海洋来源低温果胶酶产生菌筛选、鉴定与酶学性质研究

目的:从海洋底泥样品中筛选能低温降解果胶的新颖菌株,发掘具有潜在产业化价值的果胶酶。方法:以果胶为唯一碳源,利用透明圈法和3,5-二硝基水杨酸法(DNS法)从大连渤海湾海泥中筛出一株高产果胶酶菌株。对其进行形态学、生理生化特征分析以及16S rDNA序列测定,BLAST同源基因比对后构建系统发育树,并进一步研究其酶学特性。结果:筛选高产果胶酶菌株命名为LY-1,通过16S rDNA序列分析并结合生理生化鉴定确定该菌株为橄榄灰链霉菌(Streptomyces olivogriseus)。菌株LY-1在25℃、180 r/min的条件下培养至24 h时,果胶酶的酶活力为30.56 U/mL。最适酶pH为8.0,最适酶温度为20℃。此外,该酶在60℃孵育2 h仍保持70%以上的酶活性,在pH7.0~9.0范围内稳定性良好,酶活性稳定维持在90%以上。金属离子Cu^(2+)、Ba^(2+)、Mg^(2+)、Ca^(2+)、K+、Co^(2+)促进该酶活性,Mn^(2+)、Zn^(2+)、Hg^(2+)、Na^(+)则抑制该酶活性。结论:菌株LY-1所产的果胶酶具有应用于产业化商用果胶酶的潜力。

产褐藻胶裂解酶菌株筛选、鉴定与酶学性质研究

目的:筛选能够降解褐藻胶的新菌株,对发掘具有潜在产业化价值的褐藻胶裂解酶具有重要意义。方法:以褐藻胶为唯一碳源,从辽宁省大连市渤海湾沉积物中分离出高产褐藻胶裂解酶菌株。通过形态学、生理生化特征和16S rDNA基因序列分析,确定了它们的分类地位,并对其酶学性质进行了研究。结果:通过筛选,得到一株高产褐藻胶裂解酶的菌株并命名为LG-3。结合其形态学特征、生理生化指标检测以及16S rDNA系统发育树分析,初步确定该菌株属于坚强芽孢杆菌(Bacillus sp.LG-3)。LG-3菌株摇瓶发酵24 h后产褐藻胶裂解酶的酶活力为32.11 U/mL。最适的反应温度为30℃,最适pH值为8.0。金属离子Mn^(2+)、Na^(+)、Fe^(3+)促进酶活性,Zn^(2+)、Ag^(+)、Cu^(2+)、Mg^(2+)、Fe^(2+)对酶活有较强的抑制作用。化学试剂β-Mercaptoethanol、urea、EDTA、Triton-100、Tween-80、2,3-Butanedione对酶活均无显著影响,二硫苏糖醇(Dithiothreitol,DTT)、SDS对酶具有较强的抑制作用。结论:该实验筛选的产褐藻胶裂解酶的菌株适合工业化生产,对食品、医疗等产业具有极高的应用价值。