IL2rg^(-/-)大鼠支持人RSV在体内的长期感染

目的为了克服已有人呼吸道合胞病毒(human respiratory syncytial virus,hRSV)动物模型的局限性,如半受纳性和感染持续时间短,本文利用TALEN基因编辑技术建立了IL2rg基因敲除(IL2rg^(-/-))的大鼠模型。方法用hRSV滴鼻感染该动物模型,观察感染期(0~35 d)的临床表征、体重及体温变化;记录不同时间点(滴鼻感染后第4、11、20、35天)鼻腔、气管、肺等呼吸道脏器的病毒总拷贝数;在观察终点(滴鼻感染后第35天)对感染动物的靶器官进行病理分析;观察不同时间点(滴鼻感染后第4、20、35天)外周血T、B、NK、NKT细胞的变化及不同时间点多种细胞因子的变化。结果(1)通过鼻内接种hRSV后,纯合的IL2rg基因敲除大鼠的呼吸道内能保持较高的病毒载量,鼻腔中病毒的平均峰值滴度能快速升至1×10^(10 )copies/g,至第5周时,病毒依然能维持复制,病毒载量亦可达到1×10^(7)copies/g。(2)但其鼻、气管和肺组织,无明显病变。(3)感染hRSV的IL2rg^(-/-)大鼠外周血B细胞含量有上升。(4)IL-6和MCP-1两种细胞因子都在感染前期上升,在观察终点回落。结论本研究基于TALEN技术建立了IL2rg^(-/-)大鼠模型,并发现该模型能很好地支持hRSV高水平复制和并长期感染,为抗病毒药物筛选、抗hRSV抗体体内效力评价,提供了良好的动物模型。

湿法混炼丁腈橡胶/高岭土复合材料的流变特性和力学性能

采用湿法混炼制备了丁腈橡胶/高岭土(NBR/Kaolin)复合材料,同时与传统干法混炼进行对比,研究了NBR/Kaolin复合材料的硫化特性、流变特性以及力学性能。结果表明,湿法混炼得到的NBR/Kaolin复合材料的交联程度较大,硫化时间较短,拉伸强度和断裂伸长率更优异,其中拉伸强度提升了147%、断裂伸长率提升了36%。通过专门设计的橡胶加工分析(RPA)测试程序测定了NBR/Kaolin复合材料的流变特性,证明了湿法混炼工艺使NBR和Kaolin之间的相互作用更强,对应的NBR/Kaolin复合材料的力学性能也更加优异。

接枝反应温度和时间对NBR/CNC-g-AA复合材料性能的影响

利用溶液法,以硝酸铈铵为引发剂,将丙烯酸(AA)接枝到纤维素纳米晶(CNC)上进行改性得到接枝产物丙烯酸接枝纤维素纳米晶(CNC-g-AA),并且与丁腈橡胶(NBR)共混,制备NBR/CNC-g-AA复合材料,研究接枝反应温度和反应时间对NBR/CNC-g-AA复合材料硫化特性、力学性能和耐磨性能的影响。结果表明,CNC-g-AA在1720 cm-1处出现红外吸收峰,说明CNC-g-AA制备成功;接枝反应温度和反应时间对NBR/CNC-g-AA复合材料的硫化特性无明显影响规律,但是对其拉伸性能和耐磨性能有着不同影响规律,并且当接枝反应温度为35℃、反应时间为60 min时,NBR/CNC-g-AA复合材料的拉伸性能和耐磨性能均达到最优值。

