牛结节性皮肤病病毒荧光定量PCR方法的建立与应用

为了建立牛结节性皮肤病病毒(LSDV)的快速诊断方法,本试验依据LSDV GCPR基因的保守序列区域设计了荧光定量PCR的引物和探针,并建立了快速诊断LSDV的荧光定量PCR方法。结果表明,建立的LSDV荧光定量PCR方法在3.67×10^(1)~3.67×10^(7) copies/μL拷贝标准品间具有良好的线性关系,线性相关系数达0.9905;该方法具有良好的敏感性,其检测病毒系列含量下限为3.67×10 copies/μL;该方法特异性良好,与山羊痘病毒、牛传染性鼻气管炎病毒、牛副流感病毒3型、牛病毒性腹泻病毒、牛呼吸道合胞体病毒等病毒不存在交叉反应;该方法重复性较好,批内和批间的变异系数均介于0.133%~1.81%。该方法,临床样品的检测符合率达90%。本试验所建立的LSDV荧光定量PCR方法为临床诊断牛结节性皮肤病提供了一种快速、灵敏的检测方法,为LSDV流行病学调查和监测提供了技术支持。

鸡毒支原体病的传染病学、发病机制及防控措施

家禽的支原体病是由软膜体纲(Mollicutes)支原体目(Mycoplasmatales)支原体科(Mycoplasmataceac)支原体属(Mycoplasm)的鸡毒支原体(Mycoplasma gallisepticum,MG)和鸡滑液囊支原体(Mycoplasma synoviae,MS)引起,其中MG是分布最广泛的致病性支原体,具有广泛的宿主易感性和毒力。MG主要感染家禽的呼吸系统、生殖系统和肌肉骨骼系统,导致死胚、雏鸡生长性能差、降低产蛋鸡生产性能,对肉、种禽养殖业危害巨大,行业内对其净化的呼声越来越高。鸡毒支原体病的预防主要依赖于农场和鸡群的生物安全、管理策略、早期诊断、抗菌剂的使用和疫苗接种。本文综述了鸡毒支原体病的传染病学、感染的发病机制以及防控措施,以期为鸡毒支原体的净化防治提供理论支撑。

甜菜碱对北京鸭生长性能、血清抗氧化能力、肠道屏障指标及形态结构的影响

为探究饲粮添加甜菜碱对北京鸭生长性能、血清抗氧化能力、肠道屏障指标及肠道形态结构的影响,试验选择1日龄健康北京鸭240只,随机分成4组,每组6个重复,每个重复10只北京鸭。对照组饲喂基础饲粮,试验组在基础饲粮中分别添加400 mg/kg甜菜碱(低剂量组)、800 mg/kg甜菜碱(中剂量组)、1200 mg/kg甜菜碱(高剂量组),于第42天清晨屠宰取样。结果显示:与对照组相比,高剂量组和中剂量组甜菜碱可以显著提升北京鸭42日龄体重(P<0.05),三种添加剂量的甜菜碱均显著降低北京鸭料重比(P<0.05);与对照组相比,高剂量组和中剂量组甜菜碱显著提高42日龄北京鸭血清中超氧化物歧化酶(SOD)活性(P<0.05),降低丙二醛(MDA)含量(P<0.05);与对照组相比,三种剂量甜菜碱均显著降低42日龄北京鸭血清中二胺氧化酶(DAO)的活性(P<0.05),中剂量组和低剂量组甜菜碱显著降低内毒素(ET-1)含量(P<0.05);与对照组相比,三种添加剂量的甜菜碱均明显提高42日龄北京鸭十二指肠绒毛高度(P<0.05),高剂量组和中剂量组甜菜碱显著提高空肠绒毛高度和绒毛高度/隐窝深度(P<0.05),中剂量组显著降低空肠的隐窝深度(P<0.05)。综上所述,饲粮添加甜菜碱可以提高北京鸭生长性能,增强机体抗氧化能力,维持肠道屏障通透性,改善肠道形态,且本试验条件下,800 mg/kg的添加剂量效果较佳。

