跨模态语义时空动态交互情感分析研究

针对传统情感分析中存在的模态间交互性差、时空特征融合度低的问题,建立了一种跨模态的语义时空动态交互网络。通过引入双向长短期记忆网络挖掘各模态的时间序列特征,加入自注意力机制强化模态内特征的权重赋值,将自动筛选出的特征矩阵送入图卷积神经网络进行语义交互。然后以时间戳为基础进行特征聚合,计算聚合层的相关系数,获得融合后的联合特征,实现跨模态空间交互,最终完成情感极性的分类与预测。使用公开数据集对所提出的模型进行评估验证,实验结果表明,多模态时间序列提取和跨模态语义空间交互机制可以实现模态内和模态间特征的全动态融合,有效地提升了情感分类的准确率和F1值,在CMU-MOSEI数据集上分别提高了1.7%~13.5%和2.1%~14.0%,表现出良好的健壮性和先进性。

信息化教学手段应用于中医药院校《诊断学》教学的研究与实践

信息化教学手段是基于信息技术,应用现代化教学方法并充分发挥了网络的优势,同时结合相关学科特点和教学思想,将信息化的教育模式融入教学实施过程中的一种教学手段,具有教学方式灵活、可利用碎片化时间的特点。本研究针对当前《诊断学》教学中在的一些难点问题,以现代教学理念为指导,提出改革思路,在教学中应用信息技术手段,将教育类APP应用于中医药院校的《诊断学》教学,在基于当前素质教育和课程改革需要的基础上,深层次挖掘《诊断学》教学模式的改革与创新思路,为全面提高教育教学质量,培养复合型创新型人才提供重要参考。

黄连温胆汤含药血清改善小鼠脂肪细胞胰岛素抵抗的机制探讨

目的探讨黄连温胆汤含药血清对小鼠脂肪细胞胰岛素抵抗(IR)的改善作用及其分子机制。方法取SD大鼠各15只,分别灌服黄连温胆汤、等体积蒸馏水5 d后,腹主动脉采血,制备黄连温胆汤含药血清及空白血清。经典鸡尾酒方法使小鼠胚胎成纤维细胞3T3-L1分化为脂肪细胞,再应用地塞米松刺激使其发生IR制备IR模型,随机分为模型组、黄连温胆汤组和二甲双胍组。另取未进行IR造模的脂肪细胞作为正常组。各组细胞均培养于DMEM高糖+5%FBS培养基,模型组、黄连温胆汤组和二甲双胍组分别加入8%空白血清、4%含药血清+4%空白血清、盐酸二甲双胍溶液1 mmol/L,正常组加入8%空白血清,均培养36 h。采用Real time q PCR法检测磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)-葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)信号通路相关基因胰岛素受体底物1(IRS1)、PI3K-p85α亚基、GLUT4 mRNA表达。采用Western blotting法检测IRS1、p-IRS1(Tyr612)、PI3K-p85α、p-PI3K-p85α(Tyr607)、GLUT4蛋白表达。结果模型组葡萄糖消耗量低于正常组,黄连温胆汤组葡萄糖消耗量高于模型组(P均<0.05)。与正常组比较,模型组GLUT4 mRNA表达下调,黄连温胆汤组和二甲双胍组GLUT4 mRNA表达上调(P均<0.05);与模型组比较,黄连温胆汤组和二甲双胍组GLUT4 mRNA表达上调(P均<0.01)。与正常组比较,模型组p-IRS1(Tyr612)/IRS1、p-PI3K-p85α(Tyr607)/PI3K-p85α、GLUT4蛋白表达下调(P均<0.05),黄连温胆汤组和二甲双胍组蛋白表达均较模型组上调(P均<0.05)。结论黄连温胆汤含药血清可以改善鼠脂肪细胞的IR,其机制为可能通过PI3K-GLUT4信号传导途径发挥作用。

