小鼠卵母细胞减数分裂过程中活化Pak1的表达及其与染色体分离的相关性

目的研究活化的Pak1在小鼠卵母细胞减数分裂进程中的表达、亚细胞定位及其与染色体分离的相关性。方法用Western blot方法半定量分析活化的Pak1(^(Ser204)位点磷酸化,pPak1^(Ser204))在小鼠卵母细胞减数分裂各个时期的蛋白表达量;用免疫荧光染色法分析减数分裂进程中pPak1^(Ser204)的亚细胞定位模式及其与纺锤体和微管组织中心(MTOC)的时空相关性。结果 pPak1^(Ser204)在小鼠卵母细胞减数分裂重启时(GVBD)开始表达,其表达量随减数分裂进程逐渐升高,在第一次减数分裂中期(MⅠ)时达到峰值并持续保持至第二次减数分裂中期(MⅡ)。在第一次减数分裂前中期(pro-MⅠ)、MⅠ和MⅡ期,pPak1^(Ser204)与MTOC核心蛋白pericentrin和γ-tubulin共同定位于纺锤体两极,pPak1^(Ser204)同时存在于染色体上;在第一次减数分裂后期(AI)到末期(TelI)进程中pPak1^(Ser204)离开MTOC和染色体,聚集在收缩环部位。结论 pPak1^(Ser204)在卵母细胞减数分裂恢复时开始表达,是一种MTOC相关蛋白,可能通过参与纺锤体结构的形成和维持而调控染色体的分离。