伪狂犬病病毒Qihe547分离株主要保护性抗原基因序列的变异分析

2012年以来伪狂犬病（PR）在全国多省份暴发。为了解流行PR病毒（PRV）主要保护性抗原基因的变异情况,本研究从山东齐河地区经PRV Bartha-K61疫苗株免疫猪群中分离到一株PRV命名为Qihe547株,并采用PCR方法对该病毒分离株编码主要保护性抗原糖蛋白gB、gC和gD基因进行扩增及测序分析。结果显示,该病毒株与新近PRV分离株同属基因Ⅱ型。与Bartha株相比,Qihe547分离株在gB的优势抗原表位区（aa59~aa126）、gC膜外区（aa23~aa453）和gD主要抗原表位区,潜在的抗原位点及O-糖基化位点存在明显变异,推测这些变异可能影响Qihe547分离株的抗原性,利于病毒逃避宿主免疫反应,也可能是Bartha-K61疫苗诱导产生的中和抗体不能完全中和病毒的原因之一。本研究为PRV的有效防制及其疫苗研制提供了相关的数据。

2016-2020年山东省家畜布鲁氏菌病血清学监测结果统计分析

为了解山东省家畜布鲁氏菌病流行情况,在"全国动物卫生监测平台——疫病监测系统"数据库中,下载2016—2020年山东省各年度的布鲁氏菌血清感染抗体检测数据,使用SPSS 22.0软件进行统计分析。结果显示:2016—2020年山东省共检测血清样品1 025 069份,检出阳性3 599份,平均个体阳性率为0.35%;共检测场点26 296个,检出阳性场点367个,平均场点阳性率为1.40%;各年份的个体阳性率分别为0.70%、0.53%、0.24%、0.28%和0.19%,场点阳性率分别为2.07%、2.13%、1.04%、1.02%、0.86%,均总体呈现下降趋势,但各年份差异不显著(P>0.05)。羊、奶牛和其他品种牛的个体阳性率分别为0.43%、0.29%和0.07%,场点阳性率分别为1.75%、1.37%和0.42%,阳性水平较低,品种间无显著差异(P>0.05);种畜场、散养户和商品代场的个体阳性率分别为0.63%、0.33%和0.31%,场点阳性率分别为2.50%、1.42%和1.20%,阳性水平也较低,场点间差异也不明显(P>0.05)。结果表明,山东省布鲁氏菌病总体防控效果较好,发生大流行的风险较低,但仍存在疫情散发风险。结果提示,应进一步加强家畜布鲁氏菌病综合防控,加大动物跨区域调运检疫以及交易市场的监管力度,全面提升布鲁氏菌病防控能力,持续开展布鲁氏菌病净化,从根本上遏制布鲁氏菌病的发生和流行。本研究为山东省制定布鲁氏菌病防控净化策略和措施提供了依据。

丁酸梭菌对填饲北京鸭生长性能、免疫功能及血液抗氧化能力的影响

试验旨在研究饲粮中添加丁酸梭菌对填饲北京鸭生长性能、免疫功能和血液抗氧化指标的影响。选取1日龄健康北京鸭300只,随机分成5个组,每组6个重复,每个重复10只鸭。对照组饲喂基础饲粮,试验组在基础饲粮中分别添加100 mg/kg丁酸梭菌(低剂量组)、200 mg/kg丁酸梭菌(中剂量组)、400 mg/kg丁酸梭菌(高剂量组)以及150 mg/kg金霉素(抗生素组)。从第37天开始,对所有北京鸭进行人工填饲,每6 h填饲一次,共填饲5 d,于第42天清晨屠宰取样并检测相关指标。结果表明:①37日龄时,丁酸梭菌组和抗生素组的体重均显著高于对照组(P<0.05),但42日龄时,各组之间的体重差异不显著(P>0.05)。②与对照组相比,饲粮中添加中剂量的丁酸梭菌可以显著提高填饲北京鸭血清中IgA、IgG、C3和C4的含量(P<0.05)。③与对照组相比,饲粮中添加中剂量和高剂量的丁酸梭菌显著降低填饲北京鸭血清中IL-6和IL-17的含量(P<0.05)。④与对照组相比,只有中剂量组的丁酸梭菌显著提高填饲北京鸭血清中SOD活性(P<0.05),且均显著降低血清中CORT、ROS和MDA的含量(P<0.05)。由此可见,丁酸梭菌和填饲都可以使北京鸭的体重增加,但丁酸梭菌可以有效缓解填饲应激引起的机体氧化应激和炎性反应,并提高机体免疫功能,200 mg/kg的添加效果最佳。

