基于氧化应激基因构建肝细胞癌预后模型及潜在中药预测分析

目的肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)是一种具有高侵袭性、诊断延迟和不良预后的肿瘤。本研究旨在构建一个基于氧化应激基因的HCC预后模型,并探索与该模型相关的中药成分。方法研究使用癌症基因组图谱(the cancer genome atlas,TCGA)和基因表达集(gene expression omnibus,GEO)中的数据集,鉴定与氧化应激相关的差异表达基因。通过单变量和多变量Cox回归以及Lasso回归分析,构建一个用于预测HCC患者预后的模型。利用Coremine Medicine数据库预测模型基因潜在的相关中药成分,并进行归经和性味聚类以及分子对接分析。验证试验:采用MTT法检测预测中药马钱子和龙葵水提液对Hep3B细胞增殖的影响;使用Western blot检测马钱子和龙葵水提液对细胞中SCL7A11蛋白水平的调控。结果在氧化应激相关基因中,EZH2和SLC7A11基因可用于构建预后模型。预测模型模型基因相关的中药主要归肝经、味苦和性寒。分子对接分析表明,龙葵中的5'-甲氧基松脂素和马钱子中的马钱子碱N-氧化物分别与SLC7A11的247号丙氨酸(Affinity=-11.0)和198号赖氨酸(Affinity=-10.2)具有较强的结合能力。实验证实,马钱子和龙葵水提取物对Hep3B细胞增殖呈浓度和时间依赖性抑制作用,并减少了Hep3B细胞中SLC7A11蛋白的表达。结论本研究成功构建了一个基于氧化应激基因的个体化HCC预后模型,并预测了与模型基因相关的潜在中药成分。

壳寡糖抗菌活性的实验研究

目的检测用改良双氧水降解法制备的壳寡糖的体外抗菌活性。方法采用涂布法和滴注法测定壳寡糖对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、枯草芽孢杆菌、白假丝酵母菌的抗菌作用。结果壳寡糖的抗菌效果基本一致。壳寡糖对金黄色葡萄球菌的抑制作用最强 ,0 .5 %的浓度可完全抑制其生长 ;大肠埃希菌次之 ,需 1 %的浓度 ;枯草芽孢杆菌需 2 % ;对白假丝酵母菌的作用最弱 ,需 4 %的浓度。抗菌活性随壳寡糖的浓度增加而增强。结论壳寡糖对 4种供试菌有抑制作用 。

壳聚糖及其衍生物的抗微生物活性研究进展

综述了壳聚糖及衍生物的抗微生物活性。

护卵汤对慢性应激超排卵小鼠卵巢TGF-β1,P-Smad3及FSHR mRNA表达的影响

目的观察护卵汤对慢性应激超排卵小鼠卵巢转化生长因子-β1(transforming growth factor beta 1,TGF-β1)、信号蛋白P-Smad3及卵泡刺激素受体(follicle-stimulating hormone receptor,FSHR)mRNA表达的影响。方法建立慢性应激小鼠模型,造模成功后,随机分为模型组、护卵汤组和生长激素组,另设正常组。在超排卵第3天和注射绒毛膜促性腺激素(human chorionic gonadotropin,HCG)24 h后,检测各组卵巢TGF-β1、P-Smad3及FSHR mRNA表达。结果与模型组比较,在超排卵第3天,护卵汤组和生长激素组TGF-β1、P-Smad3及FSHR mRNA表达均显著升高(P<0.01或P<0.05);注射HCG24 h后生长激素组表达升高更明显(P<0.01)。结论护卵汤可能通过激活TGF-β/Smads信号通路,发挥促进卵泡发育和改善卵巢功能的作用。