甘蓝型油菜高/低含油量近等基因系构建及鉴定

为了探讨油菜种子中脂肪酸代谢调控的机制,发现有价值的高油基因,为高油育种研究提供基础材料,构建了甘蓝型油菜高/低含油量近等基因系。以高油品系NJ9为基础试材,连续自交2代后,选择农艺性状基本一致、含油量不同的姐妹系30份,进行连续自交和含油量的选择,最终获得9份拟近等基因系材料。以来源于芸薹属DB公共数据库的156对SSR引物对9份拟近等基因系株系材料进行扩增,筛选出32对引物用于近等性分析。基于32对SSR引物PCR扩增结果,经过遗传相似性系数估算以及聚类分析,结果显示,9份拟近等基因系试材遗传相似性系数均为0.85-0.94,其中,YC13-554和YC13-559的遗传相似性系数最大,为0.94,确定其为近等基因系。成熟期农艺性状调查结果,进一步确定YC13-554和YC13-559为高/低含油量近等基因系。结果表明,连续自交和定向选择的方法可用于构建近等基因系,丰富了近等基因系的来源。

干细胞治疗生殖系统疾病的研究进展

干细胞可定向分化为不同胚层的功能细胞,自体移植可修复受损组织、改善组织器官功能。目前在各系统疾病尤其是退行性疾病和器官功能衰竭的治疗中备受重视,被认为是解决这类疾病的新希望。生殖系统疾病多因功能障碍或结构受损导致生殖能力减弱,不同来源的干细胞可通过多种机制改善生殖器官功能,恢复生育能力,已成为目前的研究热点。现就生殖系统疾病的干细胞治疗作用及机制研究进展做一简要综述。

基于改进云模型的装配式建筑吊装施工安全风险评价

根据装配式建筑吊装施工安全风险因素的模糊性和随机性,采用G1法和熵权法分别确定构建的装配式建筑吊装施工安全风险评价指标的主客观权重,引入博弈论理论协调主客观权重确定综合最优权重;利用云模型评价装配式建筑吊装施工安全,对相对贴近度作出改进,提出综合相对贴近度的概念,以其最小值对应的风险等级为项目吊装施工风险等级。对青岛某装配式建筑进行实证分析,结果表明,该项目吊装施工风险等级为较低风险,由云数字特征数值可知应重点把控安全措施费投入比、吊装现场警示标识完善度、现场人员安全意识水平等指标风险,验证了该模型的可行性。

靶向ADAM17基因siRNA对前列腺癌PC-3细胞增殖能力的影响

目的:探讨靶向抑制ADAM17基因对雄激素非信赖性前列腺癌PC-3细胞增殖的影响。方法:应用ADAM17 siRNA转染PC-3细胞后,通过RT-PCR、Western印迹方法分别检测ADAM17 mRNA和蛋白表达变化;MTT、BrdU掺入法检测下调ADAM17对PC-3细胞的增殖和DNA合成能力的影响;流式细胞术检测ADAM17 siR-NA对PC-3细胞细胞周期的影响;Western印迹检测下调ADAM17对PC-3细胞增殖相关基因表达的影响。结果:两对ADAM17 siRNAs均可有效地降低PC-3细胞ADAM17 mRNA和蛋白的表达;MTT结果显示与对照组(0.80±0.51)相比,两对ADAM17 siRNAs均可显著抑制细胞的生长(0.43±0.57、0.44±0.64,P均<0.05);Br-dU掺入实验显示与对照组(0.79±0.72)相比,ADAM17 siRNAs均能显著下调DNA的合成能力(0.48±0.43、0.54±0.59,P<0.05);流式细胞术结果显示,与对照组(41.38±1.53)%相比,ADAM17 siRNAs可显著增加G1期细胞数量[(61.83±2.41)%、(59.78±1.92)%,P均<0.05]、降低S期细胞数量[从(33.51±1.47)%减少到(23.64±2.56)%、(25.24±1.86)%,P均<0.05],同时伴随着cyclin D1蛋白的表达下降而p21蛋白的表达升高。结论:ADAM17 siRNA可以通过下调cyclin D1、上调p21的表达而抑制前列腺癌PC-3细胞增殖,ADAM17可能成为前列腺癌基因治疗的靶点。