饲养密度对北京鸭黏膜免疫、消化功能及血液抗氧化能力的影响

试验旨在探究不同饲养密度对北京鸭黏膜免疫、消化功能以及血液抗氧化功能的影响。选取900只15日龄北京鸭公鸭随机分为5个处理组,即A组、B组、C组、D组和E组,饲养密度分别为4只/m^2、6只/m^2、8只/m^2、10只/m^2、12只/m^2,每个处理组6个重复,每个重复30只。42日龄时进行屠宰采样,用于试验指标的测定与分析。结果表明:不同饲养密度条件下,北京鸭出栏体重显著降低(P<0.05);肠道黏膜IL-6和sIgA的含量差异显著(P<0.05);而呼吸道黏膜IL-2、IL-6、IL-17及sIgA的含量差异均显著(P<0.05);肠道黏膜中糜蛋白酶、蔗糖酶以及碱性磷酸酶的活性差异显著(P<0.05);血清中GSH-Px的活性显著降低(P<0.05),CAT和MDA的水平显著升高(P<0.05)。因此可见,高饲养密度影响了北京鸭消化道和呼吸道的黏膜免疫功能,提高了黏膜中分泌型IgA的含量,降低部分消化酶的活性,使其产生氧化应激。推荐北京鸭后期网上饲养的密度为6~10只/m^2。

山东省首起野生天鹅H5N8高致病性禽流感疫情的紧急调查及处置

2021年1月12—19日,山东黄河三角洲国家级自然保护区大汶流管理站出现35只死亡的野生疣鼻天鹅。经现场调查,市级和省级实验室检测,诊断为疑似H5N8亚型高致病性禽流感,经国家禽流感参考实验室进行病毒分离鉴定,最终确定为H5N8亚型高致病性禽流感疫情。疫情发生后,通过现场调查、座谈及实验室检测等方式,对此次疫情开展了紧急流行病学调查,追溯疫情的可能来源,分析疫情的扩散风险,继而提出针对性的应急处置措施。调查发现,此次疫情由迁徙候鸟带毒引入引起的可能性较大;野生鸟类未及时开展免疫,导致体内抗体水平低下是疫情暴发的内源因素。由于迅速采取了合理的应急处理措施,此次疫情得到迅速控制,避免了疫情扩散。本次疫情警示,必须切实做好禽流感的强制免疫和监测工作,高度重视自然保护区及其附近场所珍稀禽类的免疫,以降低疫情发生风险。

山东省部分规模猪场非洲猪瘟防控成本与效益调查

为了解山东省规模猪场非洲猪瘟防控成本和效益变化情况,2020年上半年从母猪繁殖性能、育肥猪生产性能、仔猪及饲料购买费用、医疗技术投入费用、防控成本以及收入和利润等方面,对抽检的19家规模养猪场开展问卷调查,并对调查结果分别与2019年和非洲猪瘟疫情发生前年份(以下简称正常年份)进行统计对比。结果显示:2020年上半年规模猪场能繁母猪存栏量同比增加200.1%,比正常年份增加372.8%;育肥猪年出栏量同比增长720.7%,比正常年份增长527.0%。仔猪平均购买价格同比增长49.2%,比正常年份增长167.8%;医疗防疫费同比增长4.1%,比正常年份增长11.6%;改造或新建防控设备设施投入大幅增加,其中智能化系统、散装饲料塔、空气过滤系统、外墙防护设施的升级新建投入费用均超过1600万元;血清学检测费用同比增加3.4%;病原学检测费用同比增加103.4%。断奶仔猪平均售价同比增长59.9%,比正常年份增长148.4%;育肥猪平均售价同比增长24.4%,比正常年份增长127.0%;净利润同比增加63.2%,比正常年份增加1125.8%。结果表明,山东省规模猪场在防控非洲猪瘟疫情方面的投入明显加大,但生猪产能显著提升,生猪养殖收益大幅增加,因而生猪生产恢复趋势利好。

