羊踯躅联合石菖蒲治疗急性踝关节扭伤的临床观察

目的观察羊踯躅联合石菖蒲治疗踝关节扭伤的临床疗效。方法将232例急性踝关节扭伤的患者随机分为2组各116例,治疗组运用羊踯躅联合石菖蒲外敷治疗,对照组采用扶他林乳胶剂外敷治疗,治疗10天后比较2组的临床疗效。结果治疗组总有效率为93.1%,对照组为78.4%,治疗组疗效明显优于对照组(P<0.05)。结论羊踯躅联合石菖蒲外敷治疗急性踝关节扭伤为安全有效的方法。

大叶紫珠不同采收期总黄酮含量的研究

目的为确定大叶紫珠最佳的采收期和采收部位提供科学依据。方法将湖南会同县大叶紫珠种植基地不同时期采收的根、茎、叶,采用95%乙醇超声提取3次,每次1 h,采用紫外分光光度法测定总黄酮含量。结果大叶紫珠总黄酮含量的积累随着植株的生长,总黄酮含量也随之变化,根、茎中总黄酮含量逐步增加,叶中总黄酮含量逐渐减少;不同药用部位总黄酮含量有显著差别,依次为:叶>茎>根。结论该项研究根据有效成分含量动态变化的规律为确定大叶紫珠最佳采收期和采收部位提供了一定的实验依据。

羊踯躅含药血清对TNF-α诱导的类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞增殖及炎症因子分泌的影响

目的探究羊踯躅含药血清对肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)诱导的类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞(rheumatoid arthritis fibroblast-like synoviocytes,RA-FLS)增殖和炎症因子分泌的影响和作用机制,为临床治疗RA提供理论及实验依据。方法将细胞分为空白组、模型组、雷公藤多苷组、5%和10%空白血清组及5%和10%羊踯躅含药血清组。RA-FLS经TNF-α(10 ng/mL)处理24 h以构建RA细胞模型。CCK-8检测细胞增殖情况。采用ELISA检测炎症因子白细胞介素-1β(interleukin-1 beta,IL-1β)、白细胞介素-17A(interleukin-17A,IL-17A)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、白细胞介素-2(interleukin-2,IL-2)和γ干扰素(interferon-γ,IFN-γ)的含量。Western blot检测蛋白激酶B(protein kinase B,AKT1)、磷酸化AKT1(phosphorylated AKT1,p-AKT1)、原癌基因c-JUN、p-c-JUN、p65、p-p65、表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)蛋白表达水平。结果与未用羊踯躅含药血清处理的正常RA-FLS相比,用5%和10%羊踯躅含药血清处理的细胞增殖活性在48 h内没有明显的变化(P>0.05),而用20%和30%羊踯躅含药血清处理的细胞增殖活性明显降低(P<0.05)。与空白组相比,模型组的细胞增殖活性显著上升(P<0.05);与5%和10%空白血清组相比,5%和10%羊踯躅含药血清组的细胞增殖活性均显著降低(P<0.05)。与空白组相比,模型组的IL-1β、IL-17A、IL-6、IL-2和IFN-γ水平均明显升高(P<0.05);与5%和10%空白血清组相比,5%和10%羊踯躅含药血清组的IL-1β、IL-17A、IL-6、IL-2和IFN-γ水平明显下降(P<0.05)。与空白组相比,模型组的EGFR表达量以及AKT1、c-JUN和p65的磷酸化水平均明显升高(P<0.05);与5%和10%空白血清组相比,5%和10%羊踯躅含药血清组的EGFR表达量以及AKT1、c-JUN和p65的磷酸化水平显著降低(P<0.05)。此外,10%羊踯躅含药血清的效果比5%羊踯躅含药血清更为显著(P<0.05)。结论羊踯躅含药血清能抑制TNF-α诱导的RA-FLS增殖及促炎因子的分泌,其机制可能与调控EGFR、核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)、AKT和c-Jun N末端激酶(c-Jun N-terminal kinase,JNK)通路有关。

