心肌细胞肥大过程中心脏发育相关转录因子及下游心脏肥大标志基因的时序性表达规律研究

目的观察在心肌细胞肥大过程中心脏发育相关转录因子及下游心脏肥大标志基因时序性表达规律,为心肌肥大机制研究提供线索。方法用异丙肾上腺素(ISO)干预心肌细胞,用CCK-8、细胞计数仪、免疫组化分别检测细胞存活率、细胞直径及表面积,用RT-PCR、Western blotting分别检测相关基因mRNA及蛋白表达水平。结果用ISO成功构建心肌细胞肥大模型。ISO干预后,GATA结合蛋白4(GATA4)、肌细胞增强因子2C(MEF2C)、GATA5、脑钠肽(BNP)、心房利钠因子(ANP)于24h开始升高,P300、α-肌球蛋白重链(α-MHC)、T-框蛋白5(TBX5)于12h开始升高,血清应答因子(SRF)、β-MHC mRNA于6h开始升高(P<0.05);其中GATA4、α-MHC、β-MHC、SRF、P300 mRNA表达呈先升后降的趋势,至干预72h GATA4、SRF、α-MHC、β-MHC、P300 mRNA表达仍高于正常(P<0.05),而MEF2C降至正常(P>0.05);GATA5、TBX5、ANP、BNP mRNA表达与对照组相比持续升高(P<0.05),而NKX2.5 mRNA(P>0.05)无明显变化。ISO干预48h后,GATA4蛋白表达水平升高,HEY2蛋白表达水平降低(P<0.05)。结论在心肌细胞肥大过程中,MEF2C的时序表达规律与心脏发育过程相似,而GATA4、GATA5、SRF、TBX5的时序性表达规律与心脏发育过程不完全一致,提示其在心肌细胞肥大由代偿转为失代偿过程中的重要作用。同时GATA4、MEF2C、SRF与乙酰化酶P300的时序性表达规律相似,提示在心肌细胞肥大过程中其时序性表达可能受P300调控。

ox-LDL抑制大鼠骨髓间充质干细胞的体外增殖和Oct-4表达

目的以大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)为研究对象,在体外培养过程中观察氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)对MSCs增殖、干细胞表面标志Oct-4表达的影响。方法将体外培养的MSCs分为4组:对照组,不加任何干预因素;Ox-LDL组,在培养基中分别加入不同浓度(1、5、10、20μg/mL)的ox-LDL;Ox-LDL+NAC组,采用抗氧化剂乙酰半胱氨酸(NAC)预处理后再加入ox-LDL;阴性对照组,在培养基中加入对应浓度的天然低密度脂蛋白(nLDL)。在不同培养时间点收集细胞计数并绘制生长曲线;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测干细胞特异表面标记Oct-4表达水平;电子顺磁共振技术检测氧化活性产物(ROS)产量。结果 ox-LDL抑制MSCs的增殖,浓度越大细胞增殖抑制越明显,当浓度大于5μg/mL时细胞出现凋亡,抗凋亡蛋白Bcl-2表达水平减弱;ox-LDL干预后Oct-4的表达水平显著减弱,且与干预浓度呈正相关;ox-LDL干预后ROS的产量明显升高,而nLDL对ROS生成没有影响。结论 ox-LDL抑制MSCs的体外增殖和Oct-4表达,可能与ROS增加有关。