淫羊藿苷对哮喘大鼠醌氧化还原酶1及谷胱甘肽还原酶表达及氧化应激的影响

目的探讨淫羊藿苷对哮喘大鼠醌氧化还原酶1(NQO1)及谷胱甘肽还原酶(GR)表达及氧化应激的影响。方法选取40只健康雌性Wistar大鼠,随机将其分为正常组、模型组、布地奈德组及淫羊藿苷组,每组10只。除正常组外,其余组大鼠采用卵蛋白溶液造成慢性大鼠哮喘模型。实验期间正常组及模型组每天灌胃生理盐水,淫羊藿苷组每天灌胃淫羊藿苷120 mL/kg,布地奈德组致敏2周后在卵蛋白溶液雾化吸入后给予布地奈德吸入。于末次激发后24 h内处死各组(正常组同期处死)大鼠并取出右肺组织,以ELISA方法检测各组氧化因子活性氧(ROS)表达水平,采用RT-PCR法检测各组GR mRNA表达水平,采用Westernblot方法检测各组NQO1蛋白表达水平。结果模型组大鼠肺组织中ROS表达水平明显高于正常组(P<0.05),GR mRNA及NQO1蛋白表达水平均明显低于正常组(P均<0.05)。淫羊藿苷组及布地奈德组大鼠肺组织中ROS表达水平均明显低于模型组(P均<0.05),GR mRNA及NQO1蛋白表达水平均明显高于模型组(P均<0.05),淫羊藿苷组与布地奈德组各指标比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。结论淫羊藿苷可上调哮喘大鼠GR mRNA及NQO1蛋白的表达,减轻哮喘大鼠氧化应激反应。

ADAM17对前列腺癌细胞TGF-α、EGFR的表达影响

目的探讨前列腺癌DU145细胞中解聚素—金属蛋白酶17(ADAM17)与转化生长因子α(TGF-α)活化的关系。方法培养前列腺癌DU145细胞,将细胞分为对照组、NC组、ADAM17-siRNA组、联合组。ADAM17-siRNA组、联合组均转染ADAM17 siRNA,NC组转染非ADAM17相关的阴性序列siRNA,对照组不转染。联合组转染72 h后加入TGF-α20μg/L干预。待NC组、ADAM17-siRNA组转染72 h后,收集对照组、NC组、ADAM17-siRNA组细胞,采用Western blot法检测ADAM17、表皮生长因子受体(EGFR)、磷酸化EGFR(p EGFR)蛋白表达,采用ELISA法检测TGF-α蛋白水平。取对照组、ADAM17-siRNA组及联合组TGF-α干预15 min后的上清液,采用Western blot法检测EGFR、p EGFR蛋白表达。结果ADAM17-siRNA组ADAM17、p EGFR、TGF-α蛋白均低于对照组及NC组(P均<0.05)。对照组、NC组、ADAM17-siRNA组间EGFR表达差异无统计学意义(P均>0.05)。联合组p EGFR蛋白表达高于对照组及ADAM17-siRNA组(P均<0.05)。对照组、ADAM17-siRNA组、联合组间EGFR蛋白表达差异无统计学意义(P均>0.05)。结论前列腺癌DU145细胞中ADAM17的表达与TGF-α及EGFR有关,ADAM17可能通过活化TGF-α进而激活p EGFR表达。

针刺治疗不安腿综合征的临床效果观察

目的评价针刺治疗不安腿综合征（RLS）的临床效果。方法选取2012年7月至2015年JO月于黑龙江中医药大学附属第一、第二医院及哈尔滨现代中医药研究所就诊的54例RLS患者作为研究对象。按照随机数字表法分为观察组（28例）及对照组（26例），观察组头针施以“经颅重复刺激”足运感区，常规针刺安眠、足i里、阳陵泉、三阴交、太冲治疗；对照组给予美多芭（左旋多巴＋苄丝肼）75mg／次，1次／d，睡前15服；2组均治疗3周。评价治疗3周后2组临床疗效差异。结果观察组治愈16例，显效6例，好转4例，无效2例，总有效率为92．9％（26／28）；对照组治愈8例，显效5例，好转6例，无效7例，总有效率为73．1％（19／26）。观察组总有效率高于对照组，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论针刺治疗RLS临床效果明显、总有效率高，优于口服美多芭。