不同镉污染程度地区药用植物镉低积累品种大田筛选

目的:在不同重金属镉污染地区筛选出镉低积累药用植物品种。方法:采用大田筛选实验及方差分析方法。结果:重度污染地区车前、夏枯草、薏苡、决明、白扁豆;中轻度污染地区薄荷、车前、夏枯草、桔梗、薏苡、黑芝麻、白扁豆、决明中镉含量≤0.3 mg/kg,符合《药用植物及制剂进出口绿色行业标准》。结论:可以在镉轻、重度污染的地区种植合适的镉低积累的药用植物品种代替水稻等镉高积累的粮食作物,生产出合格的中药材,使镉污染地区农田得到更好地利用。

基于TLR4/MyD88/NF-κB信号轴探讨闹羊花毒素Ⅲ对类风湿关节炎的影响

目的本研究旨在探讨闹羊花毒素Ⅲ调控TLR4、MyD88和NF-κB的机制,以及闹羊花毒素Ⅲ对类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)的影响。方法RA大鼠模型通过Ⅱ型胶原诱导构建。随机将Wistar大鼠分成6组(n=8):假手术组(Sham组)、RA模型组(Model组)、阳性药物雷公藤组[TWG组,50 mg·(kg·d)^(-1)]、闹羊花毒素Ⅲ低剂量组[R-ⅢLo组,0.06 mg·(kg·d)^(-1)]、中剂量[R-ⅢMi组,0.12 mg·(kg·d)^(-1)]和高剂量组[R-ⅢHi组,0.24 mg·(kg·d)^(-1)]。测定各组大鼠的关节炎指数(arthritis index,AI);采用HE染色、ELISA、Western blot和RT-qPCR检测闹羊花毒素Ⅲ对TLR4/MyD88/NF-κB信号轴及RA的影响。结果与Model组比较,闹羊花毒素Ⅲ处理显著降低了RA大鼠的AI评分(P<0.05)。闹羊花毒素Ⅲ对滑膜组织的恶性增生和炎症细胞浸润有明显的抑制作用。与Model组比,闹羊花毒素Ⅲ各剂量组的TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-17、VEGF、MMP-2、MMP-9、TLR4、MyD88、p-NF-κB/NF-κB因子的水平降低且呈浓度依赖性(P<0.05)。与TWG组比,R-ⅢLo和R-ⅢMi组的。TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-17、VEGF、MMP-2、MMP-9、TLR4、MyD88、p-NF-κB/NF-κB因子的水平升高(P<0.05),而R-ⅢHi组无显著差异(P>0.05)。结论闹羊花毒素Ⅲ可以通过下调TLR4、MyD88、NF-κB因子的表达水平来改善RA。本研究为利用闹羊花毒素Ⅲ治疗RA提供了一定的实验基础。

药用植物学大围山野外见习教学实践与探讨

药用植物学是中药资源与开发专业、中药学及其相关专业的专业基础课,该课程集理论、实验和实践教学为一体。其实践课作为特殊而必要的教学环节一直备受重视,能够扩大学生的知识视野,激发其求知兴趣,提高学生的观察、思考及野外独立工作的能力。本文从实习时间、师资力量、教学理念和教学手段等方面对当前药用植物学野外见习教学环节中存在的主要问题进行了分析,并对相应的改革措施进行探讨,旨在提高药用植物学教学效果。

不同产地人工栽培黄花石蒜不同器官中加兰他敏含量测定

目的探索人工栽培黄花石蒜中加兰他敏的最佳采收器官及最适产地,寻找高含量的药材原料。方法采用HPLC法测定人工栽培黄花石蒜不同器官及不同产地中加兰他敏含量。结果采用SPSS 17.0软件Corrected Model(模型检验)进行统计学分析表明:黄花石蒜不同器官加兰他敏的含量差别具有显著统计学意义(P<0.001),其含量由高到低各产地均依次为:花>根>花葶>鳞茎,其3个产地加兰他敏平均含量依次为花(0.135%)>根(0.080%)>花葶(0.020%)>鳞茎(0.017%);不同产地黄花石蒜中加兰他敏含量差别无统计学意义(P>0.05)。结论黄花石蒜花中含量远远高于鳞茎中含量,每年都可采收,花可作为提取加兰他敏的药材原料,代替传统上使用的一次性采挖的鳞茎;3个产地人工栽培黄花石蒜中加兰他敏含量有细微差别,若以花作为药材原料,则大围山可作为最适种植区。

