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肝窦内皮细胞中毛状样蛋白1缺失减缓小鼠非酒精性脂肪性肝病发生发展
1
作者
刘煜慧
王玮
姜颖
《军事医学》
CAS
CSCD
2023年第11期850-857,共8页
目的探讨在肝窦内皮细胞中缺失毛状样蛋白1(COTL1)对非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)的作用及可能的分子机制。方法构建内皮细胞特异性敲除COTL1小鼠,并通过蛋氨酸胆碱缺乏(MCD)饮食诱导NAFLD小鼠模型。通过Western印迹法在蛋白水平检测小鼠...
目的探讨在肝窦内皮细胞中缺失毛状样蛋白1(COTL1)对非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)的作用及可能的分子机制。方法构建内皮细胞特异性敲除COTL1小鼠,并通过蛋氨酸胆碱缺乏(MCD)饮食诱导NAFLD小鼠模型。通过Western印迹法在蛋白水平检测小鼠肝窦内皮细胞中COTL1敲低效果;分析MCD饮食诱导5周时小鼠体重和肝重;检测小鼠血清中丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)含量;病理切片观察小鼠肝脏形态变化和脂质积累;免疫组化检测炎性细胞浸润及肝脏纤维化的情况。结果在野生型小鼠中MCD饮食5周诱导后,COTL1表达量上调(P<0.0001),且COTL1表达于肝窦内皮细胞。肝窦内皮细胞特异性敲除COTL1小鼠MCD饮食5周后,与对照组相比,小鼠体重(P<0.05)、肝重(P<0.01)均显著增加;ALT(P<0.0001)、AST(P<0.01)含量显著降低,提示肝脏受损程度降低;肝脏脂肪蓄积减少(P<0.0001);炎性细胞标志物含有EGF样模块的黏蛋白样激素受体样1(F4/80)(P<0.0001)、小鼠淋巴细胞抗原6G蛋白(Ly6G)(P<0.0001)表达均显著降低,肝脏炎性浸润减少;肝脏纤维化标志物α⁃平滑肌肌动蛋白表达(α⁃SMA)(P<0.01)、胶原纤维沉积(P<0.001)显著降低,提示纤维化程度降低。结论肝窦内皮细胞中COTL1缺失可通过减少肝脏脂质积累、炎性细胞浸润及纤维化程度减缓NAFLD的进程。
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关键词
小鼠
肝窦内皮细胞
毛状样蛋白1
非酒精性脂肪性肝病
原文传递
巨噬细胞中毛状样蛋白1敲低减轻脂多糖诱导的炎症反应
被引量:
1
2
作者
王玮
刘煜慧
姜颖
《军事医学》
CAS
2022年第7期511-517,共7页
目的初步探讨巨噬细胞中毛状样蛋白1(COTL1)敲低对炎症反应的影响及可能的分子机制。方法构建特异性敲低COTL1慢病毒载体,转染RAW264.7细胞,同时加脂多糖(LPS)刺激诱导炎症反应细胞模型。通过Western印迹和实时荧光定量PCR(qRT-PCR)分...
目的初步探讨巨噬细胞中毛状样蛋白1(COTL1)敲低对炎症反应的影响及可能的分子机制。方法构建特异性敲低COTL1慢病毒载体,转染RAW264.7细胞,同时加脂多糖(LPS)刺激诱导炎症反应细胞模型。通过Western印迹和实时荧光定量PCR(qRT-PCR)分别在蛋白和mRNA水平检测RAW264.7细胞中COTL1敲低效果;Western印迹检测LPS刺激RAW264.7细胞中细胞外信号调节激酶(ERK)、c-Jun氨基端激酶(JNK)和核因子κB抑制因子激酶(IKK)的磷酸化水平;Western印迹检测LPS刺激COTL1敲低的RAW264.7细胞中ERK、JNK和IKK磷酸化水平的变化;一氧化氮(NO)检测试剂盒检测LPS诱导的一氧化氮的分泌;酶联免疫吸附法(ELISA)检测LPS刺激COTL1敲低的RAW264.7细胞培养上清中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)和IL-6的分泌。结果RAW264.7细胞中敲低COTL1可在一定程度上抵抗LPS等外界刺激导致的JNK、NF-κB炎症信号通路的激活,减少下游炎症细胞因子和活性氮的表达,继而减轻整体的炎症反应。结论巨噬细胞中COTL1敲低通过减少JNK、NF-κB通路的激活和下游炎症细胞因子的分泌、NO的生成继而减轻炎症反应。
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关键词
巨噬细胞
毛状样蛋白1
炎症
敲低表达
脂多糖
原文传递
题名
肝窦内皮细胞中毛状样蛋白1缺失减缓小鼠非酒精性脂肪性肝病发生发展
1
作者
刘煜慧
王玮
姜颖
机构
军事科学院军事医学研究院生命组学研究所
