Zmpste24^(-/-)小鼠骨髓间充质干细胞的增殖凋亡及其TRP通道的表达研究

目的:探讨Zmpste24^(-/-)小鼠骨髓间充质干细胞(BMMSCs)的增殖凋亡情况及瞬时性受体电位通道(TRP通道)表达水平与野生型(WT)小鼠的区别。方法:体外分离培养4月龄Zmpste24^(-/-)和WT小鼠的BMMSCs,经干细胞表面分子鉴定后,分别采用β-半乳糖苷酶试剂盒检测两种小鼠细胞的衰老情况;流式细胞仪检测小鼠细胞的增殖、凋亡情况;实时定量RT-PCR检测两种小鼠细胞的TRP通道表达水平;激光共聚焦显微镜检测两种小鼠的细胞内Ca2+浓度。结果:Zmpste24^(-/-)和WT小鼠的BMMSCs均阳性表达Sca-1,阴性表达CD34、CD45。Zmpste24^(-/-)小鼠BMMSCs的衰老细胞数目和凋亡水平明显高于WT小鼠(P<0.05),而其增殖能力则明显低于WT小鼠(P<0.05);TRPC1、TRPM4、TRPM8、TRPV1、TRPV2、TRPV3、TRPV5通道的表达水平均明显高于WT小鼠(P<0.05);胞内Ca^(2+)浓度明显高于WT小鼠(P<0.05)。结论:Zmpste24^(-/-)小鼠BMMSCs的增殖率降低、凋亡率升高可能与其TRP通道高表达、胞内钙离子浓度升高有关。

早衰小鼠骨髓间充质干细胞电压门控钙通道的表达检测

目的:研究早衰小鼠骨髓间充质干细胞(BMMSCs)的成骨分化特点以及电压门控钙通道的表达特点。方法:用micro-CT检测zmpste24-/-早衰小鼠和野生小鼠的骨量差异;分离培养两者的BMMSCs,并取第2代细胞分别检测其成骨能力以及胞内钙离子的浓度,采用RT-PCR方法检测两种小鼠BMMSCs中电压门控钙通道(10种亚型)的表达水平。结果:与野生型小鼠相比,zmpste24-/-早衰小鼠的骨量、其BMMSCs的成骨分化能力和胞内钙离子浓度均明显降低(P<0.05);RT-PCR检测结果显示,电压门控钙离子通道的10种亚型在两者BMMSCs中均有表达,其中Cav1.1、Cav1.2、Cav2.1和Cav2.2在早衰小鼠BMMSCs中的表达水平均明显低于野生小鼠组(P<0.05)。结论:在早衰过程中,电压门控钙离子通道可能参与了BMMSCs介导的骨质疏松。