hKDR^(+/+)人源化及Rag1^(-/-)基因缺陷新型双靶点遗传修饰荷瘤小鼠模型的建立

目的通过增强血管内皮生长因子受体(vascular endothelial growth factor receptor,VEGFR)人源化小鼠(hKDR^(+/+))接纳不同来源的小鼠肿瘤细胞系的潜力,建立能支持多种肿瘤细胞系成瘤的、可评价针对VEGFR靶点药物的新型荷瘤小鼠模型。方法首先建立基于hKDR^(+/+)人源化小鼠模型评价针对VEGFR靶点抗体体内活性的方法,同时采用CRISPR/Cas9技术构建重组激活基因1(recombination activating gene 1,Rag1)敲除的C57BL/6N小鼠(命名为Rag1^(-/-)小鼠)。然后将Rag1^(-/-)小鼠与hKDR^(+/+)小鼠交配,筛选获得双基因纯合、双靶点基因修饰的hKDR^(+/+)/Rag1^(-/-)小鼠。最后在hKDR^(+/+)、Rag1^(-/-)、hKDR^(+/+)/Rag1^(-/-)和C57BL/6N小鼠上测试不同小鼠品系来源肿瘤细胞系的体内肿瘤生长差异。结果针对VEGFR靶点设计的抗体在hKDR^(+/+)小鼠体内表现出明显的抗肿瘤活性,与PBS组相比,肿瘤体积明显减小(P<0.01),肿瘤质量明显减轻(P<0.05)。Rag1^(-/-)小鼠、hKDR^(+/+)/Rag1^(-/-)小鼠的外周血B细胞和T细胞数量均明显减少(P<0.05,P<0.001)。C57BL/6小鼠来源的MC38细胞接种7 d后,在hKDR^(+/+)/Rag1^(-/-)、Rag1^(-/-)、C57BL/6N和hKDR^(+/+)四组小鼠体内均可见肿瘤生长。BALB/c小鼠来源的CT26细胞接种10 d后,仅在hKDR^(+/+)/Rag1^(-/-)和Rag1^(-/-)小鼠体内见到肿瘤生长,在C57BL/6N及hKDR^(+/+)小鼠中均未见肿瘤生长;接种后3周,hKDR^(+/+)/Rag1^(-/-)小鼠的成瘤体积明显大于Rag1^(-/-)小鼠(P<0.01)。结论获得了Rag1基因敲除小鼠,并进一步筛选获得新型hKDR^(+/+)/Rag1^(-/-)双靶点基因修饰小鼠模型;Rag1基因缺失时,不同品系小鼠来源的肿瘤细胞系更易成瘤。这提示可以通过降低hKDR^(+/+)人源化小鼠的免疫反应能力,增强或扩大该模型小鼠接纳肿瘤细胞系的范围,构建多种可用于评价VEGFR靶点药物的荷瘤小鼠模型。

基于弱光增强与YOLO算法的锯链缺陷检测方法

在基于机器视觉的锯链缺陷实时检测过程中,油污、粉尘等因素影响图像亮度和质量,导致目标检测网络的特征提取能力下降。为保证复杂环境下锯链缺陷检测的准确率,本文设计了一种结合弱光增强和YOLOv3算法的锯链自动化缺陷检测方法。首先使用RRDNet网络自适应增强锯链图像亮度,恢复图像暗区的细节特征;然后采用改进YOLOv3算法对锯链零件进行缺陷检测,增加FPN结构特征输出图层,利用K-means聚类算法对先验框参数重新聚类,并引入GIoU损失函数来提高小目标的缺陷检测精度。最后搭建一套锯链缺陷在线检测系统,对所提方法进行验证。实验结果表明,该方法能够显著提高弱光环境下的锯链图像照度、恢复图像细节,改进YOLOv3算法的mAP值为92.88%,相比原始YOLOv3提高14%,最终系统整体的漏检率降低到3.2%,过检率也降低到9.1%。所提出的方法可实现弱光场景下锯链缺陷的在线检测,并且对多种缺陷有着较高的检测精度。

江苏省卫生地方标准工作现状分析

目的分析江苏省卫生地方标准发展现状,提出优化建议。方法采用数据库检索方式进行分析。结果江苏省卫生地方标准制定主体以卫生行政部门为主,技术标准数量较多。75.00%的标准标龄较短,标准更新较少。江苏省卫生地方标准以职业健康领域标准为主,存在总体标准数量较少、分类依据不清晰、缺乏系统性及全面性指导、第三方主体作用不突出、标准重制定而轻执行等问题。结论江苏省卫生地方标准在促进江苏省卫生领域发展,完善卫生健康管理体系方面发挥着重要作用。建议建立健全标准化工作政策法规,强化标准实施,建立标准专业化队伍,推动行业标准化工作发展。