补肺益肾方对慢性阻塞性肺疾病稳定期患者生活质量的影响

目的观察补肺益肾方对慢性阻塞性肺疾病稳定期患者生活质量的影响。方法将80例患者按随机数字表法分为治疗组和对照组各40例,治疗组给予补肺益肾方治疗,对照组给予金水宝胶囊治疗,疗程3个月。观察两组患者临床疗效及治疗前后中医证候评分、慢性阻塞性肺疾病评估、测试问卷(CAT)评分及6 min步行距离的变化。结果连续治疗3个月后,治疗组在临床疗效、中医证候评分、CAT评分方面均显著优于对照组(P<0.05)。治疗后两组患者6 min步行距离均有所上升(P<0.05),组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论补肺益肾方能够改善慢性阻塞性肺疾病稳定期患者的生活质量。

降钙素基因相关肽衍生物克隆表达与活性鉴定

目的利用基因工程方法获得降钙素基因相关肽(CGRP)的衍生物(CGRP-VY),并初步鉴定其生物学活性。方法以pETC-GRP重组质粒为模板,用PCR方法扩增编码CGRP-VY的基因片段,将该基因片段定向克隆到pET-32 a(+)载体上,构建pETC-GRP-VY重组质粒,转化E-.coli JM109菌株,经扩增提取重组质粒,酶切和测序鉴定;将鉴定正确的重组质粒pETC-GRP-VY转化E.coli BL21 trxB(DE3)pLysS菌株,经IPTG诱导后,收集并裂解菌体,SDS-PAGE电泳检测蛋白的表达;通过粗提物扩张蟾蜍肠系膜微循环血管实验,初步鉴定CGRP-VY扩张血管的活性,并与重组CGRP进行活性比较。结果获得了含有CGRP成熟肽编码基因序列(111 bp)及缬氨酸和亮氨酸的密码子序列(6 bp)的重组质粒pETC-GRP-VY,符合预期结果;经诱导后在E.coli中表达出21.2kD的融合蛋白,初步证明其粗提物具有扩张血管的功能。结论成功获得具有生物学活性的融合蛋白CGRP衍生物(CGRP-VY),为进一步进行其降血压功能研究奠定了实验基础。

黄连温胆汤含药血清干预IR-3T3-L1细胞的最佳浓度与时间筛选

目的:通过建立胰岛素抵抗3T3-L1脂肪细胞模型,筛选黄连温胆汤含药血清最佳浓度和最佳作用时间。方法:制备黄连温胆汤含药血清及空白血清,诱导分化3T3-L1脂肪细胞,应用地塞米松制备胰岛素抵抗3T3-L1脂肪细胞模型,随机分为5组并给予相应处理干预12 h:模型组(8%空白血清)、中药高剂量组(8%含药血清)、中药中剂量组(4%含药血清)、中药低剂量组(2%含药血清)、二甲双胍组(1 mmol/L二甲双胍溶液),另外选用分化成熟的3T3-L1细胞作为正常组(8%空白血清)。CCK-8法测定细胞活力,葡萄糖氧化酶法测定葡萄糖消耗量,ELISA法检测葡萄糖氧化酶含量;同样方法测定每组干预24 h和36 h各指标。结果:干预12 h、24 h时,中药高、中、低剂量组细胞活力相当,给药干预12 h,模型组葡萄糖消耗量明显低于其余5组(P<0.01),给药干预24 h,各组葡萄糖消耗量较12 h增高,但中药低剂量组与模型组无差异(P>0.05),余各组葡萄糖消耗量仍高于模型组(P<0.05);干预36 h时,中药高、低剂量组细胞活力较中药中剂量组有下降趋势,仅中药中剂量组和二甲双胍组葡萄糖消耗量较模型组升高(P<0.05),模型组培养基中GOD浓度低于中药中剂量组(P<0.05)。结论:黄连温胆汤含药血清无细胞毒性,其调控IR-3T3-L1脂肪细胞的最佳浓度是含药血清占培养体系的4%,最佳作用时间为36 h。