北京地区健康鸭肠道大肠杆菌血清型鉴定和耐药性分析

为了解北京地区北京鸭肠道大肠杆菌分离株的血清型和耐药情况,从北京市周边地区的散养鸭场采集健康北京鸭的泄殖腔拭子100份,通过细菌分离纯化、PCR鉴定,共分离鉴定出78株大肠杆菌,对其进行分子分群、药敏试验以及血清型检测。结果显示:分离的78株大肠杆菌中A群、B1群、B2群、D群分别占48.72%、10.26%、15.38%和25.64%;有66株分别属于13个血清型,其中O4、O6、O8、O75和O88血清型分离株均大于10%,为优势血清型;分离株对氨苄西林、阿莫西林克拉维酸、氯霉素、恩诺沙星、多西环素、四环素、氟苯尼考等16种抗生素均表现出不同程度的耐药性,对4种以上抗生素耐药的菌株占94.87%,呈现严重的多重耐药性。综上所述,北京地区健康北京鸭肠道内的大肠杆菌分子分群各不相同,多重耐药现象严重,同时血清型众多,应该加强散养户鸭源大肠杆菌耐药性和血清型的监测。

丁酸梭菌在畜禽养殖业中的应用

丁酸梭菌是一种革兰阳性产芽孢的厌氧杆菌,因其可以产生大量丁酸而得名。丁酸梭菌由Prazmowski于1880年首次从猪的肠道中分离出来[1],并被认为是环境中、人体以及动物肠道中的共生菌群。此后,丁酸梭菌逐渐被很多亚洲国家,尤其是日本、韩国和中国等当做益生菌在畜禽养殖中使用[2]。很多研究表明,特定的丁酸梭菌菌株具有益生菌的特性,尤其在日本、韩国以及中国等亚洲国家很早就把丁酸梭菌进行商品化的使用[3-4]。丁酸梭菌因其具有促进机体生长、提高机体免疫、改善肠道菌群以及维持机体健康等诸多优点,而被开发为一种商品化的绿色添加剂。

北京地区鸭源大肠杆菌耐药表型和Tet aac耐药基因的检测

从北京地区肉鸭养殖场的发病鸭样本中分离鉴定出30株大肠杆菌,并进行药敏试验和四环素耐药基因Tet和氨基糖苷类耐药基因aac的PCR检测,初步探究肉鸭源大肠杆菌的耐药情况。通过药敏试验,发现鸭源大肠杆菌对青霉素类、四环素类和氨基糖苷类抗生素均表现出耐药性,甚至出现多重耐药。同时对其耐药基因进行PCR检测发现,5种四环素耐药基因Tet的检出率为96. 7%。其中Tet(B)阳性率最高,为63. 3%,Tet(A)、Tet(C)、Tet(M)的阳性率分别为60. 0%、30. 0%、13. 3%,未检出Tet(K)。2种氨基糖苷类耐药基因acc的检出率为50. 0%,其中aac(3)-Ⅱc的阳性率为26. 7%,aac(6’)-Ⅰb的阳性率为36. 7%。本研究获得了北京地区鸭源大肠杆菌耐药性以及携带耐药基因的相关数据,为指导养殖户的临床用药及耐药性监测提供了数据参考。

山东省部分地区水貂养殖场户貂源冠状病毒和新型冠状病毒认知调查及病原检测

国外水貂感染新型冠状病毒(SARS-CoV-2)遭扑杀事件引起了国内水貂养殖业关注。为了解SARS�CoV-2对山东省水貂养殖场户的影响,通过问卷调查方法了解水貂养殖场户对貂源冠状病毒和SARS-CoV-2的认知情况,同时采集样本应用双重荧光定量PCR方法进行核酸检测,确定水貂中两种病毒的感染状况。结果显示:47.83%的养殖场户对国外水貂感染SARS-CoV-2被扑杀事件有所了解,36.23%的养殖场户认为该事件会对水貂养殖业带来影响,其中10.14%的养殖场户对水貂进行过SARS-CoV-2核酸检测;84.06%的养殖场户认为貂源冠状病毒不会感染人,57.49%认为国外水貂感染SARS-CoV-2的主要途径是通过养殖场其他动物(如犬猫等)感染,仅0.97%认为貂源冠状病毒与SARS-CoV-2存在一定关系,更多的(52.17%)是不清楚;310份样品的双重荧光定量PCR检测结果均为阴性。结果表明,山东省水貂养殖场户普遍意识到貂源冠状病毒与SARS�CoV-2相关性很小,其对水貂养殖业影响不大。但部分养殖场户对这两种病毒及其对水貂养殖业的潜在威胁尚缺乏足够认知,因此需要加强对养殖场户的认知宣传和病毒监测。

