几种化学修饰的三角褐指藻胞内多糖对宫颈癌Hela细胞增殖的抑制效果比较

为探究化学修饰对三角褐指藻胞内多糖抑制宫颈癌Hela细胞增殖抑制效果的影响。该研究采用超声破壁法结合热水辅助浸提法提取三角褐指藻胞内多糖PTP(Intracellular Polysaccharide from Phaeodactylum tricornutum),对三角褐指藻胞内多糖PTP进行四种化学修饰(硫酸化修饰、磷酸化修饰、乙酰化修饰和羧甲基化修饰),对三角褐指藻胞内多糖PTP、硫酸化多糖S-PTP、磷酸化多糖P-PTP、乙酰化多糖A-PTP和羧甲基化多糖C-PTP进行抑制宫颈癌Hela细胞增殖活性研究。结果显示,得到的硫酸化多糖S-PTP取代度为0.714,S-PTP较PTP抑制宫颈癌Hela细胞增殖率最大可提高9.22%、磷酸化多糖P-PTP取代度为0.191,P-PTP较PTP抑制宫颈癌Hela细胞增殖率最大可提高4.01%、乙酰化多糖A-PTP取代度为0.513,A-PTP较PTP抑制宫颈癌Hela细胞增殖率最大可提高13.53%,羧甲基化多糖C-PTP取代度为0.915,C-PTP较PTP抑制宫颈癌Hela细胞增殖率最大可提高8.39%。研究结果显示,四种修饰多糖对Hela细胞增殖抑制效果较PTP均有所提升,化学修饰对Hela细胞增殖抑制提升效果最大的为乙酰化修饰,A-PTP较PTP抑制宫颈癌Hela细胞增殖率最大可提高13.53%,达到46.05%。该实验通过对三角褐指藻多糖PTP进行化学修饰,证明三角褐指藻多糖在分子结构上引入新的化学基团对抑制宫颈癌细胞增殖有着较大影响,对进一步研究三角褐指藻的生物活性提供了重要参考,为后续的药物研发提供实验基础。

小球藻的甲基磺酸乙酯诱变及产EPA的条件研究

小球藻是海水养殖系统中常用的单细胞微藻,繁殖能力强,易于规模化培养,且可合成不饱和脂肪酸EPA、DHA等多种活性物质,在医疗和保健品开发中具有很高的应用价值。目前商业化培养的藻种多从自然界中直接获得,活性物质的产量较低且藻种易退化。为了获得EPA产量更高的藻种,该研究利用0.6%EMS对小球藻进行诱变,利用尼罗红染色法进行初筛并通过单细胞分离技术得到1株突变株EC1,通过气象色谱测定其EPA产量。结果表明:与出发藻株相比,突变株EPA(二十碳五烯酸)产量提高了8.97%。根据单因素试验确定突变株生长及产EPA的合适培养条件,再通过正交试验筛选出培养条件的优化组合,表明突变藻EC1株产EPA的较适条件为NaNO_375 mg·L^-1,p H7.5,昼夜温度17~15℃,接种量为12%,在此条件下培养7d其EPA的产量可达25.38 mg·g^-1,传代实验表明突变藻株具有较好的遗传稳定性。该研究结果为进一步利用小球藻规模化生产EPA奠定了基础。

三角褐指藻的诱变育种及产EPA的条件研究

旨在获得不饱和脂肪酯EPA产量更高的藻种,利用0.6% EMS对三角褐指藻进行诱变。通过单细胞分离技术得到1株突变株EP1,其EPA产量比出发藻株提高了19.81%。结果显示,突变藻株产EPA的最适条件为:NaNO3 75 mg/L,pH7.5,昼夜温度17-15℃,接种量为12%。最适条件下培养7 d,其EPA产量可达26.77 mg/g。传代试验表明,突变藻株具有较好的遗传稳定性。

马传染性贫血野毒辽宁株前病毒全基因组核苷酸序列测定

采取马传染性贫血病毒（ＥＩＡＶ）辽宁野毒株（Ｌ株）感染马的血液，分离白细胞。提取白细胞中的ＤＮＡ，并以此为模板，利用ＰＣＲ技术分四个片段扩增 ＥＩＡＶ前病毒 ＤＮＡ。将其分别克隆到载体质粒 ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔ ＳＫ中，经酶切鉴定后测序。对测序结果分析、拼接，得到 ＥＩＡＶ Ｌ株前病毒基因组全序列。