SV40LT基因重组腺病毒载体的包装、鉴定及用于转染日本血吸虫童虫细胞的研究

目的构建携带SV40LT基因的重组腺病毒表达载体,制备具有感染力的重组腺病毒,观察其转染日本血吸虫(Schistosoma japonicum,Sj)童虫细胞后的表达情况。方法采用体外连接法构建好的携带SV40LT基因的重组腺病毒质粒(AdHu5-SV40LT)转化Stbl2感受态菌,获得重组腺病毒质粒后,经Pac I酶切线性化后转染293A细胞,获得出重组腺病毒(AdHu5-SV40LT)。将重组腺病毒感染Sj童虫细胞,采用RT-PCR和免疫组织化学检测SV40LT基因的表达情况。结果重组腺病毒载体质粒可转染293A细胞并可在293A细胞内进行有效的复制;提取病毒DNA进行PCR检测证实含有SV40LT目的基因。以重组腺病毒能感染Sj童虫细胞,经RT-PCR和免疫组化检测有SV40LT基因在细胞中的表达。结论成功包装了具有感染能力的含SV40LT基因的重组腺病毒,感染Sj童虫细胞后目的基因有表达,为进一步探索日本血吸虫细胞永生化提供了实验依据。

不同免疫途径对Sj童虫细胞型免疫原诱生的保护性效果及抗体应答差异

目的比较研究小鼠经不同途径接种日本血吸虫(Schistosoma japonicum,Sj)童虫原代细胞(primary juvenile worm cells,pJCs)后所诱导的免疫保护效果,寻找其合适的免疫途径。方法将pJCs经皮下或静脉注射途径免疫昆明小鼠,间隔2w共免疫3次,末次免疫后第4w,与对照组同时经腹部皮肤感染尾蚴30±2尾/鼠,比较三组小鼠的肝脏虫卵数及虫卵肉芽肿的大小、成虫数、虫体大小。同时在第2、3次免疫前及攻击感染前1d,小鼠尾静脉采血,用ELISA法检测抗pJCs-IgG水平。结果 pJCs免疫小鼠后,与PBS对照组比,静脉免疫组的减虫率为48.53%、肝卵减少率为54.54%、虫体平均重量减少率为29.62%(P<0.01)、虫卵肉芽肿面积减少率为36.8%,而皮下免疫组分别为41.28%、43.19%、23.08%、31.2%。IgG抗体水平也是静脉注射组高(PBS组,P<0.01;皮下注射组,P<0.05)。结论日本血吸虫童虫细胞免疫原通过皮下和静脉注射均可诱导小鼠产生对日本血吸虫的免疫保护力,其中静脉注射诱导的免疫保护效应最强,提示通过静脉注射日本血吸虫童虫细胞是可行有效的免疫途径。

案例教学在临床免疫学及检验课堂教学中的应用

为了改进临床免疫学和检验的教学方法,激发学生的学习兴趣,提高学习效果。将案例教学法引入临床免疫学和检验的教学中,在课堂上对临床病例进行分析和总结,使抽象的理论知识转化为可以感知的临床病例,激发了学生的学习兴趣,培养了学生主动学习和实践的能力,取得了良好的教学效果。

壳寡糖与壳聚糖抗微生物活性的比较

目的研究用改良双氧水降解法制备的壳寡糖和前体物质壳聚糖的抗微生物活性并进行比较,提供应用依据。方法采用琼脂稀释法测定壳寡糖和壳聚糖对四种供试菌的抑杀作用;用ELISA检测对HBsAg的破坏效果。结果壳寡糖和壳聚糖均显示明显的抗菌活性,随浓度的增高抗菌效果增强。当壳寡糖浓度为2%时对金黄色葡萄球菌和大肠埃希菌的抑菌率是100%,对枯草杆菌芽孢和白假丝酵母菌的抗菌作用较弱。壳聚糖的抗菌活性稍优于壳寡糖,在测试浓度范围内可完全抑制四种供试菌的生长。但两者对HBsAg均无破坏效果。结论壳寡糖和壳聚糖均具有良好的抗菌活性,但壳聚糖的抗菌活性稍优于壳寡糖。

医学免疫学实验课中加强生物安全教育重要性的探讨

医学免疫学实验课离不开病原微生物,加强生物安全教育非常必要。文章分析了医学免疫学实验教学中主要存在的生物安全问题,根据实验课的自身特点,从树立学生的生物安全意识、加强实验前的准备、实验中的反复强调、实验后的恰当处置和意外情况及时处理等方面,切实保证学生掌握标准的实验操作技术,养成良好的职业行为,确保学生实验室的生物安全。

