育龄期人群对扩展性携带者筛查的了解、态度、支付意愿、实施偏好以及影响其接受筛查的关联因素:一项多中心横断面调查研究

背景出生缺陷是全球范围内影响人口健康水平的公共卫生问题,而扩展性携带者筛查(expanded carrier screening,ECS)是预防出生缺陷的有效措施。目的了解我国育龄期人群对扩展性携带者筛查的认知、态度及影响其决策的关联因素。方法本研究为多中心横断面调查研究。2022年8月—2023年9月,通过自制调查问卷对到访全国11家产前诊断机构的育龄期人群进行在线调查,了解调查对象对扩展性携带者筛查的态度、实施偏好、支付意愿,Logistic分析影响其决策的关联因素。结果11家机构共计回收24923份问卷,有效问卷24910份,有效率99.95%。被调查的对象中,54.42%为女性,45.58%为男性,年龄集中在26~35岁区段(19601人,78.69%)。多数(84.75%)调查对象正在备孕(21110人),自身或配偶有不明原因流产史的有6395人(25.67%)。38.99%(9714/24910)的调查对象对扩展性携带者筛查完全不了解,91.36%(22757/24910)的调查对象表示愿意接受扩展性携带者筛查。愿意接受ECS的原因中占比最高的是希望通过ECS了解生育患有遗传病后代的风险,占88.18%(20066/22757);拒绝接受ECS的原因中占比最高的是认为家族中没有遗传病史,无须筛查,占33.91%(730/2153)。60.22%(13704/24910)的调查对象表示希望获知夫妻双方全部的遗传病携带信息。89.64%(20400/24910)的调查对象更偏向高效率的同步筛查模式。80.15%的调查对象认为应在备孕期进行检测,60.37%的调查对象认为应在婚检时进行检测。超过60%的调查对象(15886人,63.77%)表示接受单人1000元以下付费。Logistic回归显示年轻人群,学历越高,夫妇月收入越高,有医疗保险,听说过ECS以及了解ECS的程度越高的育龄人群愿意接受ECS检测(OR>1,P<0.05)。结论育龄人群对扩展性携带者筛查了解有限,部分调查对象对ECS存在误解,但总体态度积极。年轻、高学历、高收入、有医保以及对ECS认知程度好的人群更愿意接受ECS。为了降低隐性遗传病的发生,促使扩展性携带者筛查良性开展,需要对育龄期夫妇进行扩展性携带者筛查和遗传知识科普宣传。

三磷酸腺苷生物荧光液闪测定法检测活细胞计数

为建立一种检测活细胞数的方法，作者采用三磷酸腺苷（ATP）生物荧光液闪测定法检测小鼠纤维瘤细胞株L929。ATP标准曲线工作范围为10－9～10－5mol／ml，相关系数r＝0．9963（P＜0．001）；当活细胞数在3×102～106个／ml时与发光计数值有良好的线性关系，r＝0．9922（P＜0．001），变异系数CV＝1％～3％。用ATP生物荧光液闪测定法检测活细胞数灵敏、简便、准确、重复性好，用液闪计数仪即可完成测定，有较大的实用价值。

ATP-生物荧光法在肿瘤体外药物敏感性试验中的应用研究

为探讨ATP生物荧光法在肿瘤体外药敏试验中应用的可行性，采用该法对小鼠纤维瘤细胞株L929、卵巢癌新鲜组织和腹水细胞进行抗癌药物处理后的细胞活性测定。结果显示：该法能测出不同浓度药物对细胞作用的剂量效应关系，以及不同个体对不同浓度药物反应的差异，实验变异系数CV值为1.2%～15.8%。在培养的第5天药物处理组与对照组差异最大，检测效果最好。用混和酶液消化，可有效地制备含＜30个细胞团块的单细胞悬液，活细胞可达90％以上。以上结果表明，ATP生物荧光法的稳定性、重复性、敏感性均较好，用于卵巢癌体外药敏试验是可行的。

