCR结果显示,糖尿病组UBS3A表达比正常组明显增高,PSMD8和PSMD11则仅在糖尿病组中表达。免疫组织化学结果显示,正常组UBE3A阳性免疫反应物见于内丛状层,外丛状层和锥、杆体细胞层,PSMD8和PSMD11未见阳性细胞;糖尿病组UBE3A、PSMD8和PSMD11阳性细胞明显增多,见于节细胞层、内核层和外核层。结论:UPS与DR发生发展有关。

XIAP在鼻咽癌细胞株CNE1、CNE2和5-8F中的表达与研究

目的比较CNE1、CNE2及5-8F鼻咽癌细胞株中X链锁调亡抑制蛋白(XIAP)的表达差异。方法体外培养鼻咽癌细胞株CNE1、CNE2及5-8F,采用RT-PCR法检测CNE1、CNE2及5-8F细胞株中XIAP基因表达情况。结果 XIAP基因在CNE1低表达,而在CNE2和5-8F高表达。结论 XIAP与NPC的恶性程度和转移潜能有关。

股骨距的解剖与生物力学研究

目的:研究股骨距的解剖及生物力学特性,为临床应用提供依据。方法:制作股骨距标本,测量股骨距长度、夹角等参数,显微镜下观察股骨距显微结构特点,并进行股骨距力学实验。结果:股骨距平均长度为51.32±0.67mm,股骨距长轴与股骨颈长轴的夹角为36.55±4.50°。去除股骨距的股骨压缩强度明显低于保留股骨距的压缩强度(P<0.05)。结论:股骨距解剖结构复杂,在股骨力学负重中起重要作用。

β-淀粉样蛋白1-42寡聚体诱导的阿尔茨海默病大鼠海马的Bcl-2表达和caspase-3活性变化

目的：研究β-淀粉样蛋白1-42（Aβ1-42）寡聚体诱导痴呆大鼠脑海马区的Bcl-2表达和caspase-3活性变化及其意义.方法：采用Morris水迷宫法筛选出逃避潜伏期少于60 s的60只SD雄性大鼠随机分为4组,即正常对照组、PBS对照组、Aβ1-42纤维组、Aβ1-42寡聚体组.通过脑立体定位仪将Aβ1-42纤维体、Aβ1-42寡聚体注入大鼠右侧脑室,制备AD大鼠模型.RT-PCR法检测大鼠海马Bcl-2 mRNA、caspase-3 mRNA的表达,用免疫印迹测定大鼠海马区Bcl-2蛋白表达和caspase-3活性.结果：与正常对照组及PBS对照组比较,模型组大鼠海马区Bcl-2 mRNA和Bcl-2蛋白表达较低,Aβ1-42纤维组Bcl-2的蛋白表达高于Aβ1-42寡聚体组;Aβ1-42寡聚体组的caspase-3 mRNA表达以及caspase-3蛋白活性高于Aβ1-42纤维组.结论：Aβ1-42寡聚体可下调Bcl-2表达,活化caspase-3.

融合蛋白pTAT-XIAP的原核表达及穿透血脑屏障功能的鉴定

目的构建pTAT-XIAP原核表达载体,以获得pTAT-XIAP融合蛋白,并研究该融合蛋白穿透血脑屏障的功能。方法在体外合成大鼠XIAP基因,将其插入pTAT-HA质粒,构建pTAT-XIAP融合蛋白表达载体,转入大肠杆菌表达菌株BL21plysS进行诱导表达。pTAT-XIAP融合蛋白经Ni-NTA亲和层析纯化,SDS-PAGE及Western印迹鉴定融合蛋白。pTAT-XIAP融合蛋白腹腔注射SD大鼠体内,免疫荧光法检测在脑组织的分布。结果表达产物经SDS-PAGE及Western印迹分析后,在64kD处有一明显表达条带,与理论结果相符。免疫荧光法检测,pTAT-XIAP融合蛋白在大脑皮质、基底节等广泛分布。结论重组融合蛋白pTAT-XIAP成功表达并可穿透血脑屏障,为进一步研究该基因的功能奠定了基础。

X-连锁凋亡抑制蛋白在鼻咽癌中的表达及其意义

目的探讨X-连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)表达在鼻咽癌发生发展过程中的作用,以及XIAP表达与鼻咽癌分化程度和淋巴转移的关系。方法应用RT-PCR法检测45例鼻咽癌组织、17例正常鼻咽组织和鼻咽癌细胞株5-8F、CNE-2中XIAP mRNA的表达,并通过免疫组化SP法检测鼻咽癌组织及癌旁组织XIAP蛋白的表达情况。结果 XIAP mRNA在5-8F、CNE-2和鼻咽癌组织中呈高表达,正常鼻咽组织不表达或低表达;鼻咽癌组织和正常鼻咽组织XIAP mRNA阳性检出率分别为86.67%(39/45)和35.29%(6/17)(P<0.01);在鼻咽癌组织和癌旁组织中,XIAP蛋白阳性检出率分别为82.22%(37/45)和24.44%(11/45)(P<0.01);鼻咽癌组织XIAP蛋白表达与肿瘤分级和淋巴转移无关(P>0.05)。结论 XIAP在鼻咽癌中高表达,可能在鼻咽癌发生过程中具有重要的作用。