新媒体技术在中医院校《诊断学》教学中的应用

结合"诊断学"教学现状,进行翻转课堂的实践研究。通过构建新媒体教学平台为翻转课堂提供了视频资源和交流平台。新媒体资源的设计考虑了学习者对碎片化时间的利用,结合课程和新媒体教学平台特点构建了翻转课堂的教学模型。结合校内本科教学环节进行了翻转课堂的实践,实现了教学效果的改善和教育教学的优化。本文从中医院校课程特色出发,以提高教学质量和培养学生临床综合应用能力为目标,探析新媒体技术在诊断学教学中的应用。

降钙素基因相关肽衍生物的优化表达及纯化

目的优化重组降钙素基因相关肽衍生物(CGRP-VY)蛋白的表达体系,并利用亲和层析获得高纯度的重组蛋白。方法在前期研究的基础上,将构建的pET-32a(+)-rhCGRP-VY在大肠埃希菌中表达,分别对时间、温度和IPTG的浓度进行优化。采用Ni-NTA亲和层析柱分离纯化可溶性蛋白,YLN凝胶影像分析系统和Bradford法检测纯化蛋白的纯度与含量。结果重组蛋白的最佳表达条件为诱导时间4h、诱导温度37℃、IPTG浓度0.75mmol/L,重组蛋白的最高表达量占菌体总蛋白的70%～80%,高效表达的CGRP-VY融合蛋白大部分可溶,纯化后蛋白纯度可达90%以上,蛋白浓度约为0.09mg/ml。结论成功优化了蛋白表达条件,并用亲和层析法纯化出大量可溶性TrxA-rhCGRP-VY。

凋亡相关基因PDCD5对前列腺癌细胞PC-3M-1E8促凋亡作用的研究

目的:观察外源性PDCD5对人雄激素非依赖性前列腺癌细胞PC-3M-1E8的促凋亡作用。方法:扩增重组质粒PCI-neo-PDCD5,利用脂质体介导将其瞬时转染前列腺癌细胞PC-3M-1E8,RT-PCR检测转染后表达情况;撤除血清培养16h后,通过四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测细胞存活率,原位末端标记法(TUNEL)检测细胞凋亡指数,透射电子显微镜观察细胞形态。结果:MTT结果显示转染重组质粒组细胞较转染空载体和对照组细胞生长速度明显减慢,存活细胞明显减少(P<0.001);通过TUNEL与透射电镜观察,发现转染组细胞凋亡程度和数量明显增加,凋亡指数较对照组明显增高(P<0.001)。结论:PDCD5在撤出血清因素的诱导作用下能显著抑制前列腺癌细胞PC-3M-1E8在体外的生长,明显促进其凋亡。

加味黄连温胆汤治疗痰热互结型代谢综合征合并H型高血压临床研究

目的:研究加味黄连温胆汤对痰热互结型代谢综合征(Metabolic syndrome,MS)合并H型高血压的改善作用。方法:选择48例符合痰热互结型MS合并H型高血压患者,随机分为两组,对照组予常规基础治疗,包括改善生活方式,针对高血压、高血糖、高血脂分别予降压、补充叶酸、降糖、调节血脂治疗,治疗组在对照组基础上加服加味黄连温胆汤,治疗4周后观察MS和H型高血压各组分指标。结果:两组患者治疗后中医证候积分较治疗前明显下降,且治疗组优于对照组(P<0.05);临床疗效方面,治疗组总有效率达87.5%,对照组总有效率70.8%,治疗组优于对照组(P<0.05);治疗后治疗组形体学指标BMI、WHR优于对照组,治疗组血压、血HCY水平、空腹血糖(FBG)、餐后2小时血糖(2 h BG)、糖化血红蛋白(HbAlc)、TG、TC、LDL-C水平明显降低,HDL-C水平升高,且明显优于对照组(P<0.05)。结论:加味黄连温胆汤联合常规治疗能够有效改善痰热互结型代谢综合征合并H型高血压患者中医证候,并改善其代谢异常状态。