镉低积累药用植物盆栽及大田筛选试验

目的比较不同植物对重金属镉积累能力差异,筛选出镉低积累药用植物种类。方法以夏枯草、益母草、薄荷为供试材料,通过盆栽和大田试验,采用原子吸收光谱法测定植物中镉的含量。结果三种植物积累镉的能力存在差异,益母草>薄荷>夏枯草。益母草在镉污染土壤中其地上部分镉含量随土壤镉浓度增高而增高,而生长不受影响,属于抗性植物。在镉胁迫下,薄荷、夏枯草生长受到抑制,植物中镉含量较低,且随土壤镉浓度增加植物中镉含量变化较小,属于镉低积累植物。结论益母草为镉高积累植物,且生长不受影响,可以作为富集植物治理镉污染;薄荷中镉主要积累在地下部分,而其以地上部分入药,夏枯草为镉低积累植物,两者均为可在镉污染地区种植的药用植物。

超临界CO_2流体萃取法与水蒸气蒸馏法提取灰毡毛忍冬中挥发油的GC-MS比较研究

目的比较水蒸气蒸馏法(Steam Distillation简称SD法)和超临界CO2流体萃取法(SFE-CO2法)提取灰毡毛忍冬中挥发油的含量及成分差异。方法采用GC-MS法对提取物进行分析。结果 SD法提取的挥发油含量远远低于SFE-CO2法所提取。其中SD法提取物的相对分子量基本在100～300,而SFE-CO2法萃取物的相对分子量范围为152～618。结论两种提取方法提取的挥发油在含量和成分上有一定的差别。

人工栽培黄花石蒜最适遮光度和最佳采收加工方法的研究

目的:确定人工栽培黄花石蒜最适遮光度及最佳采收加工方法。方法:采用HPLC法对不同遮光处理的和不同采收加工方法的人工栽培的黄花石蒜花中加兰他敏含量进行比较分析,从而确定其最适遮光度和最佳采收加工方法。结果:不同遮光处理的人工种植黄花石蒜花中加兰他敏含量分别为:20%遮光0.110%,40%遮光0.138%,60%遮光0.144%,80%遮光0.122%;不同采收期的分别为:花蕾期0.104%,始开期0.117%,盛开期0.128%,枯萎期0.139%;不同加工方法处理的分别为:晒干0.086%、烘干0.115%、阴干0.118%。结论:生产上人工种植黄花石蒜花期以60%遮光度为最适;盛花期及其后的枯萎期是人工种植的最佳采收期,以烘干方法干燥为最佳。

HPLC法测定广升麻植株中不同部位蜕皮甾酮的含量

目的：建立测定广升麻植株中不同部位蜕皮甾酮含量的方法。方法：采用高效液相色谱法。色谱柱为ZORBAX Eclipse XDB-C18,流动相为甲醇-水（46∶54,V/V）,流速为1.0 ml/min,检测波长为248 nm,柱温为30℃,进样量为10μl。比较广升麻植株不同部位中蜕皮甾酮的含量。结果：蜕皮甾酮的检测进样量线性范围为0.12-1.21μg;精密度、稳定性、重复性试验的RSD〈1.5%;加样回收率为98.4%-101.9%,RSD=1.64（n=6）。广升麻植株根中的蜕皮甾酮含量最高,其次是块茎,茎和叶的含量较低;种子中则不含蜕皮甾酮成分。结论：该方法简便快速、准确性和重复性好,适用于测定广升麻植株中不同部位蜕皮甾酮的含量;且可以将广升麻的药用部位由原来的根扩展为根、花、块茎以及块茎上的芽。

百合种质资源遗传多样性及亲缘关系的RAPD分析

以百合新鲜鳞叶为材料,利用RAPD分子标记技术对16份不同生态型的百合种质的遗传多样性和亲缘关系进行了分析。研究结果表明,从120条随机引物中筛选出35条有效引物,共得到769个扩增位点,其中628个位点具有多态性,占81.7%。UPGMA聚类分析结果表明,16份百合种质在阈值为0.9407处分为2个聚类群,即百合科两个不同属的植物:百合属和大百合属;阈值为0.5790处,百合属被分为3个不同的种:百合、卷丹和细叶百合。聚类结果和亲缘关系分析表明不同供试百合之间的遗传多样性较高,亲缘关系较远,且各种质遗传距离与地理距离具有一定的相关性。