OGG1 mRNA在鼻咽癌组织中的表达及其意义

目的:探讨OGG1 mRNA表达在鼻咽癌发生发展过程中的作用,以及OGG1 mRNA表达与鼻咽癌患者的癌细胞分化程度和淋巴转移之间的关系。方法:通过HE染色从组织病理学上确定鼻咽组织的良、恶性以及恶性组织的分级。应用RT-PCR法检测45例鼻咽癌组织和17例正常鼻咽组织中OGG1 mRNA的表达情况。结果:鼻咽癌组织OGG1 mRNA表达的阳性率为57.78%,明显低于正常鼻咽组织(88.24%),两者比较差异有显著性(P<0.05)。OGG1 mRNA表达随分化程度降低而降低(P<0.01),有淋巴转移的患者低于无淋巴转移的患者(P<0.05)。结论:OGG1 mRNA在鼻咽癌组织中表达水平明显降低,提示它与鼻咽癌发生发展有关;鼻咽癌组织OGG1 mRNA表达水平的差异,对鼻咽癌的病理诊断及其分级有参考价值。

pTAT-XIAP融合蛋白表达载体的构建

目的探索pTAT-XIAP融合蛋白表达载体的构建。方法在体外合成大鼠XIAP基因,将其插入pTAT-HA质粒,构建pTAT-XIAP融合蛋白表达载体,将pTAT-XIAP质粒转化至DH5α,培养筛选成功转化子,提取纯化质粒,电泳鉴定。结果pTAT-XIAP质粒在含氨苄青霉素的LB固体培养基上呈分散菌落生长,在无氨苄青霉素的LB固体培养基上成片生长,未经质粒转化的DH5α感受态细胞在含氨苄青霉素的LB固体培养基上未见菌落生长。电泳结果显示pTAT-XIAP质粒约4500bp,pTAT-HA质粒约3000bp,条带大小与质粒图谱一致。结论将大鼠XIAP基因插入PTAT-HA质粒,成功构建pTAT-XIAP融合蛋白表达载体。

学科整合模式在神经系统教学中的应用

神经系统内容多、学时少,学生普遍反映学习难度大,为此在教学中尝试了学科整合的教学模式,将不同学科的知识融合到神经系统教学中,以临床病案为引导来激发学生学习兴趣,并构建新模式下的自主学习网站,结果在学生学习风气、学习兴趣和考核成绩等方面均取得了良好效果。

幻灯片动画在神经解剖学教学课件中的应用

人体解剖学是重要的医学基础课程，神经解剖学是人体解剖学的重要组成部分，教学内容多，学时少，学生普遍反映难学、难记、难理解，如何提高神经解剖学教学质量是每一位神经解剖学教学工作者都要面对的重要课题。现将如何利用幻灯片自定义动画帮助学生学习神经解剖学知识介绍如下。

自主学习模式在局部解剖学教学中的应用

为促进学生自学能力的培养,在局部解剖学教学过程中,我们通过建立网络辅助教学平台,构建考试综合评价体系,开放实验室,学生写作小论文及课堂讨论等方式在本科临床医学专业进行自主学习教学模式的探讨。实践证明此模式有利于学生主动获取知识、自学能力和创新能力的培养。

pTAT-XIAP重组表达载体的构建与酶切鉴定

目的探索pTAT-XIAP融合表达载体的构建方法。方法在体外合成大鼠XIAP基因,将其插入pTAT-HA质粒,构建pTAT-HA/XIAP融合表达载体,将pTAT-HA/XIAP质粒转化至DH5α感受态细胞,筛选培养转化成功的单克隆,NcoI/XhoI双酶切后琼脂糖电泳鉴定。结果转化pTAT-HA/XIAP质粒的DH5α在含氨苄青霉素的LB固体培养基上呈分散菌落生长。电泳结果显示重组pTAT-HA/XIAP质粒约4500bp,酶切后可观察到PTAT-HA质粒约3000bp,XIAP目的基因条带1494bp,pTAT空质粒约3000bp,条带大小与质粒图谱一致。结论将大鼠XIAP基因成功插入pTAT-HA质粒,构建pTAT-XIAP融合蛋白表达载体,提取的质粒可用于下游分子生物学实验。