黄连温胆汤含药血清对胰岛素抵抗脂肪细胞改善作用的蛋白质组学研究

目的:探索黄连温胆汤含药血清改善脂肪细胞胰岛素抵抗的可能机制。方法:将3T3-L1成纤维细胞分为空白组、模型组和中药组,对模型组和中药组3T3-L1成纤维细胞进行诱导分化,构建胰岛素抵抗3T3-L1脂肪细胞模型。空白组、模型组分别给予空白血清刺激,中药组给予黄连温胆汤含药血清。使用TMT标记、液相色谱-质谱联用分析,并运用GO分析和KEGG pathway分析方法对获得的差异表达蛋白进行生物信息学分析。结果:本实验中3组样本共鉴定到4 982个蛋白质,其中4238个蛋白质具有定量信息。模型组与空白组间上调蛋白210个,下调蛋白399个;中药组和空白组间上调蛋白221个,下调蛋白98个;中药组和模型组组间比较上调蛋白310个,下调蛋白142个。GO分析结果示中药组/模型组间差异表达上调蛋白显著富集于DNA复制、核染色质、蛋白结合等分类中,下调蛋白显著富集于氧化还原、脂肪酸β氧化等分类。KEGG pathway富集分析示,差异表达上调蛋白富集于10条通路中,富集较显著的通路为DNA复制、细胞循环、不匹配修复等通路;差异表达下调蛋白富集于25条通路中,富集较显著的通路为过氧化物酶体、脂肪酸降解、脂肪酸代谢等通路。结论:黄连温胆汤含药血清改善胰岛素抵抗效果确切,其机制是通过多靶点、多通路协同、整体调控作用完成的。

转基因抗病玉米对土壤可培养细菌的影响

采用平板分离法,研究了转几丁质酶基因抗病玉米和非转基因玉米之间不同生长时期土壤可培养细菌数量的变化,同时采用RAPD技术研究了不同生长时期土壤可培养细菌群落结构的变化。结果显示,转几丁质酶基因抗病玉米与非转基因玉米相比,根际土壤中细菌数量在成熟期存在显著差异(P≤0.05),而根区外围土壤中各生长时期的细菌数量未产生显著差异(P≥0.05);RAPD的聚类分析结果表明,根际土壤中生长期细菌的群落结构相似度最低,而根区外围土壤中不同生长时期细菌群落结构相似度差异较小。

PDCD5蛋白联合米非司酮对前列腺癌细胞增殖及相关基因表达的影响

目的观察PDCD5蛋白协同米非司酮（MIF）对前列腺癌细胞增殖及相关基因表达的影响。方法MTT法分别检测10、20、50和100μmol/L MIF作用于PC-3M细胞24-96 h的吸光度（A）值。扩增包含PDCD5序列的真核表达载体PCI-neo-PDCD5，用脂质体介导的方法转染前列腺癌PC-3M细胞。在转染PDCD5的细胞中分别加入10、20μmol/L MIF，继续培养24 h，MTT比色法检测细胞增殖，RT-PCR方法检测细胞增殖相关基因CyclinD1、Ki-67的表达。结果MTT实验表明，与对照组相比，10μmol/L MIF组的A值差异无统计学意义（P〈0.05），20、50和100μmol/L MIF组的A值显著降低（P〈0.05），MIF对前列腺癌PC-3M细胞的抑制作用呈剂量依赖性；PDCD5真核表达载体成功转染PC-3M细胞并得到了瞬时表达，转染PCI-neo-PDCD5并加入MIF后，与对照组及单独应用MIF组相比，细胞增殖受到明显抑制（P〈0.05），增殖相关基因CyclinD1、Ki-67表达降低。结论PDCD5蛋白能够协同米非司酮抑制前列腺癌PC-3M细胞增殖，可能是通过调节某些增殖相关基因的表达来实现的，并有望成为前列腺癌的辅助治疗药物。