以创新创业能力培养为核心的地方高校实践教学改革——以广西民族大学为例

本文以广西民族大学为例论述基于学生创新创业能力培养的地方高校实践教学改革,提出构建“三阶段、四平台、五能力”的实践教学体系,将创新创业能力培养融入专业教育之中,贯穿人才培养全过程,有效地提高学生的创新创业能力,以期为地方本科高校开展实践教学提供借鉴。

菱形藻HE06产二十碳五烯酸培养条件优化

二十碳五烯酸(eicosapentaenoic acid,EPA)对缓解心律不齐、高血压等疾病具有重要作用,对调节情绪、治疗风湿性关节炎及哮喘也具有积极意义。通过优化氮源和碳源、添加生长因子等途径提高菱形藻HE06的EPA产率。经优化得到硝酸钠、氯化铵、尿素、维生素B1、维生素B12、生物素、葡萄糖、甘油、碳酸氢钠的最佳质量浓度分别为75 mg/L、5 mg/L、30 mg/L、1.5 mg/L、6μg/L、10μg/L、1.2 g/L、2.4 g/L、1.2 g/L。在最佳优化条件下,EPA产率由最初的31.2μg/L提升至504.8μg/L,提高了15倍;生物量产率由19.5 mg/L提高至32.4 mg/L,提高了66.2%。

血清稀释液的筛选及犬抗狂犬病病毒血清抗体正常值范围的确定

应用间接ELISA法进行抗体检测是评价狂犬疫苗免疫效果的一种快捷有效手段。首先筛选得到一种灵敏、特异的血清稀释液;然后应用其对采集自不同地区的812份未免疫犬血清稀释并进行间接ELISA检测;以OIE标准阴、阳性犬血清为对照,随机选取不同A450范围的犬血清应用RFFIT进行检测;以RFFIT效价低于0.1 IU/ml的犬血清,计算阴性血清正常值范围和95%的可信区间,并建立标准品的回归方程。结果显示：所筛选到的血清稀释液灵敏、特异,有756份血清样品的效价低于0.1 IU/ml,犬抗狂犬病抗体阴性血清的正常值范围为0.127 3±0.059 8,95%的可信区间为0.078 1-0.172 3。应用OIE犬阳性血清标准品建立了A450和抗血清效价的回归方程：A=1.139 IU＋0.470。该试验结果为犬狂犬病防制以及犬狂犬病抗体ELISA检测试剂的研制奠定了基础。

基因打靶技术的研究进展

基因打靶技术是一项新兴的分子生物学技术,是利用外源DNA与受体细胞染色体DNA上的同源序列之间发生重组,并整合在预定位点上,从而改变细胞遗传特性的方法。它的产生是遗传工程领域的一次革命,为发育生物学、分子遗传学、免疫学及医学等学科提供了一个全新的、强有力的研究手段。目前基因打靶技术在研究基因的结构和功能、表达与调控,转基因及基因治疗等方面均取得了进展。但基因打靶技术仍存在一些问题,主要是打靶的效率太低。本文综述了基因打靶技术的原理、操作程序并对提高基因打靶效率的可能途径进行了探讨。

一株内源性猪细小病毒的分离与鉴定

本研究从不明病毒污染的ＰＫ１５细胞培养物中分离到了一株猪细小病毒，从形态学、血清学、分子生物学几个方面对其进行了鉴定，同时克隆了该毒株ＶＰ２基因，并测定了其核苷酸序列。将该毒株命名为ＳＹ－９９株。

鸡传染性法氏囊病病毒流行株VP1部分序列及VP2高变区序列分析

为了对鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)的13个地方分离株与3个商品疫苗株的VP1-b基因(756 bp～1 522 bp)进行同源性和遗传进化分析,本研究对其进行RT-PCR扩增和序列测定。结果表明,获得的VP1-b基因长度均为767 bp;13个分离株VP1-b节段核苷酸和氨基酸同源性分别为90.7%～100%和72.9%～100%,其中10株超强毒分离株与经典株、弱毒株、疫苗株的同源性较高,核苷酸和氨基酸同源性分别为95.7%～100%和94.5%～100%,所有12个超强毒分离株与超强毒参考病毒株的同源性均较低,核苷酸同源性仅为68.2%～79.2%;在遗传进化分析中,所有病毒株被分为3个分支,与相应病毒株的基于IBDV-VP2高变区(vVP2)序列的遗传进化树比较并结合同源性分析结果表明,除了弱毒株HUN0804之外,其它12个分离株可能均为重组病毒。据此推测,基因重组可能是目前IBDV流行的新趋势。