孕期酒精暴露与CITED2基因CpG岛甲基化关系的研究

目的:研究孕期酒精暴露对小鼠胚胎及幼鼠心脏CBP/P300反式作用因子2(CBP/P300-interacting transactivator with EDrich 2,CITED2)基因表达的影响,探讨孕期酒精暴露与CITED2基因启动子区Cp G岛甲基化水平的关系。方法:以10μl/(g·d),56%的饮用白酒给20只孕鼠[胚胎小鼠发育期(E0.5-E20.5)]连续灌胃作为干预组,生理盐水灌胃20只孕鼠作为对照组。取E14.5、E17.5、新生鼠心脏及生后7 d小鼠心脏组织作为标本,q RT-PCR检测心脏发育相关基因CITED2、GATA4结合蛋白4(GATA binding protein 4,GATA4)m RNA表达量的变化,MSP及BSP检测CITED2基因启动子区Cp G岛甲基化变化情况。结果:孕期酒精暴露致小鼠心脏发育相关基因GATA4在E14.5及E17.5[(1.538±0.071)、(1.734±0.101)]较对照组[(0.819±0.176)、(1.115±0.118)]表达水平升高,分别为其对照组1.88、1.56倍(P<0.05)。CITED2的表达在E14.5、E17.5及新生小鼠(0.896±0.069,1.336±0.121,0.988±0.108)较对照组(1.246±0.158,1.833±0.086,1.355±0.126)表达水平降低,分别为其对照组0.72、0.73、0.74倍(P<0.05),酒精暴露组生后7 d CITED2 m RNA表达量(1.276±0.097)较正常组(1.024±0.078)降低,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论:孕期酒精暴露对CITED2基因m RNA表达水平起到了负调节作用,说明孕期酒精暴露通过了某种途径对CITED2基因表达起到了抑制作用。孕期酒精暴露可能并不是通过改变CITED2基因启动子区Cp G岛甲基化水平来影响CITED2基因的表达,从而影响心脏发育。

枯草芽胞杆菌TR21喷叶对粉蕉根系分泌酚酸的影响

为探索枯草芽胞杆菌TR21喷叶对广粉1号和粉杂1号粉蕉根系酚酸分泌的影响,测定了不同处理不同时间根系分泌物中的酚酸含量,并利用高效液相色谱测定第13天的根系分泌物中的酚酸组成,以及甲醇溶解物对香蕉枯萎病病原菌1号和4号生理小种孢子萌发的影响。结果显示,广粉1号TR21处理后4d和6d根系酚酸分泌量高于对照,处理后8、9、11、13d低于对照;TR21处理粉杂1号根系酚酸分泌量始终高于对照。广粉1号对照根系处理后13d分泌物中检测到阿魏酸、反式肉桂酸、芥子酸、对香豆酸、水杨酸和邻苯二甲酸,TR21处理仅检测到阿魏酸和反式肉桂酸;粉杂1号对照和TR21处理后13d的根系分泌物只检测到阿魏酸。不同处理的甲醇溶解酚酸显著抑制香蕉枯萎病1号生理小种小型分生孢子萌发,粉杂1号的抑制效果比广粉1号明显,TR21处理的粉杂1号抑制效果最显著。甲醇溶解酚酸对4号生理小种的分生孢子也有显著抑制作用,但不同处理间差异不显著。TR21喷叶可以改变粉蕉根系酚酸的分泌,但在抗感品种中引起的变化存在差异。

浅谈光缆线路的维护与故障处理

简要介绍了光缆维护的基础知识，重点讨论了光缆线路发生故障的原因和光缆线路故障处理的方法。

慢性肾衰竭患者自主性感知现状及其相关影响因素分析

目的 探究慢性肾衰竭(CRF)患者自主性感知的影响因素。方法 选取我院2021年6月至2022年8月收治的80例CRF患者,采用中文简版自主性感知量表(PEAS-SCV)评估患者的自主性感知现状。比较不同特征患者的PEAS-SCV评分,分析CRF患者的自主性感知的影响因素。结果 80例CRF患者PEAS-SCV评分为(56±6)分,处于中等水平。不同受教育程度、焦虑抑郁、内在力量、自我效能感的CRF患者PEAS-SCV评分比较,差异有统计学意义(P<0.05)。经多重线性回归分析显示,内在力量低下、有焦虑抑郁、高中及以下、自我效能感低下是CRF患者自主性感知较低的危险因素(P<0.05)。结论 CRF患者自主性感知水平处于中等水平,这与受教育程度低下、有焦虑抑郁情绪、内在力量低下、自我效能感低下等因素有关。

