17-AAG对人绒毛膜癌JAR细胞MMP-2和MMP-9表达的调控作用

目的:探讨热休克蛋白90(HSP90)抑制剂17-丙烯胺基-17-去甲氧基格尔德霉素(17-AAG)对人绒毛膜癌JAR细胞基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9蛋白表达的调控作用。方法:体外培养人绒毛膜癌JAR细胞,以不同浓度的17-AAG作用JAR细胞,采用MTT法检测JAR细胞的增殖抑制率,Western blotting法检测MMP-2、MMP-9蛋白的表达情况。结果:MTT结果显示,17-AAG对JAR细胞生长具有明显的抑制作用,并呈浓度依赖性。5μg/ml、10μg/ml、20μg/ml、40μg/ml的17-AAG作用后,JAR细胞MMP-2、MMP-9蛋白的表达明显下调。结论:17-AAG对人绒毛膜癌JAR细胞的增殖具有明显的抑制作用,且能抑制JAR细胞MMP-2、MMP-9蛋白的表达。

17-烯丙胺基-17-去甲氧基格尔德霉素对人绒毛膜癌JAR细胞系细胞周期和凋亡的影响及其相关机制

目的探讨热休克蛋白90(HSP90)抑制剂17-烯丙胺基-17-去甲氧基格尔德霉素(17-AAG)对人绒毛膜癌JAR细胞系细胞周期和凋亡的影响及其相关机制。方法体外培养人绒毛膜癌JAR细胞系,经不同浓度的17-AAG作用24 h后,采用TUNEL细胞凋亡法及Annexin V-FITC/PI双标记流式细胞术检测细胞凋亡;流式细胞术检测细胞周期;Real-time PCR法和Western blotting法检测血管内皮生长因子(VEGF)、cyclinD1、cyclin A1和Caspase-3在mRNA和蛋白水平的表达情况。结果 17-AAG对JAR细胞生长具有明显的抑制作用,并存在浓度依赖性。各组细胞发生G_2期阻滞及明显凋亡;5、10、20 mg/L 17-AAG作用24 h后,各组细胞增殖相关基因cyclinD1mRNA及蛋白表达水平相对于0 mg/L 17-AAG处理组(对照组)均下调,VEGF蛋白表达水平相对于0 mg/L 17-AAG处理组(对照组)下调,且下调程度与处理浓度成正比,而凋亡相关基因Caspase-3的mRNA未出现明显上调,但其在蛋白表达水平上调。结论 17-AAG能够抑制JAR细胞增殖活力,诱导细胞凋亡,17-AAG可能通过下调VEGF的表达,产生抗肿瘤血管新生作用;可能通过下调cyclinD1使细胞周期发生G_2期阻滞;且可能通过上调Caspase-3诱导细胞凋亡。