重组BMP_(4/7)融合基因腺相关病毒的构建及其对兔骨髓基质干细胞生物学行为的影响

[目的]应用重组骨形成蛋白4/7融合基因腺相关病毒载体(AAV BMP4/7)转染兔骨髓基质干细胞(BMSCs),观察其对BMSCs生物学行为的影响。[方法](1)采用RT-PCR一步法和基因重组法,从胎盘组织中克隆BMP4和BMP7成熟肽cDNA,获取BMP4/7融合基因,克隆到质粒pGEM质粒中;(2)从pGEM-BMP4/7质粒中切取BMP4/7融合基因克隆到穿梭质粒,在大肠杆菌内重组,在293细胞中构建AAV-BMP4/7重组腺相关病毒载体;(3)不同MOI值的AAV-BMP4/7转染兔BMSCs,观察细胞形态学变化,MTT法描记细胞生物曲线,观察对细胞增殖的影响,以AAV-EDFP做对照;(4)AAV-BMP4/7转染兔BMSCs细胞7、14d后,行ALP及OC含量测定,观察成骨活性,以AAV-EDFP做对照。[结果](1)成功构建高滴度的携带BMP4/7融合基因的重组腺相关病毒AAV-BMP4/7;(2)AAV-BMP4/7转染BMSCs细胞后,细胞增殖活性良好,转染效率为72%,细胞形态呈典型的成骨改变,1×105vg/cell的MOI值对细胞形态影响较小,而转染效率强于5×104vg/cell(59.38%)。(3)AAV-BMP4/7转染细胞后,ALP、OC含量均明显增高,并与转染后诱导培养的时间呈正相关,与对照组比较差异统计学意义(tALP=896.88P<0.001tOC=543.24P<0.01)。[结论]AAV-BMP4/7融合基因转染效率高,对BMSCs细胞有明显的诱导成骨活性,对骨愈合的基因治疗提供了新的思路和途径。

椎体后凸成形术与保守疗法治疗骨质疏松性脊柱骨折的疗效对比

目的对比椎体后凸成形术与保守疗法对骨质疏松性脊柱骨折的临床疗效。方法选取骨质疏松性脊柱骨折患者45例,按照患者治疗方法的不同分为观察组23例(采用椎体后凸成形术治疗)和对照组22例(采用保守疗法治疗)。随访1年,对比2组总有效率、伤椎前后中柱椎体高度及Cobb角变化情况。结果观察组治疗总有效率为95.7%,对照组为68.2%,差异有统计学意义(P<0.05)。此外,观察组患者的椎体高度及后凸Cobb角变化情况均显著优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论与保守疗法相比,采用椎体后凸成形术治疗骨质疏松性脊柱骨折临床疗效更显著,具有较高临床应用价值。

联用经后路椎弓根螺钉内固定术和伤椎内植骨术治疗脊柱胸腰段骨折的效果分析

目的 :探讨联合使用经后路椎弓根螺钉内固定术和伤椎内植骨术治疗脊柱胸腰段骨折的临床效果。方法 :对2012年7月~2014年7月期间我院收治的80例脊柱胸腰段骨折患者的临床资料进行回顾性研究。我们将这80例患者随机分为观察组和对照组,每组各有40例患者。我院联合使用经后路椎弓根螺钉内固定术和伤椎内植骨术对观察组患者进行治疗,联合使用经后路椎弓根螺钉内固定术和后外侧植骨融合术对对照组患者进行治疗。治疗结束后,比较两组患者治疗前后胸腰椎前缘的高度比、胸腰椎后缘的高度比、脊椎的Cobb角(头侧端脊椎上缘的垂线与尾侧端脊椎下缘垂线的交角)和疼痛症状的评分。结果 :在治疗后,观察组患者胸腰椎前缘的高度比和胸腰椎后缘的高度比均明显高于对照组患者,其脊椎的Cobb角明显小于对照组患者,二者相比差异具有显著性(P<0.05)。在治疗后,观察组患者疼痛症状的评分明显低于对照组患者,二者相比差异具有显著性(P<0.05)。结论 :联合使用经后路椎弓根螺钉内固定术和伤椎内植骨术治疗脊柱胸腰段骨折的效果确切,可有效地促进患者脊椎功能和形态的恢复,缓解其疼痛的症状。此联合手术方法可作为临床上治疗脊柱胸腰段骨折的优选方法。

