二次谐波结合双光子荧光成像方法观察人源胶原蛋白透皮吸收情况

目的:用二次谐波成像结合双光子荧光成像的方法观察人源胶原蛋白透皮吸收的情况。方法:将荧光标记的人源胶原蛋白(1 mg/mL)涂抹于小鼠表皮层经皮肤吸收1 h后用背向二次谐波观察皮肤内胶原纤维作为真皮层定位标志,用双光子扫描共聚焦显微镜观察人源胶原蛋白透皮吸收深度,吸收方式。结果:二次谐波成像结合双光子荧光成像表明人源胶原蛋白透皮吸收1 h后可观察到荧光信号沿着毛囊聚集,并有部分荧光分子由毛囊扩散至真皮层。结论:二次谐波可以更快速,更灵敏地检测皮肤中的胶原纤维,以此作为检测物质透皮吸收深度的定位标志,具有不受荧光信号干扰的优点。人源胶原蛋白可以沿着毛囊进入真皮层,并从毛囊中扩散至胶原纤维层从而补充皮肤中的胶原纤维。

基于网络药理学和分子对接技术的生脉饮(党参方)治疗高血压的机制研究

目的:通过网络药理学以及分子对接技术探索生脉饮(党参方)辅助治疗高血压(Hypertension)的活性成分和潜在作用机制。方法:借助TCMSP、Pubchem、SwissTargetPrediction数据库筛选党参、麦冬、五味子的活性成分及靶点。通过CTD、GeneCards、OMIM数据库获取与高血压相关的靶点。利用Venny在线分析工具得到治疗高血压的潜在作用靶点,在Cytoscape3.2.1中构建中药-活性成分-作用靶点-疾病网络等多层次网络图。采用STRING数据库检索生脉饮(党参方)治疗高血压的间接靶点。借助Cytoscape中的ClueGO插件进行GO分析、通过DAVID数据库进行KEGG通路富集分析,并运用Omicshare平台绘制气泡图。利用RCSB PDB、Autodock Vina 1.1.2等软件进行分子对接研究。结果:生脉饮(党参方)治疗高血压的潜在作用靶点有184个,主要涉及循环系统中的血管调节、第二信使信号介导、血压调节等过程,cGMP-PKG信号通路、神经活性配体—受体相互作用通路、cAMP信号通路、蛋白聚糖在癌症中的作用通路等通路。分子对接结果显示生脉饮(党参方)的主要活性成分均与高血压的受体具有较好的结合力。结论:生脉饮(党参方)通过多成分、多靶点发挥治疗高血压的作用,为生脉饮(党参方)辅助治疗高血压提供了理论依据。

分子生物色谱技术中生物大分子在中药研究中的应用进展

分子生物色谱技术是基于分子特异性识别原理逐渐发展起来,具有重现性好、分析速度快、具有药理学意义等特点,适用于中药药效物质基础的筛选研究。本文综述了近10年国内外关于分子生物色谱法在药物研究中应用的文献,着重介绍了分子生物色谱技术中常用生物大分子如血浆蛋白、受体、酶等及其在中药研究中的应用,如活性成分筛选、药物相互作用研究、质量控制方法等,以期为分子生物色谱法的广泛应用提供参考。

基于HPLC指纹图谱及多成分定量的白芍质量评价研究

目的:采用高效液相色谱法建立白芍药材和饮片的特征指纹图谱和芍药苷、芍药内酯苷含量的测定方法,为白芍药材和饮片的质量控制提供依据。方法:经多个条件筛选,确定HPLC指纹图谱的方法,以ZORBAX SB-C18为色谱柱,流动相为0.1%磷酸水-乙腈,芍药苷为参比峰,建立白芍指纹图谱。采用指纹图谱相似度评价软件进行数据评价,计算共有峰相对保留时间和相对峰面积;同时测定26批白芍中芍药苷、芍药内酯苷的含量。结果:所建立的标准对照色谱指纹图谱,白芍的相似度可以达到0.9以上,26批白芍中芍药苷含量均在2.7%以上、芍药内酯苷含量均在0.7%以上。结论:白芍HPLC指纹色谱方法具有重复性强,精密度和稳定性好等特点,兼顾了芍药苷和芍药内酯苷含量测定方法,为评价白芍药材质量提供科学参考。