出处
《军事医学》
CAS
CSCD
2023年第11期850-857,共8页
基金
国家自然科学基金面上资助项目(81570526)。
文摘
目的探讨在肝窦内皮细胞中缺失毛状样蛋白1(COTL1)对非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)的作用及可能的分子机制。方法构建内皮细胞特异性敲除COTL1小鼠,并通过蛋氨酸胆碱缺乏(MCD)饮食诱导NAFLD小鼠模型。通过Western印迹法在蛋白水平检测小鼠肝窦内皮细胞中COTL1敲低效果;分析MCD饮食诱导5周时小鼠体重和肝重;检测小鼠血清中丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)含量;病理切片观察小鼠肝脏形态变化和脂质积累;免疫组化检测炎性细胞浸润及肝脏纤维化的情况。结果在野生型小鼠中MCD饮食5周诱导后,COTL1表达量上调(P<0.0001),且COTL1表达于肝窦内皮细胞。肝窦内皮细胞特异性敲除COTL1小鼠MCD饮食5周后,与对照组相比,小鼠体重(P<0.05)、肝重(P<0.01)均显著增加;ALT(P<0.0001)、AST(P<0.01)含量显著降低,提示肝脏受损程度降低;肝脏脂肪蓄积减少(P<0.0001);炎性细胞标志物含有EGF样模块的黏蛋白样激素受体样1(F4/80)(P<0.0001)、小鼠淋巴细胞抗原6G蛋白(Ly6G)(P<0.0001)表达均显著降低,肝脏炎性浸润减少;肝脏纤维化标志物α⁃平滑肌肌动蛋白表达(α⁃SMA)(P<0.01)、胶原纤维沉积(P<0.001)显著降低,提示纤维化程度降低。结论肝窦内皮细胞中COTL1缺失可通过减少肝脏脂质积累、炎性细胞浸润及纤维化程度减缓NAFLD的进程。
关键词
小鼠
肝窦内皮细胞
毛状样蛋白1
非酒精性脂肪性肝病
Keywords
mice
liver sinusoidal endothelial cells
coactosin⁃like protein 1
nonalcoholic fatty liver disease
分类号
R575.5 [医药卫生—消化系统]
原文传递
题名
巨噬细胞中毛状样蛋白1敲低减轻脂多糖诱导的炎症反应
被引量:
1
2
作者
王玮
刘煜慧
姜颖
机构
军事科学院军事医学研究院生命组学研究所
出处
《军事医学》
CAS
2022年第7期511-517,共7页
基金
国家自然科学基金资助项目(81570526)。
文摘
目的初步探讨巨噬细胞中毛状样蛋白1(COTL1)敲低对炎症反应的影响及可能的分子机制。方法构建特异性敲低COTL1慢病毒载体,转染RAW264.7细胞,同时加脂多糖(LPS)刺激诱导炎症反应细胞模型。通过Western印迹和实时荧光定量PCR(qRT-PCR)分别在蛋白和mRNA水平检测RAW264.7细胞中COTL1敲低效果;Western印迹检测LPS刺激RAW264.7细胞中细胞外信号调节激酶(ERK)、c-Jun氨基端激酶(JNK)和核因子κB抑制因子激酶(IKK)的磷酸化水平;Western印迹检测LPS刺激COTL1敲低的RAW264.7细胞中ERK、JNK和IKK磷酸化水平的变化;一氧化氮(NO)检测试剂盒检测LPS诱导的一氧化氮的分泌;酶联免疫吸附法(ELISA)检测LPS刺激COTL1敲低的RAW264.7细胞培养上清中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)和IL-6的分泌。结果RAW264.7细胞中敲低COTL1可在一定程度上抵抗LPS等外界刺激导致的JNK、NF-κB炎症信号通路的激活,减少下游炎症细胞因子和活性氮的表达,继而减轻整体的炎症反应。结论巨噬细胞中COTL1敲低通过减少JNK、NF-κB通路的激活和下游炎症细胞因子的分泌、NO的生成继而减轻炎症反应。
关键词
巨噬细胞
毛状样蛋白1
炎症
敲低表达
脂多糖
Keywords
macrophages
coactosin-like protein 1
inflammation
knockdown expression
lipopolysaccharide
分类号
Q538 [生物学—生物化学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
肝窦内皮细胞中毛状样蛋白1缺失减缓小鼠非酒精性脂肪性肝病发生发展
刘煜慧
王玮
姜颖
《军事医学》
CAS
CSCD
2023
0
原文传递
2
巨噬细胞中毛状样蛋白1敲低减轻脂多糖诱导的炎症反应
王玮
刘煜慧
姜颖
《军事医学》
CAS
2022
1
原文传递
已选择
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