ox-LDL抑制大鼠MSCs向内皮分化

目的观察氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)对大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)内皮分化的影响及其机制。方法将可内皮分化的MSCs分为对照组(不加任何干预因素),ox-LDL组(加入5μg/m L的ox-LDL),ox-LDL+乙酰半胱氨酸组(n-acetylcycteine,NAC)预处理后再加等浓度ox-LDL),n LDL对照组(加入5μg/m L的天然低密度脂蛋白(native LDL,n LDL)。光镜下观察细胞形态,免疫组化、Western blot及RT-PCR技术检测特异性内皮表面标记,流式细胞技术检测分化效率,电子顺磁振荡技术检测氧化活性产物(reactive oxygen species,ROS),Western blot技术测定细胞信号通道蛋白Akt。结果 1)MSCs能够分化为内皮细胞,表现为内皮表面标志v WF、Flk-1和CD31的出现和血管样结构的形成;2)ox-LD明显减弱MSCs向内皮分化(P<0.05),而NAC预处理后MSCs内皮分化能力恢复;3)ox-LDL干预后ROS明显升高(P<0.05),而NAC预处理后ROS产量明显降低(P<0.05);4)ox-LDL干预后磷酸化Akt表达明显降低(P<0.01),而NAC预处理后有所恢复,但仍低于正常培养组。结论 ox-LDL抑制大鼠MSCs向内皮分化,NAC可部分或完全反转ox-LDL的抑制效应,Akt发挥一定作用。

慢性肺心病患者血浆抵抗素水平变化及其意义

目的探讨抵抗素(resistin)血浆水平变化与慢性肺心病之间的关系及其意义。方法选择慢性肺心病病人(CPHD组)22例,慢性阻塞性肺疾患组(COPD组)22例和32例健康人作为正常对照,放射免疫分析检测血浆resistin含量(ng.L-1)。结果 COPD组病人的抵抗素浓度较正常对照组降低(P<0.01),右下肺动脉横径、右室流出道内径较正常对照组显著增大(P<0.01),右室前壁厚度与抵抗素浓度存在正相关(r=0.541,P<0.01);CPHD组的病人抵抗素浓度较正常对照组和COPD组均显著降低(P<0.01);CPHD组的病人右下肺动脉横径、右室流出道内径、右室前壁厚度较正常对照组和慢性阻塞性肺疾患组均显著升高(P<0.01),右室流出道内径与抵抗素浓度水平存在正相关(r=0.477,P<0.05)。结论血浆抵抗素水平可作为监测慢性肺心病发生的早期标志物,用于慢性肺心病的早期诊断和预防。

中国浙江黄斑钩瓣叶蜂种团一新记录种——尖唇钩瓣叶蜂

报道了发现于浙江省丽水市百山祖国家公园龙泉片区的膜翅目(Hymenoptera)叶蜂科(Tenthredinidae)钩瓣叶蜂属(Macrophya Dahlbom,1835)黄斑钩瓣叶蜂种团(Macrophya flavomaculata group)浙江一新记录种——尖唇钩瓣叶蜂(Macrophya acuminiclypeus Zhang&Wei,2006)。提供了该新记录种的雌虫描述、采集记录、地理分布、鉴别特征。标本保存于华东药用植物园科研管理中心昆虫模式标本室。

HIF-1α基因启动子-1946位点基因多态性与紫绀型先天性心脏病低氧耐受的相关性

目的研究低氧诱导因子-1α(HIF-1α)基因多态性与紫绀型先天性心脏病(CCHD)低氧耐受能力是否具有相关性。方法用靶向捕获技术,对97例CCHD患儿和108例非紫绀型先天性心脏病(ACHD)患儿HIF-1α基因二代测序;生物信息学分析后找出差异分布的多态位点;用Sanger测序验证。针对HIF-1α启动子区多态位点,构建不同基因型HIF-1α启动子-荧光素酶报告基因载体;转染HEK293T和H9C2细胞;用双荧光素酶报告基因检测系统,分析HIF-1α不同基因型启动子活性。结果 CCHD组HIF-1α启动子区-1 946位点A碱基删除变异频率高于ACHD组(P<0.05)。与AA基因型比较,DD基因型HIF-1α启动子转录活性更高(P<0.05)。结论 HIF-1α基因-1 946位点与CCHD耐受低氧能力相关,DD基因型HIF-1α转录活性明显增高,可能是耐受低氧的分子遗传学机制之一。