强化职业防护教育 增强免疫学基础和病原生物学的教学效果

在免疫学基础和病原生物学教学中,通过优化课程设置、调整教学内容,在理论和实践教学中强化职业防护知识及无菌操作技术,以增强学生的职业防护意识。通过渗透职业防护知识,激发学生对这门课程的学习兴趣,增强学习效果。

课前预习加小讲课在医学免疫学教学中的应用

医学免疫学是基础医学中最抽象、难懂的一门学科,如何提高课堂教学效果和教学质量,一直是教学改革的方向。课前预习可有效提高教学效果和质量,但在大学教育中由于没有相应的督促措施与评价手段,学生预习效果往往并不理想。将课前预习与小讲课相结合应用于医学免疫学教学,有利于保证知识的系统性和连贯性,从而提高教学质量。

甲壳低聚糖碘液对微生物杀灭效果的观察

目的测定甲壳低聚糖碘液对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、枯草芽胞杆菌、白假丝酵母菌的杀灭作用。方法用消毒学定量悬浮试验测定甲壳低聚糖碘液(含碘0．5％)的杀菌效果。结果定量悬浮试验结果表明：稀释度为1：32的甲壳低聚糖碘液对金黄色葡萄球菌的杀灭率为100％，而对大肠埃希菌100％的杀灭则需1：16的稀释度。原液对枯草杆菌芽胞的杀灭率为100％，而对白假丝酵母菌的杀灭率仅为52．35％。结论甲壳低聚糖碘液对细菌繁殖体及芽胞有较强的杀灭作用，对白假丝酵母菌作用较差。

“5+3”中医学专业医学免疫学教学改革的探索与实践

对"5+3"中医学专业的医学免疫学课程教学模式进行改革和探索,将医学免疫学独立成为一门课程,同时修改教学计划、调整教学内容、开展创新性实验教学和采用多种教学方法和手段等,以期找到一种适合"5+3"中医学专业的医学免疫学教学模式,达到提高学生学习效果、促进学生科研能力提升的目的。

慢性制动应激建立卵巢早衰及卵巢低反应小鼠模型的研究

目的探讨慢性制动应激建立卵巢早衰及卵巢低反应小鼠模型的方法。方法利用自制制动器对SPF级ICR雌性小鼠进行制动,造成慢性应激状态,观察小鼠的一般情况,称量体重,阴道涂片观察动情周期。制动完全结束后进行微刺激超排卵,在超排卵第3天和HCG注射后24 h计数各级卵泡。结果与未制动小鼠相比,制动期间小鼠的进食、毛色等一般情况变差,体重明显减轻(P<0.05),动情周期异常的例数明显增多(P<0.05),但超排卵第3天和HCG后24 h小鼠各级卵泡计数比较,制动小鼠与未制动小鼠没有明显区别(P>0.05)。结论慢性制动应激可以引起小鼠卵巢功能紊乱或减退,但能否造成卵巢早衰及卵巢低反应还需进一步探讨。

日本血吸虫童虫表膜结合多肽的亲和筛选与初步鉴定

目的筛选噬菌体十二肽库中与日本血吸虫(Schistosoma japonicum)童虫表膜特异性结合的多肽并鉴定。方法利用噬菌体十二肽库与日本血吸虫活童虫靶分子之间的亲和力结合,经3轮吸附-洗脱-扩增,从末次回收的结合噬菌体中随机挑取20个克隆进行测序。根据测序结果 ,选取出现次数最多的噬菌体克隆作为目标噬菌体,免疫组化检测目的噬菌体,并回输到已感染日本血吸虫的小鼠体内,2.5h后处死小鼠,回收肝脏和日本血吸虫童虫,分别洗脱与肝脏和童虫结合的噬菌体,进行统计学分析。结果经3轮筛选后,噬菌体回收率从第1轮的0.77×10-8到第3轮的0.75×10-5,说明噬菌体得到了有效富集。DNA测序结果表明,20个噬菌体克隆中的15个克隆呈现QHPRIRKOOOOO序列。免疫组化结果显示,表达该序列的噬菌体能与童虫表膜有效结合;体内回输试验证实,该噬菌体能有效地靶向结合于体内日本血吸虫童虫表膜。结论筛选获得的短肽QHPRIRKOOOOO能有效地靶向结合日本血吸虫童虫表膜。

