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越橘EST-SSR分子标记的开发及其遗传多样性分析 被引量:4
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作者 孙海悦 郭瑞雪 +4 位作者 王佳卉 盖钰卓 刘禹姗 董梅 李亚东 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2016年第12期172-180,191,共10页
【目的】探讨越橘EST序列中SSR位点的分布规律,开发越橘EST-SSR引物,并分析其在越橘品种遗传多样性研究中的作用。【方法】以91份越橘种质为材料,利用越橘果实转录组(RNA-Seq)的测序结果,通过SSRIT在线搜索,利用Primer Premier 5.0软... 【目的】探讨越橘EST序列中SSR位点的分布规律,开发越橘EST-SSR引物,并分析其在越橘品种遗传多样性研究中的作用。【方法】以91份越橘种质为材料,利用越橘果实转录组(RNA-Seq)的测序结果,通过SSRIT在线搜索,利用Primer Premier 5.0软件设计30对引物,并筛选扩增效果理想的引物,用筛选出的引物分析91份种质的多态性,构建91份种质的系统发育树。【结果】34 464条越橘unigene序列中含有SSR位点的序列有829条,SSR位点有913个,其中二核苷酸、三核苷酸重复是主要的SSR类型,分别占全部SSR位点的13.69%和81.27%。不同核苷酸数目重复基元的重复次数差异很大;越橘EST-SSR位点集中在11~15bp;三核苷酸和六核苷酸重基元复种类最多,在所有重复基元中GAA/TTC发生频率最高。设计的30对引物中有17对引物在供试越橘种质中扩增出理想的PCR产物,17对引物均有多态性。聚类分析结果显示,在遗传相似系数为0.69时,可以将供试越橘种质分成4组。【结论】EST-SSR标记可以用于越橘品种的鉴定与遗传多样性分析。 展开更多
关键词 越橘 EST SSR 遗传多样性
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基于越橘果实转录组测序WBC型转运蛋白基因发掘及表达分析 被引量:1
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作者 康立敏 孙海悦 +7 位作者 陈丽 刘红弟 耿金曼 盖钰卓 刘禹姗 王静 汪立宇 李亚东 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期1-9,共9页
为发掘越橘中WBC型(White brown complex)ABC转运蛋白(ATP-binding cassette transporters)基因,研究其与次生代谢物质(Secondary metabolite)运输关系,从越橘果实转录组测序文库中筛选出21个编码WBC型转运蛋白基因。其中10个基因上调表... 为发掘越橘中WBC型(White brown complex)ABC转运蛋白(ATP-binding cassette transporters)基因,研究其与次生代谢物质(Secondary metabolite)运输关系,从越橘果实转录组测序文库中筛选出21个编码WBC型转运蛋白基因。其中10个基因上调表达,11个基因下调表达,10个上调表达基因中有7个基因显著上调表达。以越橘‘北陆’(Northland)根、茎、叶芽、叶、花芽、花、绿果、粉果、蓝果、蓝果种子、蓝果果皮和蓝果果肉为试验材料,对7个显著上调表达基因进行实时荧光定量PCR(Real-time fluorescence quantitative PCR,q RT-PCR)分析,研究在越橘各个器官和果实发育不同阶段中表达模式。结果表明,越橘中7个WBC转运蛋白基因中有5个基因在果皮和果肉中的表达情况与转录组分析结果一致。越橘所有组织器官中均能检测到WBC型转运蛋白表达,但表达量不同。Unigene5067_All和Unigene27766_All在根中表达量最高,Unigene14517_All、Unigene27928_All和Unigene29820_All分别在茎、花和蓝果中表达量最高,Unigene34381_All和Unigene34438_All表达量从绿果、粉果到蓝果呈递增表达模式,与越橘中花色素苷累积呈现一致性,推测这两个WBC转运蛋白基因可能参与越橘次生代谢物运输。有助于阐明越橘中WBC转运蛋白生理生化功能。 展开更多
关键词 越橘 WBC型转运蛋白 荧光定量PCR 表达分析
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越橘谷胱甘肽巯基转移酶基因的克隆及表达 被引量:4
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作者 刘禹姗 陈丽 +3 位作者 邓宇 蔡莉 李亚东 孙海悦 《吉林农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期423-431,共9页
以越橘(Vaccinium L.)品种"北陆"为试材,采用反转录PCR克隆技术成功克隆越橘谷胱甘肽巯基转移酶基因c DNA全长序列,获得一个完整的编码区c DNA序列,长为690 bp,编码229个氨基酸,将其命名为VcGSTU1(Gen Bank登录号KT601064)。... 以越橘(Vaccinium L.)品种"北陆"为试材,采用反转录PCR克隆技术成功克隆越橘谷胱甘肽巯基转移酶基因c DNA全长序列,获得一个完整的编码区c DNA序列,长为690 bp,编码229个氨基酸,将其命名为VcGSTU1(Gen Bank登录号KT601064)。经与谷胱甘肽巯基转移酶家族其他成员的氨基酸序列比对和系统进化分析,初步确定VcGSTU1属于谷胱甘肽巯基转移酶Tau家族。生物信息学分析表明,该蛋白不稳定指数为28.80,属于稳定蛋白。预测该蛋白分子量为25.499 ku,等电位点为5.68。蛋白质序列同源比对发现其含有完整的GST-N-Tau和GST-C-Tau结构域。利用反转录PCR和实时荧光定量PCR(qRT-PCR)2种方法分析谷胱甘肽巯基转移酶的表达模式,该基因在越橘的根、茎、叶芽、叶、花芽、绿果、粉果、蓝果、蓝果果皮、蓝果种子中均有表达,且在蓝果种子中相对表达量最高。 展开更多