利用新媒体技术提升文化馆参与度研究

随着新媒体技术的迅速发展,其在文化传播和参与度提升方面的潜力逐渐显现。文章旨在探讨如何有效地运用新媒体技术,提升公众的文化馆的参与度。新媒体技术能够提供更为丰富多样的互动方式,打破时间与空间的限制,使文化馆的展览与活动更加生动、有趣,从而吸引更多公众的关注和参与。通过建立科学的新媒体运用策略,加强人才培养,加大技术研发和应用力度,可以有效提升文化馆利用新媒体技术的能力,从而增强公众的参与度和文化馆的社会影响力。

果蔬多糖生物活性及其提取纯化技术的研究进展

果蔬是日常膳食中重要的组成部分,富含维生素、矿物质和生物活性物质等对人体健康起重要作用的成分。多糖是生物活性物质中重要的一种,具有抗肿瘤、抗氧化、抗衰老、抗凝血、降血糖、降血脂等多种保健作用。作为一种天然活性物质,果蔬多糖较突出的优点是来源广泛、无毒副作用。我国果蔬资源丰富,对果蔬多糖的研发具有得天独厚的优势。本文介绍了果蔬多糖的分类,列举了常见果蔬多糖的组成结构,阐明了果蔬多糖的生物活性作用机理及其研究进展,综述了果蔬多糖的提取纯化技术的应用现状,分析了果蔬多糖提取纯化过程中存在的问题及解决途径,并结合实际展望了果蔬多糖的发展与应用前景。

酶制剂在果蔬汁澄清及加工中的应用研究进展

当前我国果蔬汁工业迅猛发展,因酶制剂可解决果蔬汁加工中出汁率低、澄清难、易褐变、风味物质易流失和苦味物质难去除等问题,在该领域中得到广泛的应用。目前在果蔬汁加工中应用的酶制剂主要有果胶酶、纤维素酶、淀粉酶、葡萄糖氧化酶、柚苷酶等。本文介绍了果胶酶、纤维素酶、淀粉酶等常见酶制剂在提高果蔬出汁率方面的作用机制及应用进展,比较了酶制剂与其他方法对果蔬汁澄清效果的差异,陈述了葡萄糖氧化酶、柚苷酶、β-葡萄糖苷酶等在改善果蔬汁感官品质方面的应用现状。在分析酶制剂在果蔬汁加工中存在问题的基础上,对酶制剂的应用前景和发展方向进行了展望,为酶制剂在果蔬汁行业的应用提供进一步的依据和参考。

支持向量机与RBF神经网络回归性能比较研究

支持向量机与RBF神经网络相比各有优缺点,通过对支持向量机与RBF神经网络的研究,从理论上分析了这两种学习机在回归预测原理上的异同,通过仿真实验对比了两者在测试集上的逼近能力及泛化能力。仿真结果表明,对于小样本集,支持向量机的逼近能力及泛化能力要优于RBF神经网络。对实际应用中回归模型的选择问题提出了建议。

南果梨汁响应面复合酶法制取工艺优化

本文以南果梨为原料,研究了复合酶法制取南果梨汁最优工艺。通过单因素实验研究复合酶添加量、酶解时间、果胶酶与纤维素酶配比和酶解温度对南果梨出汁率和可溶性固形物含量的影响;在此基础上,采用Box-Behnken实验设计法,优化复合酶酶解南果梨汁工艺参数,以提高南果梨出汁率和可溶性固形物含量。结果表明:在复合酶添加量0.15%、酶解时间119 min、酶比例3∶1、酶解温度42℃的条件下,南果梨出汁率达78.15%,与理论值77.42%基本相符(相对误差0.93%);与未经酶处理相比,出汁率提高了12.92%,可溶性固形物含量提高了1.72%。由实验结果可知,经复合酶酶解后南果梨出汁率和可溶性固形物含量等相关理化指标均有显著提高。

c-Ha-ras在转基因小鼠模型C57-ras各组织中的表达谱分析

目的:分析转基因c-Ha-ras在C57-ras癌症小鼠模型中的组织表达谱及时空表达差异。方法:利用半定量及荧光定量RT-PCR法,分析不同首建鼠系、不同周龄小鼠各脏器中转基因c-Ha-ras的表达。结果:转基因c-Ha-ras在心、肝等13种组织器官中均有表达,在肺脏中表达最高,在肝脏中表达最低,No.2、No.3和No.5等3个首建鼠均呈现相似的变化规律;转基因在No.5首建鼠中表达水平最高,而在同一个首建鼠系中,12周龄时表达高于8周龄和24周龄。结论:转基因c-Ha-ras在各脏器中能高效表达,并间接表明该转基因能稳定遗传,为C57-ras癌症小鼠模型用于新药临床前致癌性评价提了供理论支持。