一用次性输液器接注射针头外加套管的巧用

冲洗眼结膜囊是治疗结膜炎和眼内异物最基本的一项护理常规操作技术。我院门诊眼科治疗室平均每天接待眼结膜囊冲洗患者不少于40人次。自2005年5月份以来，改用瓶装500ml生理盐水为冲洗液，使用一次性输液器除去穿刺针，接上一次性7号针头外套4号注射针头套管，形成一套密闭式冲洗装置，替代了其他冲洗器。应用后效果满意。现介绍如下：

CBP/P300介导的组蛋白H3K9乙酰化修饰对GATA4表达的影响

目的明确GATA4在小鼠胚胎心脏发育过程中的时序表达,并阐明其组蛋白修饰调控机制。方法选取胎龄11.5 d(E11.5)至新生0.5 d胎鼠心脏,RT-PCR检测胎鼠心肌细胞中GATA4mRNA表达水平,CHIP-QPCR检测GATA4启动子区组蛋白H3K9ac水平及与CBP/P300的结合水平。用CBP30干预心肌祖细胞,RT-PCR检测心肌祖细胞在不同浓度CBP30(0.5、1、2、4μmol/L)干预不同时间点(6、12、24、36 h)后GATA4 mRNA表达水平,CHIP-QPCR检测心肌祖细胞中GATA4启动子区组蛋白H3K9ac水平及与CBP/P300的结合水平。结果 1小鼠胚胎心脏发育过程中GATA4表达量,E14.5明显高于E11.5(P<0.05);CHIP结果显示E14.5GATA4启动子区组蛋白H3K9ac水平高于E11.5(P<0.05);E14.5与CBP/P300的结合水平亦高于E11.5(P<0.05)。2CBP30干预心肌祖细胞后,GATA4表达量较对照组明显降低(P<0.05)。CHIP结果显示CBP30组GATA4启动子区组蛋白H3K9ac水平及与CBP/P300的结合水平较对照组显著降低(P<0.05)。结论 CBP/P300可通过介导组蛋白H3K9乙酰化修饰参与调控GATA4在小鼠胚胎心脏发育过程中的时序表达。

分段子宫血管结扎术治疗剖宫产出血5例

对5例剖宫产后大出血患者(2例前置胎盘、1例子宫收缩乏力、1例胎盘早剥、1例子宫胎盘卒中)施行分段子宫血管结扎,全部有效。此术对患者产后生理功能恢复无影响。认为此术可作为控制产后出血的手段之一。

氟康唑治疗真菌性角膜溃疡20例临床分析

目的探讨氟康唑注射液治疗真菌性角菌溃疡的疗效。方法用氟康唑注射液100mL静脉点滴及自配2%氟康唑眼药水滴眼治疗真菌性角膜溃疡20例。结果20例中17例真菌性角膜溃疡愈合,前房积脓消失,角膜溃疡面积缩小。结论氟康唑注射液治疗真菌性角膜溃疡疗效较好,不良反应少。

儿童特发性肺动脉高压ALK1基因突变分析

目的探讨活化素受体样激酶1(ALK1)基因、骨形成蛋白Ⅱ型受体(BMPR2)基因突变与儿童特发性肺动脉高压(IPAH)之间的关系。方法收集14例临床诊断为IPAH患儿及其部分家族成员的DNA样本,对ALK1、BMPR2基因启动子及外显子区域进行二代测序,测序结果与GenBank人ALK1、BMPR2基因序列进行分析比对,对存在突变的基因进行一代测序验证。另收集106例健康儿童作为对照组。结果 1例女性IPAH患儿ALK1基因外显子3发生错义突变(c.77 C>T:p.P 26 L);经数据库HMGD查对为一新突变位点。在1例女性患儿BMPR2基因外显子11发现错义突变(c.1447T>C:p.C483R),1例男性患儿母亲BMPR2基因外显子5 splicing区域发现错义突变(c.621+8T>C),1例女性患儿母亲BMPR2基因外显子10发现错义突变(c.1322G>A:p.G441E),以上突变在既往文献中均已有报道。结论在我国汉族IPAH患儿中首次发现ALK1基因外显子3错义突变,该新错义突变可能和IPAH形成有关。