关键词 越橘 花青素 谷胱甘肽巯基转移酶 基因克隆 基因表达
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越橘类黄酮化合物转运相关基因MATE的克隆与表达分析 被引量:5
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作者 陈丽 耿金曼 +3 位作者 刘禹姗 盖钰卓 孙海悦 李亚东 《吉林农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期148-156,共9页
植物中多药和毒性化合物外排(MATE)转运蛋白参与类黄酮在液泡中积累的过程。以高丛越橘品种"北卫"为试验材料,应用染色体步移和cDNA末端快速克隆技术克隆MATE转运蛋白基因的cDNA全长序列,命名为VcMATE6,序列提交到GenBank,登... 植物中多药和毒性化合物外排(MATE)转运蛋白参与类黄酮在液泡中积累的过程。以高丛越橘品种"北卫"为试验材料,应用染色体步移和cDNA末端快速克隆技术克隆MATE转运蛋白基因的cDNA全长序列,命名为VcMATE6,序列提交到GenBank,登录号为KF875437。序列分析表明VcMATE6的cDNA全长1 557 bp,编码518个氨基酸,推测的蛋白相对分子质量为56.39 ku,理论等电点为6.12。多重序列比对显示VcMATE6与MATE型类黄酮转运蛋白有较高的同源性。聚类分析表明VcMATE6与MtMATE2、MlMTP77、AtTT12、VvAM1等一类植物典型的MATE型类黄酮转运蛋白聚为一类。VcMATE6具有2个MATE家族特有的Mat E结构域,TMHMM在线软件预测VcMATE6含有12个跨膜螺旋。实时荧光定量PCR分析表明,VcMATE6基因在越橘各器官和果实发育各阶段均有表达,但表达量存在差异,蓝果种子中表达量最高,极显著高于其他器官以及蓝果的果皮和果肉组织,其次为根,果实发育过程中VcMATE6表达量随果实成熟度表现出增加的趋势。 展开更多
关键词 越橘 多药和毒性化合物外排转运蛋白基因 克隆 表达分析 类黄酮
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越橘正反交后代部分性状的遗传倾向 被引量:7
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作者 刘月 刘海楠 +4 位作者 邓宇 刘禹姗 殷秀岩 孙海悦 李亚东 《吉林农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期35-41,共7页
以越橘品种"蓝丰""都克"及其正反交后代群体为试验材料,对叶片和果实性状进行调查分析,研究越橘的遗传倾向。结果表明:杂交后代叶形指数和叶面积呈变小的趋势,平均变异系数分别为7.92%和13.86%,平均遗传传递力分别... 以越橘品种"蓝丰""都克"及其正反交后代群体为试验材料,对叶片和果实性状进行调查分析,研究越橘的遗传倾向。结果表明:杂交后代叶形指数和叶面积呈变小的趋势,平均变异系数分别为7.92%和13.86%,平均遗传传递力分别为92.57%和61.15%;叶面积正交偏大遗传,遗传传递力为103.41%,超高亲率为30.77%;反交未出现超高亲植株。杂交后代果形指数有变大趋势,平均遗传传递力为103.68%,平均超高亲率为27.65%;单果重、可溶性固形物正反交遗传倾向不同,正交偏大遗传,反交偏小遗传。杂交后代叶片和果实性状均出现不同程度的变异。 展开更多
关键词 越橘 杂交后代 遗传倾向 叶片性状 果实性状
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浆果类果树EST-SSR标记的开发及应用
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作者 耿金曼 刘禹姗 +3 位作者 王静 盖钰卓 孙海悦 李亚东 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2015年第10期2395-2403,共9页
随着表达序列标签(expressed sequence tags,ESTs)信息的涌现,使得EST-SSR技术(expressed sequence tag-simple sequence repeat,EST-SSR)成为一项新型分子标记辅助育种方法广泛应用于植物遗传研究中,其不仅继承了SSR标记的特点,还具有... 随着表达序列标签(expressed sequence tags,ESTs)信息的涌现,使得EST-SSR技术(expressed sequence tag-simple sequence repeat,EST-SSR)成为一项新型分子标记辅助育种方法广泛应用于植物遗传研究中,其不仅继承了SSR标记的特点,还具有稳定标记、开发费用低、多态性高和物种间通用性好等优点。EST-SSRs来自于表达基因,能够直接或间接获得功能基因信息,进而有助于开发具备重要农艺性状的浆果类果树种质资源。本文根据近些年来浆果类果树EST-SSR标记的相关研究,从遗传图谱的构建、遗传多样性分析、品种鉴定和物种间通用性等方面进行综述,以期通过运用EST-SSR标记,发现浆果类果树新基因、培育新品种,鉴定亲缘关系,从而推动浆果类果树的育种进程。 展开更多
关键词 浆果类果树 ESTS EST-SSR标记 SSR 遗传图谱
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