不同采收期菝葜中黄酮类成分含量动态变化的研究

目的以黄酮类含量为指标，确定菝葜根茎药材的最佳采收期。方法以芦丁为对照品，采用紫外一可见分光光度法测定不同采收期菝葜根茎中总黄酮含量，并采用HPLC测定其中落新妇苷和黄杞苷的含量。结果11月中旬以前总黄酮含量明显低于11月中旬以后；10～11月初随着生育期延长菝葜根茎中总黄酮含量略有下降，11月份以后菝葜根茎中总黄酮含量不断积累，至12月底菝葜进入休眠期后菝葜根茎中总黄酮的含量最高．达3．0％±0．1％。菝葜根茎药材中落新妇苷和黄杞苷的总含量大于0．10％，符合2010版《中华人民共和国药典》的规定，在12月底含量达到最大值。结论菝葜药材的最佳采收期应为菝葜地上部位落叶枯萎，根茎进入越冬休眠期后采收。

中药资源与开发专业实践教学模式探析——以湖南中医药大学为例

中药资源是中医治病、中药制药、中医药产业健康发展的物质基础,是国家的重要战略资源。近年来,随着人类医疗和保健产业的快速发展及世界范围内＂回归自然＂热潮的兴起,现代医药业、美容和保健品等行业对中药的需求与日俱增,过度采挖或掠夺式开发导致资源逐年萎缩与资源有限性之间的矛盾日益加剧。

牛膝总皂苷对IL-1β诱导髓核细胞的凋亡及炎性损伤的影响

目的通过观察髓核细胞(nucleus pulposus cell,NPC)的凋亡、炎症及细胞外基质(extracellular matrix,ECM)代谢研究不同浓度牛膝总皂苷(achyranthes bidentata saponin,ABS)对白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)诱导人源NPC损伤的保护作用。方法通过IL-1β诱导建立NPC退变模型,随机将细胞分为正常组、模型组(10 ng/mL IL-1β)、ABS低剂量组(10 ng/mL IL-1β+3μg/mL ABS)、ABS中剂量组(10 ng/mL IL-1β+10μg/mL ABS)及ABS高剂量组(10 ng/mL IL-1β+30μg/mL ABS),干预24 h。CCK-8法检测细胞活力,采用Tunel法和流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot检测B细胞淋巴瘤-2相关X蛋白(B-cell lymphoma-2-associated X protein,Bax)、天冬氨酸蛋白水解酶3(cysteinyl aspartate specific proteinase-3,Caspase-3)、B细胞淋巴瘤-xl(B-cell lymphoma-xl,Bcl-xl)、环氧合酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)、基质金属蛋白酶-3(matrix metalloproteinase-3,MMP-3)和血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶-5(recombinant a disintegrin and metalloproteinase with thrombospondin-5,ADAMTS-5)蛋白表达情况。结果与正常组比较,模型组NPC活力显著下降(P<0.01),凋亡率增加(P<0.01),Bax、Caspase-3、COX-2、MMP-3和ADAMTS-5蛋白表达升高(P<0.05),Bcl-xl蛋白表达降低(P<0.05);与模型组比较,不同浓度的ABS处理后,NPC活力显著上升(P<0.05),凋亡率减少(P<0.05),Bax、Caspase-3、COX-2、MMP-3和ADAMTS-5蛋白表达降低(P<0.05),Bcl-xl蛋白表达升高(P<0.05)。结论ABS可以通过抑制由IL-1β诱导引起的NPC凋亡、炎症反应、ECM降解,促进细胞增殖和活性,对NPC产生保护作用,其机制可能与抑制Bax、Caspase-3、ADAMTS-5、MMP-3及COX-2表达,促进Bcl-xl表达相关。