pTAT-XIAP融合蛋白表达载体的构建及其在大肠杆菌中的表达

目的构建pTAT-XIAP原核表达载体,以获得pTAT-XIAP融合蛋白;为其用于神经系统疾病的治疗奠定基础。方法体外合成大鼠XIAP基因,将其插入pTAT-HA质粒,构建pTAT-XIAP融合蛋白表达载体,转入大肠杆菌表达菌株BL21plysS进行诱导表达。SDS-PAGE及Western blot法鉴定融合蛋白。结果表达产物经SDS-PAGE及Western blot分析后,于64 kD处有一明显表达条带,与理论结果相符。结论成功构建了pTAT-XIAP原核表达载体并成功表达出目的融合蛋白,该载体成功表达pTAT-XIAP融合蛋白,有望用于临床神经系统疾病的治疗。

pTAT-HA质粒载体在受体菌DH5α中的转化及鉴定

目的探索pTAT-HA质粒在受体菌DH5α中转化的方法。方法配制LB培养基,将pTAT-HA质粒转化至DH5α,培养筛选成功转化子,电泳鉴定。结果pTAT-HA质粒转化菌可在Amp+LB培养基中生长,电泳结果显示质粒大小准确无误(约3000bp)。结论pTAT-HA质粒转化成功,转化菌可冷冻保存质粒,提取的质粒可用于下游分子生物学实验。

三七总皂苷对脑出血大鼠脑内XIAP蛋白表达的影响

目的探讨三七总皂苷对脑出血大鼠脑内XIAP蛋白表达的影响。方法建立大鼠脑出血模型,腹腔注射三七总皂苷,免疫组织化学法检测XIAP蛋白表达,比较神经行为学评分。结果治疗组在4,7,14d时的神经行为学评分分别为0.85±0.44,0.56±0.22,0.36±0.55,明显低于对照组(P<0.05);治疗组在1,4,7,14 d时的XIAP阳性细胞数分别为48.87±4.90,37.02±3.35,35.40±2.98,34.79±2.86,明显高于对照组(P<0.05),XIAP阳性细胞数随三七总皂苷剂量增大而增多(P<0.05)。结论三七总皂苷可通过上调XIAP表达而促进大鼠脑出血后神经功能恢复。

糖尿病大鼠视网膜脂肪酸合成酶表达水平的研究

目的建立糖尿病SD大鼠模型,探讨脂肪酸合成酶(fatty acid synthase,FAS)在糖尿病大鼠视网膜中的表达情况,为脂肪酸合成酶在糖尿病发病机制中的作用提供基因表达和免疫组织化学证据。方法四氧嘧啶制备SD大鼠糖尿病模型,运用RT-PCR和免疫组化法分析FAS在糖尿病组和对照组SD大鼠视网膜中的表达情况。结果糖尿病组大鼠视网膜FAS的mRNA和蛋白质表达水平比对照组明显增高。结论FAS在糖尿病视网膜病变形成过程中可能有重要作用。

“以器官系统为中心，基础与临床全线整合”教学模式解剖学知识点整合的实践与思考

回顾高等医学教育课程模式,20世纪50年代“以器官系统为中心”的课程模式问世;90年代,美国医学院校协会在全国推行“医学院校培养目标研究项目”,许多院校实行了以器官系统为中心的课程、以问题为导向的课程、以社区为基础的课程等整合课程,成为第2次医学教育改革,对世界医学教育产生了深远的影响[1-2]。我国权威的医学教育专家认为[3],根据我国国情,以“器官系统”为中心的医学整合课程教学模式更符合当前和未来各高等医科院校对临床医学人才培养的方式。2008年9月,教育部、卫生部发布的《本科医学教育标准—临床医学专业(试行)》.

数字化解剖实验平台在医学整合课程中的应用

为深化院校医学教育改革,重庆医科大学对临床医学专业五年制本科学生全面实施以器官系统为中心的临床医学整合课程教学模式。随着各年级学生不同器官系统整合课程的同时开展,实验室和授课教师出现周期性、暂时性紧缺现象,实验室存在尸体堆积、福尔马林超标等问题,学生反映学习困难等情况。文章就将数字化解剖操作实验教学平台配合重庆医科大学教学模式改革的实施,从平台构建和特点、应用体会和思考等两方面进行探讨,探索解剖教学新模式,以期进一步满足21世纪医学教育对复合性人才、高素质人才培养的要求。

基于三维立体结构的断面与影像解剖学教学实践

由于大量的影像图片融入现今的断面与影像解剖学的教学内容中,对学生和教师都提出了更高的要求。学生在学习过程中由于学习方法不科学、基础不扎实等原因,导致学习效率低下,效果较差。从2015年始,通过重新规划教学思路、重构教学过程、创新教学活动设计以及改革考核评价体系等手段,在该课程的教学改革中积累了一些经验。希望通过分享这些经验,为国内其他医学院校断面与影像解剖学的建设提供参考依据。