模式小鼠总DNA三种提取方法比较

目的建立简便、快捷、经济的模式小鼠总DNA提取方法,以快速鉴定大批量模式小鼠基因型。方法采用苯酚抽提法、异丙醇沉淀法、鼠耳煮沸法提取同种模式小鼠总DNA,对比DNA纯度、得率、耗费时间,并比较基因型鉴定结果。结果苯酚抽提法得率最高,异丙醇沉淀法最低;而纯度则按照苯酚抽提法、异丙醇沉淀法、鼠耳煮沸法顺序递减;在耗时上鼠耳煮沸法最短。三种方法提取的DNA均可做模版用于基因型鉴定。结论鼠耳煮沸法操作简单、成本最低,快速、基因型鉴定结果可靠,可用于规模化的基因型鉴定实验中。

白炭黑对再生顺丁橡胶/聚烯烃弹性体热塑性硫化胶性能的影响

采用动态硫化技术制备再生顺丁橡胶(RBR)/聚烯烃弹性体(POE)共混型热塑性硫化胶(TPV),研究硫黄硫化体系RBR/POE TPV的硫化特性、白炭黑对TPV物理性能和动态力学性能的影响。结果表明:RBR/POE TPV在硫黄硫化体系下能够继续硫化;随着白炭黑用量的增大,RBR/POE TPV的300%定伸应力和拉伸强度增大,拉断伸长率和拉断永久变形减小;偶联剂Si69改性白炭黑补强RBR/POE TPV的300%定伸应力、拉伸强度和储能模量与未改性白炭黑补强体系相比明显增大,拉断伸长率和拉断永久变形有所降低。

四氯化碳诱导近交系C57BL/6小鼠建立肝纤维化模型

目的比较不同剂量四氯化碳诱导近交系C57BL/6小鼠肝纤维化模型的效果,以建立稳定的肝纤维化模型。方法选择5周龄的C57BL/6近交系小鼠,分别腹腔注射给予高、中、低剂量的四氯化碳诱导肝纤维化,实验结束后取血及肝脏组织,检测血浆丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)的水平及肝脏病理变化。结果近交系C57BL/6小鼠药物诱导后,各剂量组动物均能存活到8周,高剂量组存活率仅为20%远低于中、低组;血清转氨酶含量升高程度、肝组织病理改变存在剂量时间效应关系。病理分析表明,各剂量组均可见肝细胞变性/坏死、中央静脉周围/汇管区混合细胞浸润及肝脏纤维化。结论10%四氯化碳给药8周后能诱导近交系C57BL/6小鼠形成较稳定的肝纤维小鼠模型,为后续肝纤维化机制研究及药物筛选工作奠定了基础。

优化支持向量机核参数的核矩阵方法研究

参数选取问题一直是支持向量机研究的热点.虽然核校准(KTA)方法广泛应用于支持向量机参数优化问题中,但是它仍存在不足.以核矩阵为研究出发点,深入分析了采用核校准方法优化核参数对分类性能的影响,然后综合核校准方法和特征空间中样本集的分布提出了一种核校准改进方法.对比实验表明该算法是有效可行的.

球形杀伤元侵彻明胶数值仿真系统的设计与开发

在侵彻明胶的研究分析中,材料模型的确定及仿真分析的过程是较为复杂的。为快捷的完成球形杀伤元侵彻明胶的仿真分析,利用ANSYS软件中提供的参数化语言APDL,并结合通用编程工具VB开发出了球形杀伤元侵彻明胶的仿真分析系统,实现了结构建模及分析过程的参数化。系统可完成不同直径球形杀伤元在不同材料、入靶速度等参数下侵彻明胶的数值仿真分析计算。通过对实验数据与仿真结果的对比分析,验证了仿真计算结果的正确性和系统的实用性。并利用此系统进行了对不同入靶速度和直径钢球侵彻明胶的过程仿真,分别研究了入靶速度和直径对杀伤元速度衰减及最大瞬时空腔的影响情况。