AISI 430不锈钢表面Co-Ni合金脉冲电沉积的过程

改善固体氧化物燃料电池金属连接体用AISI 430不锈钢的抗氧化性能尤为重要。采用酸性镀液脉冲电镀的方法,在AISI 430不锈钢表面制备出微纳米结构的Co-Ni合金镀层,研究了脉冲电镀工艺及镀层的生长机制。用XRD对微纳米结构镀层的物相进行分析,用SEM观察了不同电镀工艺条件下镀层的形貌。结果表明:在Co-Ni合金共沉积形成过程中,Co2+,Ni2+在阴极发生异常共沉积,形成了Co/Ni异质形核;随着晶体的长大,部分晶体优先快速长大,形成较大的晶粒,大小晶粒混合布满整个表面,主要通过阶梯方式生长形成了Co-Ni合金。

表没食子儿茶素没食子酸酯参与老年小鼠心脏SERCA2a的调控及其机制

目的探讨表没食子儿茶素没食子酸酯[(-)-epigallo-catechin-3-gallate,EGCG]能否通过抑制组蛋白去乙酰化酶1(histone deacetylase 1,HDAC1)参与老年小鼠心脏SERCA2a的表达。方法24只16月龄雄性C57 BL/6老年小鼠随机数字表法分为EGCG+老年组[腹腔注射50 mg/(kg·d)的EGCG]、DMSO+老年组(腹腔注射与溶解EGCG同剂量的二甲基亚砜)以及未处理老年组,每组8只;3月龄雄性C57 BL/6成年小鼠作为青年组(n=8)。干预8周,收集心脏组织。RT-PCR检测Atp2a2及HDAC1的mRNA表达量,Western blot检测SERCA2a的表达量。Ch IP-Q-PCR检测Atp2a2启动子区组蛋白Ac H3K9水平及HDAC1、GATA4、Mef2c的结合量。结果 RT-PCR及Western blot结果表明,老年小鼠心脏SERCA2a在mRNA及蛋白水平的表达降低(P<0.05),HDAC1在mRNA水平表达升高(P<0.05)。Ch IP-Q-PCR结果表明,老年小鼠心脏Atp2a2启动子区HDAC1结合量升高,组蛋白Ac H3K9水平降低,GATA4、Mef2c的结合量降低(P<0.05)。EGCG干预8周后,老年小鼠心脏HDAC1的表达量及其在Atp2a2启动子区的结合量降低,组蛋白Ac H3K9水平升高,GATA4、Mef2c的结合量增加(P<0.05),EGCG在mRNA及蛋白水平升高了老年小鼠心脏SERCA2a的表达(P<0.05)。结论由HDAC1介导的组蛋白H3K9低乙酰化可能是老年小鼠心脏SERCA2a表达降低的关键机制之一,EGCG通过抑制这一过程升高老年小鼠心脏SERCA2a的表达。

Wnt/β-catenin通路激活促进慢性缺氧H9c2细胞中抗凋亡因子bcl-2及survivin表达

目的:探讨Wnt/β-catenin信号转导通路在H9c2心肌细胞慢性缺氧适应中的作用及可能机制。方法:将37℃、5%O_2、5%CO_2、90%N_2条件下培养的H9c2细胞作为实验组,低氧培养6、12、24、36、48、72 h时收集细胞;将37℃、21%O_2、5%CO_2条件下培养的细胞作为对照组。采用Western blot和real-time PCR技术检测β-catenin、抗凋亡因子bcl-2和survivin在不同培养时间点的表达变化。结果:5%O_2培养的H9c2细胞与对照组相比,β-catenin蛋白在缺氧6、12、24、36 h时表达明显增加(P=0.000,P=0.018,P=0.001,P=0.000),bcl-2及survivin表达较对照组明显增加(P=0.000,P=0.000)。结论:Wnt/β-catenin信号通路激活可能是H9c2心肌细胞慢性缺氧的适应机制之一,其部分可能通过上调抗凋亡因子bcl-2及survivin表达起作用。