血清CA19-9联合CA125检测在卵巢肿瘤中的应用价值

目的 :探讨单独检测血清CA19 9值及结合CA125检测值在卵巢肿瘤中的应用价值。方法 :采用ELISA法 ,检测206例卵巢包块(其中恶性肿瘤48例 ,良性包块158例)手术前血清CA19 9及CA125值 ,并对部分恶性肿瘤患者术后进行连续动态监测、随访。结果 :恶性肿瘤组血清CA19 9及CA125值均明显高于良性包块组。CA19 9检测对卵巢恶性肿瘤的敏感性、特异性分别为45.8 %、74.1% ,CA125检测的敏感性、特异性分别为83.3%、71.5% ;而联合CA19 9与CA125,对卵巢恶性肿瘤的敏感性可达91.6%。恶性肿瘤患者术后连续监测CA19 9及CA125值显示 ,两者升高则预后极差 ;两者维持在正常范围则预后好。结论 :CA19 9的检测可作为CA125的补充 ,提高诊断的敏感性 ;

卵巢癌药敏试验的微量法研究

目的 探讨微量检测 ATP在卵巢癌药敏试验中应用的可行性。方法 对 35例新鲜卵巢癌组织标本进行药敏试验 ,应用 Victor 2多功能检测仪微量检测 ATP值。结果 1Victor 2多功能检测仪微量检测 ATP标准品与发光值的关系 ,在 ATP浓度为 10 - 9～ 10 - 5m ol/ml时 ,显示极好的线性关系 ,直线方程为 Y =0 .892 X +10 .2 5 7,相关系数 r=0 .998(P<0 .0 1)。 2微量检测 ATP的变异系数平均为 7.3%。 3微量检测 ATP进行药敏试验 ,敏感性 92 .0 % ,特异性 70 .0 % ,预测准确率为 87.1%。结论 应用 Victor 2多功能检测仪微量检测 ATP进行药敏试验 ,方法稳定 ,实验成本降低 ,更为简便、快速 ,误差小 。

肿瘤体外三磷酸腺苷药敏试验

目的 评价肿瘤细胞经药物处理后的生存情况 ,探讨将该方法用于卵巢癌药敏试验的可行性。方法 采用生物荧光法检测三磷酸腺苷 (ATP) ,对小鼠纤维瘤细胞株L92 9、人卵巢癌组织和腹水细胞进行抗癌药物处理后的细胞活性测定。结果 该法能测出不同浓度药物对细胞作用的剂量—效应关系 ,以及不同个体对不同浓度药物反应的差异 ,实验变异系数CV值为 1 2～ 15 8%。结论 ATP生物荧光法有稳定、重复性好、特别敏感的特点 ,用于卵巢癌体外药敏试验可行。

基质金属蛋白酶-2和-9在宫颈癌的表达及其相关性研究

目的 探讨基质金属蛋白酶 - 2和 - 9(MMP- 2和 MMP- 9)在宫颈癌组织中的表达及其与癌浸润和转移的相关性。方法 采用免疫组化 L s AB法检测 6 2例宫颈浸润癌、5例原位癌、10例正常宫颈以及 10例转移淋巴结中 MMP- 2和 MMP- 9蛋白的表达。结果 MMP- 2和 MMP- 9在宫颈浸润癌细胞及癌旁间质细胞中表达显著高于原位癌及正常宫颈上皮 (P<0 .0 5 ) ,MMP- 9与 MMP- 2有弱相关性 ,MMP- 9的阳性表达显著强于 MMP- 2 (P<0 .0 1) ;MMP- 2和 MMP- 9的表达与临床分期、组织学分级、病理类型均无相关性 (P>0 .0 5 ) ;MMP- 9的表达与宫颈癌淋巴转移有关。结论 基质金属蛋白酶 MMP- 2和 MMP- 9在宫颈癌组织中的高表达与宫颈癌的侵袭性行为有关 ,MMP- 9与宫颈癌的侵袭性行为关系更密切 ,可能成为判断早期宫颈癌预后的指标之一。