知母配方颗粒中4种成分在大鼠体内的药动学研究

目的建立HPLC-MS/MS法同时测定大鼠血浆中新芒果苷、芒果苷、知母皂苷BⅡ和知母皂苷AⅢ的含量,并用于知母配方颗粒与饮片提取物在健康大鼠体内的药动学行为的比较。方法采用Phenomenex Kinetex C_(18)(75 mm×2.1 mm,2.6 μm)色谱柱,水(0.1%甲酸)-甲醇(0.1%甲酸)为流动相,梯度洗脱,流速为0.4 mL·min^(-1),柱温为30℃。质谱检测器采用电喷雾离子源,在负离子模式下进行多反应监测。结果知母配方颗粒与饮片提取物中新芒果苷、芒果苷、知母皂苷BⅡ和知母皂苷AⅢ的药动学参数差异无统计学意义。结论知母配方颗粒与饮片提取物具有生物等效性,为知母颗粒的临床合理用药提供了参考。

顶空固相微萃取-气质联用技术在食品领域的应用进展

顶空固相微萃取技术(Headspace Solid-Phase Microextraction,HS-SPME)作为一种绿色环保的样品前处理技术,通常与气相色谱-质谱联用技术结合用于分析复杂基质中有机挥发性物质。HS-SPME集采样、萃取、浓缩及样品导入于一体,具有高效快速、灵敏度高、易于自动化等优点。气相色谱-质谱法(Gas Chromatography-Mass Spectrometry,GC-MS)主要用于挥发性和半挥发性有机化合物定性和定量分析。顶空固相微萃取-气质联用技术(HS-SPME-GC-MS)用于挥发性成分分析,在食品领域备受青睐。简要概述了HS-SPME-GC-MS联用技术,综述了近5年HS-SPME-GC-MS在果蔬、粮油、肉制品、水产品、饮料及酒类等食品领域的最新进展和应用,并展望了其在食品领域的发展前景。

痰热清注射液对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌生物膜三维结构的影响

目的观察痰热清注射液对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌生物膜三维结构的影响,并研究其作用机制,为临床治疗耐药菌生物膜提供参考。方法采用微量稀释法测定痰热清与万古霉素对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度,微孔板法检测给药后耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的成熟期细菌生物膜内活菌数的变化;以Calcofluor White Stain为荧光探针标记药物对细菌生物膜胞外多糖含量的影响;应用激光共聚焦显微镜观察药物对经syto9标记的细菌生物膜内活菌的变化;应用扫描电子显微镜观察给药后成熟细菌生物膜形态结构的改变。结果万古霉素和痰热清注射液对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度分别为5mg/L和1/2痰热清原液。痰热清注射液(1/2-1/128痰热清原液)作用后成熟期生物膜内活菌量减少(P<0.01);1/2-1/8痰热清原液作用后耐甲氧西林金黄色葡萄球菌细菌生物膜胞外多糖的含量下降。激光共聚焦显微镜观察痰热清作用后细菌生物膜的水通道被破坏,成熟细菌生物膜厚度降低;扫描电子显微镜观察痰热清注射液作用后细菌生物膜变得疏松,膜性结构消失,菌体大小不一。结论痰热清注射液能破坏耐甲氧西林金黄色葡萄球菌细菌生物膜的三维结构。

细菌生物膜与表面活性剂抗菌的研究进展

细菌生物膜是区别于游离细菌的另一种常见生存模式,其形成的重要标志是外层有胞外多聚物包裹。胞外多聚物是造成细菌生物膜难以清除的重要原因,它是包裹在细菌菌体外的大分子多聚物,构成了细菌生物膜的三维结构。表面活性剂是一类带电荷并具有两亲性质的化合物,可能与带负电荷的细菌生物膜相互作用产生灭菌效果。近年来,表面活性剂的抗菌能力受到人们的关注,文章将从表面活性剂的分类,对5种表面活性剂的抗菌效果进行概述。