灰毡毛忍冬与忍冬HQT2基因的克隆及表达分析

目的分别克隆灰毡毛忍冬与忍冬HQT2基因全长序列,并进行生物信息学和表达量分析,以揭示HQT2在灰毡毛忍冬与忍冬绿原酸生物合成中的可能功能。方法多糖多酚试剂盒法分别提取灰毡毛忍冬与忍冬花总RNA,通过RT-PCR和RACE技术克隆HQT2基因的全长c DNA序列,运用相关软件对该基因序列进行生物信息学分析;利用实时荧光定量PCR技术(qRT-PCR)分别测定灰毡毛忍冬与忍冬茎、叶及不同花期花中相关基因的相对表达量;采用HPLC测定绿原酸含量并结合表达量做相关性分析。结果克隆得到LmHQT2(MH196564)和LjHQT2(MK294639),其开放阅读框长度均为1296 bp,编码431个氨基酸,生物信息学分析预测为亲水性蛋白,可能定位于细胞质中,属于氯霉素乙酰转移酶样结构域超家族;qRT-PCR结果显示,HQT2基因具有组织特异性,在灰毡毛忍冬与忍冬茎、叶及不同花期花器官中表达存在差异;绿原酸含量与基因相对表达量之间呈现一定的相关性。结论本研究成功克隆了灰毡毛忍冬与忍冬HQT2基因并探索其在不同器官中的表达模式,推测HQT2基因在灰毡毛忍冬与忍冬的绿原酸生物合成途径中发挥不同功能,为进一步研究该基因的功能及探究灰毡毛忍冬和忍冬绿原酸生物合成调节机制提供了研究基础。

“以学生为中心”的理论维度与实践模式——以药用植物学课程的线上线下混合式金课建设为例

探索线上线下混合式教学模式,就是把“以学生为中心”的理念贯穿始终,从课程目标、教学文案设计与撰写、教学资源运用、教学过程设计、评价体系建构等方面,做到在目标设置中驱动学生、在教案撰写中理解学生、在资源共享中激发学生、在教学互动中引领学生、在评价激励中完善学生。药用植物学课程内容理论和实践兼备,线上线下融合互补,“以学生为中心”贯穿每个环节,能有效促进教学改革,提高学生自主学习能力、促进个性化学习,达到了提升教学效果、提高人才培养质量的目的。

混合式教学模式背景下药用植物学课程改革探索

药用植物学是中药学、药学类专业重要的基础课,其实践性强,理论知识枯燥难记,学生学习主动性不强,学习效果差。为调动学生学习积极性,充分发挥其在学习过程中的主体作用,基于"互联网+"背景下,利用线上平台和优质的教学资源创造一个新型混合式教学模式,借助思维导图促进学生知识结构化自主构建,从而提高教学质量。

思维导图在药用植物保护学教学中的应用

药用植物保护学是中药资源与开发专业的一门核心专业基础课,课程知识点较分散,知识点的系统比较和纵横联系是该课程学习的关键。为应对信息时代给教学带来的变化,将思维导图引入药用植物保护学教学过程中,旨在培养学生自主整合知识并构建知识体系,从而提高学生自主创新能力,探索出一种更简单、便捷、高效的教学模式。

珍稀濒危土家族药胡豆莲的人工繁殖研究

目的为了保护珍稀濒危的土家族药胡豆莲药材资源,开展胡豆莲的人工繁殖研究。方法采用种子繁育和扦插繁育进行胡豆莲的人工育苗研究,运用人工配制基质模拟野生环境条件栽培胡豆莲,研究不同基质配比对胡豆莲栽培成活率的影响。结果使用刚成熟的胡豆莲种子进行人工育苗,种子发芽率可达100%。不同浓度NAA和IBA都能显著促进胡豆莲的扦插生根和提高扦插的成活率,其中效果最好的处理为50μg/L NAA+50μg/L IBA组合,扦插成活率高达86.7%。采用配方为椰糠:黄壤:河砂:有机肥=5:3:1:0.5(体积比)的基质栽培效果最好,胡豆莲苗一年成活率和二年成活率较高,均为93.3%。结论胡豆莲的人工繁殖可以较好地解决胡豆莲繁殖力低下及药材资源匮乏问题,有利于保护珍稀濒危的野生胡豆莲资源。