荧光原位杂交在未培养羊水细胞产前诊断中的临床应用研究

目的:建立稳定的荧光原位杂交(FISH)技术,探讨FISH技术在未培养羊水细胞产前诊断的临床应用价值。方法:应用国产5条染色体探针(13、18、21、X、Y)对411例有产前诊断指征的孕妇进行未培养羊水细胞的FISH检测,同时进行细胞染色体核型分析,对两者检测结果进行比较。结果:411例中,正常核型398例,非整倍体核型5例(均为21-三体),结构异常4例(平衡易位2例、倒位2例),染色体多态4例。其中正常核型及5例非整倍体核型能被FISH检测出,而染色体结构异常和染色体多态未能检测出;FISH检测时间为48～72小时,较传统核型分析时间(14～21天)大大缩短;FISH检测一次成功率97.3%,并且不受孕周的限制;FISH检测与细胞培养核型分析相符;FISH检测没有受到羊水性状的影响;染色体非整倍体的诊断准确率达100%。结论:应用国产探针对未培养羊水细胞进行FISH分析,实验方法简便快速,可用于染色体非整倍体的产前诊断,有较大的临床应用价值。

原发性输卵管癌25例临床分析

目的:探讨原发性输卵管癌的临床及病理特征、治疗。方法:回顾性分析我院收治的25例原发性输卵管癌病例。结果:患者平均年龄55岁。18例(72%)为绝经后妇女。最常见的临床表现依次为盆腔肿块23例(92%),异常阴道流血10例(40%),阴道排液9例(36%)和腹痛9例(36%)。组织学类型:浆液性腺癌20例(80%),混合性腺癌3例(12%),子宫内膜样腺癌2例(8%)。细胞分化:低分化17例(68%),中-低分化5例(20%),中分化3例(12%)。FIFO分期:Ⅰ期1例,Ⅱ期3例,Ⅲ期17例,Ⅳ期4例。结论:原发性输卵管癌临床表现多样且缺乏特异性,很少能在术前明确诊断。该病恶性程度高,临床多为晚期病例。手术及化疗是主要治疗手段。

奥平栓治疗女性生殖道HPV亚临床感染的临床试验研究

目的 :探讨奥平栓治疗女性生殖系统人乳头瘤病毒 (HPV)亚临床感染的可行性、有效性。方法 :选择 170例生殖道HPV亚临床感染女性患者 ,随机分为 3组 :应用奥平栓联合因特芬 (α -干扰素 )治疗者为治疗一组 (n =6 0 ) ,单独应用因特芬治疗为治疗二组 (n =6 0 ) ,不用药为对照组 (n =46 )。采用PCR扩增法检测HPV6 /11型及 16 /18型。结果 :①治疗一组有效率为 82 8%,疗效明显优于治疗二组 (有效率为 5 1 6 %)及对照组 (有效率 32 6 %)。②奥平对HPV亚型均有作用 ,无特异选择性。结论 :本临床研究证明应用奥平栓治疗女性生殖系统HPV亚临床感染具有一定疗效 ,用药方便、安全、经济 ,无毒副反应 ,有临床应用价值。