鸡神经系统疾病的鉴别诊断与防制

一、疾病鉴别诊断（一）马立克氏病（MD）鸡马立克氏病是由疱疹病毒引起的一种禽的高度接触性传染病。主要特征为淋巴细胞组织增生,内脏器官以及神经、肌肉组织肿瘤现象。1.临床症状。临床上分为四种类型：神经型,一般侵害坐骨神经最为常见,病鸡步态不稳,共济失调,一侧神经麻痹,严重的不能站立,蹲伏或呈特征性的＂劈叉姿势＂,当迷走神经受侵时则可引起失声、嗉囊扩张以及呼吸困难,

牛结节性皮肤病研究进展

牛结节性皮肤病(Lumpy skin disease,LSD)是由牛结节性皮肤病病毒(Lumpy skin disease virus,LSDV)引起的高度传染性牛病毒性疾病[1]。该病被世界动物卫生组织(OIE)列入须通报动物疫病名录,其也是《中华人民共和国进境动物检疫疫病名录》中的一类动物传染病[2-3]。LSD起源于非洲,1929年首次在赞比亚发现LSD疫情[4]。1989年,LSD首次出现跨洲传播,传入中东地区并逐渐蔓延,但LSD疫情在该地区多以散发为主;2013年,LSD再次出现跨湖传播,传入欧洲并且蔓延趋势扩大[5]。2015年以后,LSD疫情在欧洲及欧亚交界处不断蔓延,哈萨克斯坦、俄罗斯等我国周边国家LSD疫情的暴发致使LSD疫情输入我国的风险增加[5]。2019年,我国首次在新疆确诊LSD疫情,随后福建、江西、广东、安徽、浙江等省份也报导了LSD疫情的发生,给养牛业造成了巨大的经济损失[6-7]。如今LSD已传入我国,应重视该病宣传及防控,阻止其在我国牛群中的蔓延,防止其进一步危害我国养牛业。

日粮添加地顶孢霉培养物对北京油鸡屠宰性能、肌肉氨基酸和脂肪酸含量的影响

试验旨在研究日粮中添加地顶孢霉培养物对北京油鸡屠宰性能、肉品质及氨基酸和脂肪酸含量的影响。选取330日龄健康北京油鸡216只,随机分成2组,每组6个重复,每个重复18只。对照组饲喂玉米-豆粕型基础日粮,试验组饲喂添加200 mg/kg地顶孢霉培养物的基础日稂,试验期56 d。结果显示:365日龄时,试验组北京油鸡的胸肌重、胸肌率、胸肌的pHU和粗蛋白含量以及胸肌中缬氨酸、蛋氨酸、酪氨酸、苯丙氨酸、脯氨酸、组氨酸等氨基酸的含量和二十碳一缔酸、二十碳五烯酸、芥酸、总不饱和脂肪酸的含量均显著高于对照组(P<0.05);392日龄时,试验组北京油鸡的胴体重、腿肌重、腿肌率以及胸肌中丙氨酸、异亮氨酸、总氨基酸的含量和棕榈油酸、亚油酸、α-亚麻酸、γ-亚麻酸、总不饱和脂肪酸的含量均显著高于对照组(P<0.05),胸肌中胆固醇的含量显著低于对照组(P<0.05)。综上所述,地顶孢霉培养物能够提高北京油鸡的屠宰性能、肉品质及肌肉氨基酸和不饱和脂肪酸的含量,提高鸡肉的营养价值。