基于Cre-LoxP系统的条件性定点敲入人源hRas基因小鼠的建立

目的构建基于Cre-LoxP系统的条件性定点敲入人源hRas基因(c-Ha-ras)的小鼠,以获得hRas基因在特定组织器官条件性表达的小鼠模型,用于药物的临床前致癌性安全评价及相关机制研究。方法首先构建hRas打靶载体,电击法转染入小鼠胚胎干细胞(ES细胞),用正负法筛选阳性ES细胞,通过PCR、Southern鉴定后,将正确重组hRas基因的ES细胞导入C57BL/6 J小鼠囊胚,移入同步发育的受体鼠子宫,妊娠足月出生的嵌合体小鼠与C57BL/6 J小鼠交配获得杂合子hRasfl/+小鼠。再将杂合子hRasfl/+小鼠间交配获得纯合子小鼠hRasfl/fi,然后与全身组织细胞表达Cre重组酶的Tg(EIIa-cre)小鼠进行交配,获得全身细胞表达hRas基因的hRas-EIIa-cre小鼠,并通过荧光定量PCR方法检测不同日龄胚胎期仔鼠的hRas基因表达水平。结果成功构建了基于Cre-LoxP系统的人源hRas基因条件性定点敲入小鼠模型的载体,筛选得到的一个正确克隆,电转ES细胞后进行Southern blot鉴定,经过初筛和复筛,共获得12个阳性克隆,挑选A11号克隆ES细胞进行囊胚注射,移植了48枚胚胎,出生9只小鼠,其中6只为嵌合鼠,将嵌合率>50%的雄鼠与野生型C57BL/6 J雌鼠进行交配,出生21只后代,其中鉴定有4只hRasfl/+小鼠;hRasfl/+小鼠间交配出生29只小鼠,其中有14只纯合子hRasfl/fi小鼠;hRasfl/fl小鼠与Tg(EIIa-cre)工具鼠交配6次,未有仔鼠出生;跟踪不同发育时期胚胎中hRas基因的表达发现,E10.5~15.5 d胚胎中检测到hRas基因表达。结论成功建立运用Cre-LoxP系统建立了带有hRas基因敲入的纯合子小鼠hRasfl/fl,未能得到全身细胞高效表达人源hRas基因的hRas-EIIa-cre小鼠,但为进一步利用hRasfl/fl小鼠模型建立其他组织特异性的条件性基因敲入小鼠模型做好技术储备。

C57-ras转基因小鼠模型杂交1代CB6F1的生长发育特性

目的测定自主建立的转基因致癌性模型C57-ras小鼠与BALB/c小鼠杂交1代的生长发育特性参数,为该模型的商业化供应提供基础数据。方法将雄性转基因阳性C57-ras小鼠与野生型雌性BALB/c小鼠交配,获得杂交1代(CB6F1 c-Ha-ras+/-)并测定平均产仔数、离乳率、阳性鼠生长发育情况、转基因阳性率等参数。结果在生长发育方面,雌鼠平均每窝产子数为8只,离乳率为90%,雄雌性别比符合预期。CB6F1的平均出生重为(1.73±0.05)g,10周龄时阳性鼠平均体重雌性(24.38±1.74)g,雄性(29.42±1.72)g。雄性鼠体重明显高于雌性,差异存在极显著性(P<0.01);基因型检测阳性率为46.9%,符合遗传规律。结论转基因致癌性模型C57-ras小鼠与BALB/c小鼠杂交1代的生长发育特性正常,可实现规模化商业供应。

纸质包装箱的灭菌条件及其在屏障环境下的存放时限

目的研究实验动物纸质包装箱的灭菌条件及其在屏障环境下的存放时限。方法将包装箱用预真空高压蒸汽法灭菌,比较不同灭菌时间的灭菌效果;将彻底灭菌的包装箱在屏障环境下存放,检测不同存放时长下细菌生长情况。结果采用预真空高压蒸汽灭菌法抽真空3次、干燥5 min、121℃、25 min的灭菌条件能较彻底灭菌;存放时间3天以内,细菌检出率低。结论要实现包装箱灭菌彻底,灭菌时间需25 min;灭菌后的包装箱最好随灭随用,在屏障环境下存放的时间以不超过3天为宜。