曲度邦腰椎牵引仪配合活血中药外敷治疗腰椎间盘突出症的疗效研究

目的研究曲度邦腰椎牵引仪配合活血中药外敷治疗腰椎间盘突出症的疗效。方法将随机选取2012年5月—2014年6月期间该院接受保守治疗的120例腰椎间盘突出症患者随机分为两组,干预组接受曲度邦腰椎牵引仪配合活血中药外敷治疗、对照组仅接受曲度邦腰椎牵引仪治疗。治疗后,测定两组患者的腰椎疼痛程度、活动程度和功能情况。结果干预组患者的JOA评分(16.69±2.14),高于对照组的(11.47±1.57);ODI评分(16.87±2.06),低于对照组的(23.45±4.29);腰椎活动角度均高于对照组。结论曲度邦腰椎牵引仪配合活血中药外敷治疗能够缓解腰痛程度、增强腰椎功能和活动度,是腰椎间盘突出症相对更为理想的保守治疗方法。

鼻饲对高龄髋部骨折患者的临床意义

目的探讨鼻饲对高龄髋部骨折患者的临床意义。方法 70例75岁以上(进食差)实施髋部骨折手术的患者,38例进行鼻饲,32例未进行鼻饲(患者及家属拒绝鼻饲治疗)。对两种情况患者住院时间、体重变化及既有系统疾病加重进行比较。结果进行鼻饲疗法的患者较未进行鼻饲的患者在各个方面有明显的改善,差异有统计学意义。结论对高龄髋部骨折患者行鼻饲疗法可极大改善患者营养状态,缩短住院时间、减少卧床并发症、提高治愈率。

大鼠肢体移植急性排斥反应动物模型的比较研究

目的探讨建立更简便有效的大鼠肢体移植急性排斥反应动物模型。方法以Wistar大鼠为供体，SD大鼠为受体，将Wistar大鼠的后侧（左侧或右侧）肢体移植给sD大鼠。实验分成两组，传统术式组：离断SD大鼠原有后侧肢体，将Wistar大鼠同侧肢体通过固定骨骼、吻合血管神经、缝合肌肉皮肤的方法移植给SD大鼠；改进术式组：保留SD大鼠原有后侧肢体，将供体Wistar大鼠的后侧肢体按照左肢配右肢或右肢配左肢的原则，通过缝合皮肤和肌肉的方法固定于SD大鼠后侧肢体的内侧，只吻合股动、静脉，不吻合神经、血管，不固定骨骼。记录两种模型的手术时间、手术前后的体重改变．术后显微外科常规护理，记录移植后宿主饮食量、体重变化、观察移植物变化、手术成功率。结果两种肢体移植模型各50例，74例成活，移植物排斥反应再现稳定，生存时间均为（14±2）d。传统组和改进组的手术时间分别为（125±40）min、（70±21）min，手术前后平均体重减少量分别为（3．78±1．09）g、（2．05±0．90）g。术后3d左右，改进组大鼠体重开始增加，传统组1周内体重均持续减少。手术成功率传统组为38％，改进组为90％。在以上4个方面，改进组明显优于传统组（P〈0．05）。结论改良术式具有操作简单，成功率高，手术时间短，对大鼠创伤小，大鼠恢复快，值得借鉴和推广。

负压封闭吸引结合抗生素灌注治疗软组织感染疗效观察

目的:观察负压封闭吸引(VSD)结合敏感抗生素灌注治疗软组织感染及缺损的疗效。方法:选择软组织感染、缺损创面42例,随机分为对照组及观察组各21例。彻底清创后,对照组采用VSD治疗,观察组采用VSD结合敏感抗生素灌注治疗。比较两组二期缝合植皮时间、创面缩小面积、VSD更换次数、静脉滴注抗生素时间、住院时间的差异。结果:观察组二期缝合植皮时间、创面缩小面积、VSD更换次数、静脉滴注抗生素时间、住院时间等均显著或非常显著优于对照组(P<0.05,P<0.01)。结论:与单纯应用VSD比较,VSD结合敏感抗生素灌注治疗软组织感染缺损,能更有效地控制感染、刺激肉芽组织生长,为软组织修复提供良好的条件。