猪细小病毒SY-99株VP2基因的序列分析

克隆并测定猪细小病毒 SY- 99株VP2基因 ,与 NADL- 2 ( 4 973)株、NADL- 2( 5 0 75 )株、Kresse株和 US- 1株 VP2基因核苷酸序列及其编码的氨基酸序列进行比较与分析 ,发现 PPV SY- 99株与 Kresse株 VP2基因核苷酸和氨基酸同一性最高 ,推测 SY-99株可能为一强毒株。

微藻多糖的研究进展

针对微藻多糖的结构组成、分离纯化技术和主要生物活性进行概述,并对其研究进展提出展望。

微生物几丁质酶的特性及其应用的研究进展

几丁质酶可以降解几丁质,其降解产物可以用于抗虫、医药、化工、食品等领域.目前已从微生物中获得多种几丁质酶并克隆其几丁质酶基因.本文主要对产几丁质酶微生物的分类及其分布特点、微生物几丁质酶的性质、结构、基因调节及应用等进行综述。

一种稳定、灵敏且适用于ELISA的四甲基联苯胺底物

目的评价一种适用于酶联免疫吸附试验(ELISA)的即用型自制四甲基联苯胺(TMB)底物的特性。方法比较1-Step Turbo TMB底物、A/B两组分混合物底物和自制底物与不同稀释度酶标抗体的反应性及其对包被抗体的检测敏感性,对1-Step Turbo TMB底物和自制底物进行稳定性比较。结果 3种底物的吸光度(A)值均随着酶标抗体稀释度的增大而显著下降;当酶标抗体稀释度相同时,自制底物的A值显著高于另外2种底物(P<0.05);在直接ELISA条件下,自制底物对包被抗体的检测敏感性可达15.63 ng/mL;自制底物37℃贮存60 d后的A值仍高于1-Step Turbo TMB底物37℃贮存5 d的A值。结论该即用型自制TMB底物在检测敏感性及稳定性上优于1-Step Turbo TMB底物。

海洋微生物几丁质酶的研究进展

对海洋微生物几丁质酶的来源、性质和催化机制等方面的最新研究进展进行综述。

一种包被抗原稳定剂的研制及其特性鉴定

以纯化的狂犬病病毒2μg/mL包被酶标板,将乳糖、麦芽糖、蔗糖和海藻糖分别以5%(W/V)的终浓度加到1%BSA+4%PEG的PBS中,所制备的溶液作为封闭剂,研究其对于37℃贮存板的稳定性,从中选取最佳的封闭剂组合,并研究其对于乙肝表面抗原、猪瘟病毒E2抗原和猪繁殖与呼吸综合征nsp2基因原核表达产物在包被状态下的稳定性。结果显示,以1%BSA+4%PEG+5%蔗糖的PBS溶液的封闭效果最佳,该封闭剂对于乙肝表面抗原、猪瘟病毒E2抗原和猪繁殖与呼吸综合征nsp2基因原核表达产物也具有良好的稳定性。

新型兽用疫苗的研究进展

新型兽用疫苗是免疫学和病毒学的研究热点 ,主要包括亚单位疫苗、基因工程缺失苗、重组病毒活载体疫苗和基因疫苗。目前已经被广泛的应用于研究和疫病的防治上。最近的疫苗发展方向集中于在基因疫苗上。高效、安全、稳定、成本低是疫苗开发的重点。本文介绍了新型疫苗的现状 ,以及今后发展的趋势和策略。

犬细小病毒病临床治疗探讨

对到莱阳农学院动物医院就诊的２７０只细小病毒病患犬分别进行了中、西医单独疗法和中西医结合疗法的尝试，并进行了跟踪调查统计。结果：９７例采取西医疗法，治愈率８１．４％；６９例采取中医疗法，治愈率７３．９％；１０４例采取了中西医结合疗法，治愈率９２．３％。结果表明中西医结合治疗能弥补中、西医单独疗法之不足，菌毒兼杀，标本兼顾，大大提高治愈率。

有机化学实验教学中研究生助教管理的探索

有机化学实验课是培养学生化学基本技能的重要课程。研究生助教实验教学的管理是高校教学管理的一部分。作者根据有机化学实验的特点和助教实践的体会,以保证实验教学质量,提高研究生助教教学水平为着眼点,深入分析了有机化学实验教学中研究生助教工作存在的问题,进而提出相关的解决方案。