甲壳低聚糖的微生态学效应

目的 :了解甲壳低聚糖的微生态学效应 ,为其开发为微生态调节剂提供实验依据。方法 :用甲壳低聚糖〔6 0 0 m g/ (kg· d)〕给正常小鼠、肠道脱污染模型小鼠及 STZ糖尿病模型小鼠连续灌胃 7d及 2 1d,用添加 0 .3%甲壳低聚糖的高脂饲料为高血脂症大鼠模型连续灌胃 4 2 d。各空白对照组均用等体积无菌盐水灌胃。而后分析各组动物肠菌群 ,并测定 STZ糖尿病小鼠血糖、高血脂症大鼠 TC及 HDL- C值。结果 :甲壳低聚糖可以优化正常小鼠肠菌群 ,双歧杆菌数较空白对照组明显增多 (P<0 .0 5 ) ,B/ E值为对照组19.3倍 ,可纠正实验动物因肠道脱污染、糖尿病及高血脂症所致的肠菌群失调 ,双歧杆菌或乳杆菌相应增加 ,与相应空白对照组比较 ,其差异均有显著性意义 ,可以明显降低糖尿病小鼠血糖及高血脂症大鼠血清TC值。结论 :甲壳低聚糖具有良好的微生态学效应 。

卫生检验专业卫生微生物学实验教学改革初探

在整合卫生微生物学实验教学内容的基础上,增强学生实验的独立性;在操作过程中引进质量控制措施;采用多种教学手段和教学形式进行实验教学;模拟实际进行实验考核等一系列措施对卫生检验专业卫生微生物学实验教学改革进行了探索,提高了学生独立操作和解决实际问题的能力,强化了学生的质量控制意识,缩短了实验教学与实际工作间的距离。

黄芪对血吸虫发育及感染宿主免疫应答的影响

目的:了解黄芪对日本血吸虫(Sj)生长发育与其感染小鼠免疫应答的影响。方法:取黄芪注射液,在体内用0.25g/d和0.5 g/d两个剂量分别给Sj感染昆明鼠饮服50 d后,观察小鼠体内Sj生长发育情况,并检测实验小鼠血清中抗卵和抗成虫抗体、IL-6和IL-10水平。结果:对Sj的影响:体内试验结果,与感染对照组比,低量黄芪组、高量黄芪组、低量黄芪+半量吡喹酮(PZQ)以及半量PZQ组的减虫率分别为29.2%、30.3%、43.2%和35.8%,雌虫体长度减少率分别为10.49%、10.57%、33.61%和22.76%,雄虫体长度减少率分别为8.40%、15.33%、32.5%和28.52%,肝卵减少率分别为31.1%、36.0%、47.4%和46.9%。对宿主免疫应答的影响,与感染对照组比,两黄芪组鼠血清中抗SEA抗体水平和IL-6水平降低均显著降低(P<0.05),IL-10水平显著增高(P<0.05)。结论:黄芪对Sj童虫具有一定抗虫作用,并对感染小鼠可下调抗卵抗体、促炎因子的应答水平,上调抗炎因子表达。

微生物学检验实验教学模式的探索与改革

通过整合实验教学内容,开设自主设计综合性实验;采用多媒体教学与讨论式教学相结合的实验教学方法;学生参与实验教学全过程;完善实验考核制度,综合评价学生实验技能;指导学生课外课题、实习前的强化训练等多种形式对微生物学检验实验教学模式进行了探索和改革,加强了课程的实践性和实用性,加强了学生学习的自主性和各种综合能力.