肺耐药相关蛋白在卵巢癌中的表达及其临床意义

背景与目的:有文献表明,肺耐药相关蛋白(lungresistant-relatedprotein,LRP)表达水平与对顺铂、环磷酰胺的敏感程度呈负相关,LRP的过度表达可以预测卵巢癌患者的化疗敏感性及预后,并且对缓解期和生存期是一项独立的预后因素。本文结合药敏实验探讨肺耐药相关蛋白在铂类药物耐药中的作用,及其与卵巢癌预后的关系。方法:①采用三磷酸腺苷生物发光法(ATP-bioluminescenceassay)对50例新鲜上皮性卵巢癌组织进行药物敏感实验,并对患者进行3个化疗疗程的随访;②采用免疫组化SP法测定其石蜡标本中LRP的表达情况。结果:①LRP非过度表达为24%,过度表达占76%;②LRP在卵巢癌中为非过度表达、顺铂敏感的为9例(75%),耐药的为3例(25%),但无显著差异;③LRP在期别晚、组织分化差的卵巢癌组织标本中过度表达明显增多,且有统计学意义。结论:LRP的表达水平与肿瘤的分期、分化程度及化疗敏感性有一定关系,有可能成为筛选化疗药物、判断病人预后的指标。

粘多糖贮积症Ⅱ型的酶学诊断、产前诊断及临床分析

目的检测硫酸艾杜糖-2-硫酸酯酶酶活性,对粘多糖贮积症Ⅱ型疾病进行诊断及产前诊断。方法设置荧光检测仪激发波长355μm,发射波长460μm,检测处理后的血浆或细胞上清液。结果共测17标本,门诊患者10例,其中1例为女性,硫酸艾杜糖-2-硫酸酯酶酶活性均异常;胎儿产前诊断7例,根据酶活性结果判定5例正常,2例患病。结论荧光酶学方法检测粘多糖贮积症Ⅱ型疾病操作快速、诊断明确。

子宫内膜异位症及子宫腺肌症患者雌、孕激素受体研究

用葡聚糖—活性炭分离法(DCC)在18例卵巢宫内膜异位症患者的异位内膜组织及13例子宫腺肌症患者的局部腺肌组织中测得雌激素受体(ER)和孕激素受体(PR),但其阳性结果平均值低于正常宫内膜。18例卵巢宫内膜异位症中,PR阴性6例(33.4％),这可能与部分患者孕激素治疗效果不满意有关;13例子宫腺肌症中PR阳性10例(76.9％),提示对40岁以下患者保留子宫,采用激素治疗的可能性。雌、孕激素受体水平与这两种疾病患者的治疗及预后的关系,值得进一步探讨。

FHIT基因杂合性丢失及微卫星不稳定性与宫颈癌发生发展的关系

目的探讨FHIT基因杂合性丢失(LOH)及微卫星不稳定性(MI)在宫颈癌发生发展中的作用。方法选择FHIT基因的两个微卫星多态标记对60例浸润性宫颈癌及35例宫颈上皮内瘤样病变(CIN)组织进行LOH和MI检测。结果在D3S1234和D3S1300座位上,浸润性宫颈癌的LOH发生率分别为45.0%(27/60)、38.3%(23/60),MI频率分别为18.3%(11/60)、11.7%(7/60)。CIN的LOH频率分别为42.9%(15/35)、37.1%(13/35)。MI频率分别为11.4%(4/35)、8.6%(3/35)。宫颈癌及CIN在两个位点的LOH和MI无统计学差异(P>0.05);两位点的LOH阳性率在宫颈癌组织高中分化与低分化之间有统计学差异(P<0.05);双座位的LOH及MI在宫颈癌有无淋巴结转移间有统计学差异(P<0.05);高级别CIN(CIN及原位癌)患者的LOH和MI的发生率高于低级别CIN(CIN、)。结论FHIT基因的改变是CIN发生过程中的较晚期事件;FHIT基因的LOH对于宫颈癌的筛查、早期诊断及判断预后可能具有临床实用价值。