地顶孢霉培养物对北京油鸡生长性能、脏器指数及血液抗氧化能力的影响

本试验旨在探究地顶孢霉培养物对北京油鸡生长性能、脏器指数及血液抗氧化能力的影响。选取330日龄产蛋后期北京油鸡216只,随机分为对照组和试验组,每组6个重复,每个重复18只鸡。对照组饲喂玉米-豆粕型基础日粮,试验组在基础日粮中添加0.20%地顶孢霉培养物,预试期7 d,试验期56 d。在正式试验开始的第28天(第1阶段)和第56天(第2阶段)屠宰采样,检测北京油鸡的生长性能、胴体品质、脏器指数和血液抗氧化指标。结果显示:与对照组相比,试验组北京油鸡在2个阶段的生长性能和胴体品质均无显著差异(P>0.05);试验组北京油鸡的脾脏指数在2个阶段均显著提高(P<0.05),而其心脏指数和肾脏指数只在第2阶段显著提高(P<0.05);试验组北京油鸡血清中总抗氧化能力(T-AOC)和总超氧化物歧化酶(T-SOD)的活性在2个阶段均显著提高(P<0.05),丙二醛(MDA)含量均显著下降(P<0.05),而谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性只在第2阶段显著提高(P<0.05)。综上所述,地顶孢霉培养物虽未能提高北京油鸡的生长性能,但能够改善其内脏器官的生长发育,并提高机体的抗氧化能力。

2021年山东省家禽养殖场生物安全水平问卷调查

为了解山东省家禽养殖场的生物安全水平,以问卷调查方式,对养殖场基本信息、场内区域划分、免疫接种、引种购进、消毒、饲养管理等问题展开调查。经预调查后,2021年6—7月在全省范围内开展本次调查。在全省16个地级市,采用随机抽样方式,每地级市抽检1~2个县(市、区);应用配额采样方式,在县市域内选取蛋鸡养殖场、肉鸡养殖场以及种禽场各1家。共收到有效问卷141份,分别来自12个地级市36个县(市、区),其中来自蛋鸡养殖场、肉鸡养殖场和种禽场占比分别为63.83%、26.95%和9.22%。所调查养殖场中,按照管理区、生产区、生活区进行区域划分的133家,一半以上的养殖场能做到每周至少消毒1次;137家养殖场有免疫计划,而无免疫计划的只有4家,包括蛋鸡场1家、肉鸡场3家。肉鸡场没有隔离场所的占比最高,达44.7%。106家养殖场对患病动物进行无害化处理。结果表明,所调查家禽养殖场在区域划分、区域管理、消毒管理、环境控制等生物安全方面都进行了相关的设计和应用,在一定程度上,能够起到预防致病因子侵入、阻挡病原微生物扩散的作用,但不同类型养殖场的生物安全水平并不均衡,因此养殖场需继续提高生物安全意识,逐步建立适用于本场的生物安全体系。

山东省动物疫情信息大数据建设的实施

本文介绍了山东省近年来动物疫情信息大数据建设的实施情况:2019年,山东省大数据局启动了“山东省智慧畜牧业务支撑平台”项目,山东省动物疫情信息大数据建设是自2019年开展的山东省动物疫病监测预警平台建设中重要的组成部分。实施过程设计为3个部分,依次为数据采集与录入部分、数据上报和审核部分、数据汇总与分析部分。2020年上半年,动物疫情信息大数据建设工作首先在山东省威海市试运行开展。2020年6月农业农村部下发加强关于非洲猪瘟等动物疫病的监测和疫情上报工作等内容文件,对养殖场自检情况、屠宰场自检情况以及无害化处理场检测情况收集的数据更加细化,据此,山东省及时对之前设计的报告工作信息化方案进行了调整,并运用到了工作实践当中。目前,山东省动物疫情信息大数据建设工作还处于区域试点摸索阶段,对于架构中的问题,也还在不断地调整和完善。

人间伪狂犬病研究进展

伪狂犬病(Pseudorabies,PR)是由伪狂犬病病毒(Pseudorabies virus,PRV)引起的一种多种动物共患的高度致死性的急性传染病,一直是影响全球养猪业健康发展的重要疫病。PRV感染人十分罕见,且颇具争议。但是,2018年以来,我国报道20多例PRV脑炎病例,这再次引起了大家的关注。PR属我国动物二类传染病,并不在我国人畜共患传染病目录中,其对公共卫生安全的威胁尚无定论。本文总结了PRV的流行病学特征、PRV脑炎病例的临床症状以及传播途径等方面研究进展,提出了预防建议,以期为PRV脑炎的防控提供参考。