bFGF-MAb抑制卵巢癌细胞及其腹腔移植瘤生长的实验研究

目的 观察碱性成纤维细胞生长因子的单克隆抗体 b FGF- MAb对人卵巢癌细胞的增殖、卵巢癌腹腔移植瘤裸鼠的生存率和肿瘤血管生成的影响 ,为卵巢癌的临床生物治疗提供实验基础。方法 1将人卵巢癌细胞株 SKOV3接种于 2 4孔板 ,加入不同浓度的 b FGF- MAb,每日行结晶紫染色、Vector2 - 14 2 0多标记计数仪比色 ,测定 OD4 90 值 ;2将 SKOV3细胞接种于 BAL B/ c裸鼠腹腔形成卵巢癌腹腔移植瘤模型 ,每周 2次将 b FGF- MAb注射于腹腔 ,比较裸鼠生存时间 ;3解剖裸鼠 ,计数肠系膜上种植瘤的个数并称重 ;4对移植瘤组织进行 CD31 的免疫组化染色后测定肿瘤内微血管密度 (MVD)。结果 1b FGF- MAb在 0～ 15 μg/ ml的范围内 ,其抑制 SKOV3细胞增殖的作用呈浓度依赖性 ,实验第 4 d,15 μg/ m l组能抑制细胞增殖的 2 4 % ;2腹腔注射 b FGF- MAb的裸鼠生存时间较对照组平均延长 10 d;3b FGF- MAb组肠系膜上肿瘤种植灶的数目和重量分别是对照组的 70 .6 %和 6 9.2 % ;4 b FGF- MAb组腹腔移植瘤 MVD是对照组的 6 2 .8%。结论 b FGF- MAb能明显抑制卵巢癌的生长和肿瘤血管生成 。

血清学产前筛查实验室质量控制管理

血清学产前筛查是目前应用最为广泛的产前筛查方法。虽然血清生化指标检测是血清学产前筛查极为重要的一环，但不同于一般的生化检测项目，影响血清学产前筛查风险值的因素还有诸多，如年龄、孕周、体质量等都可能造成风险计算值的变异，从而影响风险度评估。因此，血清学产前筛查的实验室质控管理较常规临床生化检测更为复杂、环节更多、要求更高。根据我中心多年进行血清学产前筛查工作的经验，我们将从以下两方面分别讨论血清学产前筛查质量控制管理问题。

实时荧光定量PCR和RT-PCR检测宫颈癌细胞株HPV-16 E6和E7基因的实验研究

目的探讨实时荧光定量PCR和RT-PCR检测HPV-16E6和E7基因的实验方法。方法将制备的含HPV-16E6和E7基因的质粒作为标准品,建立实时荧光定量PCR和RT-PCR方法,分别对3种宫颈癌细胞株进行HPV-16E6和E7基因的DNA和RNA拷贝数的定量检测。结果建立的实时荧光定量PCR标准曲线相关系数大于0.99,PCR效率在90%以上。HPV-16E6和E7基因的DNA和RNA拷贝数在宫颈癌细胞株CaSki、SiHa和HeLa中从高到低依次是CaSki>SiHa>HeLa。结论用实时荧光定量PCR和RT-PCR方法研究HPV-16E6和E7基因的DNA和RNA含量结果可靠,为进一步研究两个基因与宫颈病变的关系奠定了基础。

染色体微阵列分析技术在超声筛查心室强光点胎儿产前诊断中的应用

目的探讨染色体微阵列分析技术(chromosomal microarry analysis,CMA)在超声筛查心室强光点胎儿产前诊断中的临床应用价值。方法采用美国Affymetrix公司CytoScan 750K芯片对医院183例超声筛查提示心室强光点的胎儿羊水标本进行检测,并用Chas v3.1软件对结果进行分析。结果 183例心室强光点胎儿羊水标本中,CMA共检出染色体异常胎儿9例,异常检出率为4.92%,其中非整倍体3例(21三体1例、XXY 1例、XYY 1例),占总例数的1.64%;具有临床意义拷贝数变异(pathogenic copy number variation,pCNV)6例(其中1例为16p13.11复发性微缺失),占总例数的3.28%。结论与传统染色体核型分析及其他快速产前诊断方法相比,CMA针对全染色体,可有效地额外检出具有临床意义的微缺失/微重复,从而显著提高心室强光点胎儿染色体异常的检出率,可有效降低胎儿出生缺陷的发生。